利用實驗裝置檢測草酸銨產物

『叄』 草酸銨提取劑如何配置

假設實驗室配置復1000ml的此種溶制液，步驟如下:
1 、計算：需要草酸銨1*0.05*124.1=6.205(g)。
2、稱量：根據計算結果稱量草酸銨固體。
3、溶解：將稱好的的草酸銨固體放入燒杯中，用500ml的蒸餾水溶解。
4、轉移、振盪、洗滌、定容、搖勻：將燒杯的溶液注入1000ml容量瓶；並用少量的水蒸餾水洗滌燒杯內壁2～3次，洗滌液也注入容量瓶；輕輕搖動容量瓶，使溶液混合均勻；將蒸餾水注入容量瓶，液面離容量瓶頸刻度線下1～2cm時，改用膠頭滴管滴加蒸餾水至液面與刻度線相切；反復上下顛倒搖勻。
5、裝瓶，貼上標簽。

『肆』 2009初中化學競賽題

下列有關濃硫酸的描述中屬於物理變化的是（ ）
A．露置在空氣中的濃硫酸質量增加了 B．加熱銅與濃硫酸放出有刺激性氣味的氣體
C．伸入濃硫酸中的木炭變黑了 D．用濃硫酸來乾燥二氧化碳氣體
2．下表是元素周期表中部分元素的相關信息，根據有關信息判斷不正確的是（ ）
族
周期
ⅠA ⅡA ⅢA ⅣA V A ⅥA ⅦA 0
2
3
A．同一族的元素對應的原子從上往下電子層數在逐漸增加
B．同一周期的元素對應的原子的電子層數相同
C．第ⅠA的元素不一定都是金屬元素
D．同一周期的元素的金屬性逐漸增強
3．下表中列出了一定壓強和溫度下每立方厘米活性炭所能吸附的常見氣體的體積，分析表中數據與氣體的組成、性質的關系，你認為下列結論正確的是（ ）
氣體性質 H2 CO2 O2 N2 Cl2
氣體的沸點/℃ 252 78 183 196 34
被吸附體積/mL 4.5 97 35 11 494
A．氣體分子所含原子個數越多，易被吸附 B．沸點越高的氣體，越易被吸附
C．氣體是化合物時，易被吸附 D．氣體的相對分子質量越大，越易被吸附
4．醬油是一種營養豐富的生活調味品，我國政府推行的鐵強化醬油採用發酵法生產的主要過程是：將豆餅粉與20%的鹽酸混合加熱沸騰數十小時，得到醬色液體，冷卻後加入適量的飽和NaHCO3溶液，充分攪拌後再經脫色處理即可得到食用醬油，添加適量的含鐵物質就能得到鐵強化醬油。下列有關說法中不正確的是（ ）
A．加入少量的含鐵物質可以預防人的貧血
B．鹽酸在加熱沸騰過程中加速了豆餅粉轉化為醬油的速率
C．加入NaHCO3的目的是除去鹽酸
D．醬油中添加的含鐵物質為顆粒極小的鐵粉
5．下列示意圖形象地表示了A（ ）與B（ ）反應生成C（ ）其反應前後分子及數目的變化，則該反應的化學方程式中，
A、B、C的化學計量數之比為（ ）
A．1:1:1 B．2:2:1
C．2:1:2 D．1:2:3
6．某種元素化合價在化學反應前後發生了變化，則該反應為氧化還原反應。據此可判斷下列化學反應屬於氧化還原的有（ ）
A．ZnO+H2SO4=ZnSO4+H2O B．Fe2O3+3CO====2Fe+3CO2
C．Na2CO3+2HCl=2NaCl+H2O+CO2↑ D．CaCO3====CaO+CO2↑
7．向氧化銅和鐵粉的混合物中加入一定量的稀硫酸，反應後濾出不溶物。向濾液中加入薄鐵片，鐵片無任何變化。以下結論中正確的是（ ）
A．濾出的不溶物中含有銅，不可能含有鐵
B．濾出的不溶物中一定含有氧化銅，可能含有鐵
C．濾出的不溶物中可能含有氧化銅，一定含有銅
D．濾液中一定有硫酸亞鐵，不可能含有硫酸
8．通過下列實驗可以得出的結論，其中不合理的是（ ）

甲 乙 丙 丁
A．甲實驗中黃銅片能在銅片上刻畫出痕跡，可以說明黃銅的硬度比銅片大
B．乙實驗既可以說明分子在不停地運動著，又可以說明氨水顯鹼性
C．丙實驗既可以說明二氧化碳易溶於水，又可以說明二氧化碳具有酸性
D．丁實驗既可以說明一氧化碳具有還原性，又可以說明一氧化碳具有可燃性
9. 有四種無色溶液a、b、c、d，分別是H2SO4、Na2CO3、Na2SO4、Ba(NO3)2中的一種，如下實驗：①a+d→溶液+氣體;②b+c→溶液+沉澱；③b+d→沉澱e+溶液；④a+b→溶液f+沉澱，⑤e+f→溶液+氣體。則a、b、c、d依次是（ ）
A．Na2CO3、Ba(NO3)2、Na2SO4、H2SO4 B．Na2SO4、Ba(NO3)2、Na2CO3、H2SO4
C．H2SO4、 Ba(NO3)2、Na2SO4、Na2CO3 D．Ba(NO3)2、Na2SO4、H2SO4、Na2CO3
10．密閉容器內有M、N、P、Q四種物質，在一定條件下充分反應，測得反應前後各物質的質量如下表，下列說法正確的是（ ）
物 質 M N P Q
反應前質量/g 19.7 8.7 31.6 0.4
反應後質量/g 待測 17.4 19.7 3.6
A．反應後密閉容器中M的質量為19.7g B．該反應一定是化合反應
C．物質P一定是化合物 D．反應生成的N與Q的質量之比為87:18
11．某樣品中可能含有碳酸鈉、硝酸鉀或硝酸鋇三種中的一種或幾種。現將10.6克樣品加入足量的水，樣品全部溶解，再加入過量的氯化鈣溶液，得到10克沉澱，對樣品中的組成判斷合理的是（ ）
A．肯定含有硝酸鉀，可能含有碳酸鈉 B．肯定含有硝酸鉀，可能含有硝酸鋇
C．不含碳酸鈉和硝酸鋇，只含硝酸鉀 D．不含硝酸鋇和硝酸鉀，只含碳酸鈉
12．如右圖所示，燒瓶內盛有x氣體，若擠壓滴管的膠頭a，使液體y
進入燒瓶中，振盪燒瓶，並倒放在鐵架台上，將導管伸入滴有z的水中，
打開彈簧夾b，可見燒杯中液體如噴泉一樣噴入燒瓶中，並出現顏色的
改變，則x、y、z可能是（ ）
x氣體 y溶液 z試劑
A． O2 H2SO4 紫色石蕊試液
B． CO2 H2O 無色酚酞試液
C． CO Ca(OH)2 無色酚酞試液
D． HCl NaOH 紫色石蕊試液
13．18O是科實驗中常用的一種示蹤原子，用儀器可以觀測到它在化學變化中的行蹤。在某一飽和硫酸銅溶液(不含18O)中，加入ag帶標記18O的無水硫酸銅粉末(CuS04中的氧元素全部為18O)，如果保持溫度不變，其結果是（ ）
A．無水硫酸銅不再溶解，ag帶標記18O的無水硫酸銅粉末沒有發生改變
B．溶液中可找到帶標記18O的SO42，且白色粉末變為藍色晶體，其質量小於ag
C．溶液中可找到帶標記18O的SO42，且白色粉末變為藍色晶體，其質量大於ag
D．有部分帶標記18O的SO42進入溶液中，但固體質量保持不變
14．下列圖像能正確反映所對應敘述關系的是（ ）
圖A表示一定量的木炭還原氧化銅，剩餘固體質量與反應時間的關系
圖B表示t℃時，向飽和硝酸鉀溶液中加入硝酸鉀晶體，溶質質量分數與加入量的關系
圖C表示一定量的稀硫酸與鋅粒反應，溶液的質量與反應時間的關系
圖D表示向硫酸和硫酸銅混合溶液中加入氫氧化鈉，沉澱質量與加入量的關系

A B C D
15．燒杯中盛有x溶液，逐滴加入（或通入）y物質，燒杯內液體的pH變化如圖所示。則符合該變化的一組物質是（ ）
x y
A NaOH溶液 稀HCl（過量）
B 稀H2SO4 BaCl2溶液（少量）
C Ca(OH)2 CO2（適量）
D 稀NaOH H2O

得分 評卷人

二、填空題（本題包括9個小題，共40分）

16．（3 分）如圖所示，一物體懸掛在飽和的硝酸鉀溶液中，請說明在下列情況下彈簧秤讀數變化情況（填「變大」、「變小」或「不變」）。
⑴如果在恆溫時加入一定量的硝酸鉀晶體，彈簧秤讀數 。
⑵如果降低上述⑴的溶液的溫度，彈簧秤讀數 。
⑶如果向⑴的溶液中加入少量氯化鈉晶體，彈簧秤讀數 。
17．（2分）ZSM—5分子篩是由多個結構單元構成的，其中一個結構單元的化學式可表示為Si96O192。若用4個鋁原子取代其中的4個硅原子，形成的原子團所帶的電荷為 ，若用銨根離子與它結合成電中性，則需要銨根離子 個。
18．（4分）仿照下列化學方程式：
2H2S+SO2=3S↓+2H2O，NaH+H2O＝NaOH+H2↑
完成下列化學方程式：
NH3和NO2反應 ；
CaH2和H2O反應 。
19．（3分）反物質是由反粒子組成的物質。所有的粒子都有相應的反粒子，反粒子的特點是其質量、壽命等與相應的粒子相同，但電荷、磁矩等與之相反，如反氫原子的結構示意圖為 。反粒子一旦與相應的粒子碰撞，如電子碰到反電子，就會立即「湮滅」為其他物質。據最新報導，歐洲核子研究中心近日已成功地製造出約5萬個低能量狀態的反氫原子，這是人類首次在受控條件下大量製造的反物質。試回答下列問題：
⑴質子與反質子相碰撞而「湮滅」是化學變化嗎?______________________________，理由是_____________________________________________________________。
⑵請你描述一下反氧原子的構成 。
20．（5分）鋼鐵是重要的金屬材料。
⑴下列鐵製品的用途中，利用金屬導熱性的是______________（填字母，下同）。

⑵目前世界上已有50%以上的廢鋼鐵得到回收利用，其目的是 。
A. 節約金屬資源 B. 合理開采礦物 C. 防止鋼鐵生銹
⑶為防止水龍頭生銹，其表面鍍有一層鉻。鐵生銹的條件是__________________________。
⑷將生銹的鐵製品放入盛有過量稀鹽酸的洗槽中，觀察到溶液變黃，有無色氣泡逸出。寫出其中一個反應的化學方程式___________________________________________________。
21．（5分）氨氣是生產銨態氮肥的主要原料，但一經泄漏，危害十分嚴重。請根據下列相關報導，回答問題：某地一冷飲廠氨氣泄漏，液氨沖破管道，噴射而出。當時，空氣中彌漫著一股濃烈的刺激性氣味，現場溫度驟降到—30℃。搶險隊員緊急中用檸檬水淋濕全身後沖進泄漏倉庫堵泄，雖堵泄成功但搶險隊員被凍傷。已泄漏的500Kg液氨經噴水12t後才將其稀釋。這次事件造成百餘人氨氣中毒，距離事發地點5米的樹木在短短半小時內葉子由綠色變成黃色。
⑴從以上報導獲得的信息中，你了解到氨氣有哪些性質?（至少寫出3條）
。
⑵搶險隊員用檸檬水淋濕全身的可能原因是_____________________________。
⑶接觸液氨可能引起嚴重凍傷的原因_________________________________________。
⑷磷酸二氫銨（NH4H2PO4）是一種含有氮、磷兩種營養元素的復合肥，但不宜與熟石灰混合使用，試寫出有關反應的化學方程式 __ ___________。
22．（6分）有一包白色粉末，可能是CuSO4、CaCO3、BaCl2、NaCl、Na2SO4、(NH4)2CO3中的一種或幾種，為證明其組成進行如下實驗：
⑴取少量白色粉末，向其中加入足量的水，充分攪拌後過濾，得到白色沉澱和無色濾液，則白色沉澱可能是 ，原混合物中一定不含有 ；
⑵向實驗⑴濾出的白色沉澱中加入足量的鹽酸，沉澱部分溶解，並產生無色氣體，則原
混合物中一定含有 ；
⑶向實驗（1）的濾液中加入足量的氫氧化鈉溶液，有剌激性氣味氣體放出，證明實驗（1）的白色沉澱一定還有___________；
⑷向實驗（3）後的溶液中加入稀硝酸酸化，再加入足量的硝酸鋇，發現沒有沉澱產生，然後加入硝酸銀溶液，出現了白色沉澱，有人由此得出原混合物中一定含的氯化鈉，你認為___________(填「正確」「不正確」)，理由 。
⑸實驗結論是 。
23．（7分）某校化學課外小組用硫酸亞鐵廢液（含少量硫酸銅和稀硫酸），制備硫酸亞鐵晶體並進行如下實驗。制備硫酸亞鐵晶體主要的操作流程如下：
請根據題目要求回答下列問題：
⑴上述操作過程中用到的玻璃儀器有：①燒杯、②玻璃棒、③酒精燈、④溫度計、⑤ 。
⑵加入過量A的目的是 。
⑶草酸亞鐵常用作照相顯影劑，用於制葯工業。實驗室利用硫酸亞鐵溶液和草酸銨[(NH4)2C2O4]溶液反應生成草酸亞鐵沉澱來制備草酸亞鐵。請寫出硫酸亞鐵溶液與草酸銨溶液反應的化學方程式 。
⑷草酸亞鐵晶體（相對分子質量180）受熱易分解，某課外小組設計如圖的實驗裝置來檢驗其分解產物。
①該裝置中最不合理的部分 （填字母），原因是 。
②改用正確裝置實驗開始後，B處變藍，C處有白色沉澱，E處部分黑色粉末變為紅色，說明草酸亞鐵分解產生 （填化學式）。
24．（5分）鹵水(提取食鹽後的母液)含有MgCl2、NaCl、 MgSO4、KCl。從鹵水中提取KCl固體，採用下列方法：
⑴將鹵水加熱到60℃以上蒸發水分就逐漸析出晶體A，濾出晶體得到母液R，根據下圖所示溶解度曲線，晶體A中主要含有
和 ，理由是 。
⑵將母液R降溫(降到30℃以下)析出晶體B，則晶體B主要含有
和 ，理由是 。
⑶將析出的晶體B，用一定量的冷水洗滌，就可以得到較純的KCl固體，理由是
得分 評卷人
三、實驗題（本題包括4個小題，共20分）
25．（4分）在實驗室配製溶液時，常涉及以下過程：①溶解②稱量③計算④裝瓶存放。請按要求回答問題：
⑴現欲配製50g 5％氯化鈉溶液，配製過程的先後順序是 （填序號）。
⑵用已調節平衡的天平稱取氯化鈉固體時，發現指針偏右，接下來的操作是 。
⑶在量取蒸餾水體積時，若仰視讀數，則會導致氯化鈉溶液的溶質質量分數 （填「＜」或「＞」）5％。
⑷在溶解步驟中需要的儀器有 。
26．（5分）我市某學校化學研究性小組欲對水電解實驗進行研究，
實驗步驟如下：
⑴按右圖實驗裝置連接好儀器後，往水槽中加入蒸餾水後，接通
電源，發現在電極兩端只有極細小的氣泡慢慢產生，這說明
。
⑵當小王向水中加入少量白色A物質後，發現電極兩端有氣泡迅速產生，但發現通電一段時間後，負極產生的氣體與正極產生的氣體體積比大於2：1，請解釋其中可能存在的原因 。
⑶小李想要探究加入的物質A是什麼物質，他看到小王身邊有如下一些物質:氫氧化鐵，硫酸鈉，硫酸鋇，碳酸鈣，氫氧化鈉，那麼他加入的A可能是_________，請你設計簡單實驗證明你的猜想 。
⑷本實驗加入A的是為了 。
27．（4分）為了除去用粗鹽配製成的NaCl溶液中所含有的少量MgCl2、CaCl2和MgSO4雜質，某同學從碳酸鈉溶液、稀鹽酸、硝酸鋇溶液、碳酸鉀溶液和氫氧化鋇溶液中選擇了A、B、C三種試劑，按以下步驟進行了實驗，請回答下列問題：
實驗I：向溶液中加入過量A後過濾得濾液1；
實驗Ⅱ：向濾液l中加過量B後過濾得濾液2；
實驗Ⅲ：向濾液2中滴加適量C，得到較純掙的NaCl溶液。
⑴A、B、C三種試劑中溶質的化學式分別為 。
⑵實驗I中，所加A要過量的原因是 。
⑶實驗Ⅱ中，加B過量的原因是 。
⑷實驗Ⅲ中，試劑加到 時為適量，此時得到較為純凈的NaCl溶液。
28．（7 分）已知木炭粉（假設木炭粉中不含其它雜質）和Fe2O3 在加熱條件下發生化學反應，興趣小組同學對該實驗進行如下探究。
Ⅰ 生成固體組成分析
⑴實驗過程中可以觀察到有黑色固體生成，小亮認為生成了鐵粉，但小靈卻有不同看法，理由是 。
⑵為進一步確定黑色固體成分，小歡將生成的固體溶於足量稀硫酸，發現有大量氣泡產生，若同時出現 的現象，則生成的黑色固體全部是鐵。
Ⅱ 生成氣體成分分析
【提出假設】生成氣體的可能組成有三種：
假設1：生成氣體是二氧化碳；
假設2：生成氣體是一氧化碳；
假設3：生成氣體是 。
【設計實驗】為確定生成氣體的組成，小組同學設計實驗裝置如圖。
⑴實驗中通入的氣體是純凈乾燥的N2，分析不用空氣的主要理由是 。
A．空氣中的二氧化碳會使石灰水變渾濁
B．空氣中的氧氣會和木炭粉反應生成CO或CO2而干擾實驗結果
C．空氣中的二氧化碳、水蒸氣會和木炭粉反應生成CO而干擾實驗結果
⑵定性研究：若實驗過程中可以觀察到澄清石灰水變渾濁，則證明反應生成的氣體中一定含有 。
⑶定量研究：現准確稱取16.0g氧化鐵與2.4g木炭粉混合，在上述裝置中完全反應。測得剩餘固體質量為11.2g，且能完全溶於稀鹽酸。
【實驗結論】處理上述實驗數據後可知，假設 正確。
【拓展與延伸】合成氨工業生產中所用的α-Fe催化劑的主要成分是FeO、Fe2O3。當催化劑中FeO與Fe2O3的質量之比為9∶20時，其催化活性最高。現以Fe2O3為原料制備上述催化劑，可向其中加入適量木炭粉，發生如下反應： 2Fe2O3+C 4FeO十CO2↑。為製得這種活性最高的催化劑，應向240g Fe2O3 粉末中加入木炭粉的質量是 g。

得分 評卷人
四、計算題（本題包括2個小題，共10分）
29．（4分）某化學興趣小組在做鐵與硫酸銅溶液反應時，發現生成銅的同時也有少量氣泡產生，為了進一步研究做了如下實驗：
⑴取8.5g鐵粉放入一定量的硫酸銅溶液中，反應完成後，濾過固體，洗滌，乾燥後稱量，固質量為9.2g
⑵將9.2g固體放一足量的鹽酸中充分反應，產生氫氣的質量為0.1g。
問：①與硫酸銅反應的鐵的質量是 ，與鹽酸反應的鐵的質量是 ，兩者質量之和 （填「＞」「＜」「＝」）8.5g。
②針對上述現象請你解釋原因： 。
30．（6分）某實驗小組欲測定某白色粉末（已知是碳酸鈉與碳酸氫鈉的混合物）的組成，取三份質量不同的樣品甲、乙、丙分別與30g稀鹽酸充分反應，得到的常溫常壓下氣體體積關系如下表，試求：⑴樣品中碳酸鈉的質量分數？⑵稀鹽酸的質量分數？(已知二氧化碳常溫常壓下的密度是1.97g/L)（計算過程中保留兩位小數）
甲 乙 丙
混合物質量/g 3.80 7.60 11.4
二氧化碳的體積/L 0.893 1.786 1.786

『伍』 為檢驗某病人血液中的含鈣量，現取10mL血液樣品稀釋後用草酸銨[（NH 4 ） 2 C 2 O 4 ]處理成草酸鈣沉澱，

『陸』 實驗室利用硫酸亞鐵溶液和草酸銨[（NH4）2C2O4]溶液反應生成草酸亞鐵沉澱來制備草酸亞鐵並得到硫酸銨．請

硫酸亞鐵溶液和草酸銨[（NH₄）₂C₂O₄]溶液反應生成草酸亞鐵沉澱來制備草酸亞鐵並得到硫酸銨，反應的內化學方程式為：FeSO₄+（NH₄）容₂C₂O₄═FeC₂O₄↓+（NH₄）₂SO₄．
故答案為：FeSO₄+（NH₄）₂C₂O₄═FeC₂O₄↓+（NH₄）₂SO₄．

『柒』 草酸銨結晶紫染液的實驗研究

目的 探討活體細菌著色檢測的適宜條件。方法 將金黃色葡萄球菌、黃色微球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌稀釋濃度為5×107菌落形成單位/毫升 (Colony forming unit，CFU/ml)。 經不同濃度與作用時間的結晶紫(Crystal Violet , CV)著色細菌洗滌後，保存於甘油磷酸緩沖液。採用平皿傾注法測取細菌的CFU。結果 與對照組相比，2%CV染色時，細菌CFU無顯著性差異（P>0.05），染料大於此濃度染色時，CFU有差異性（P<0.05）。染色時間在3min內CFU無顯著性差異（P>0.05）。30%甘油磷酸鹽緩沖液保存著色活體細菌，在48h內活性無顯著性差異（P>0.05），60h後有差異性（P<0.05）。結論 實驗方法適用於活體細菌顯色法的形態學檢測。
結晶紫活體細菌染色
THE EXPERIMENTAL STUDY OF THE LIVING BACTERIA
BY CRYSTAL VIOLET STAINING
Lu Dongming，Yang Dawu, Zhong Zhiqun， Li Yanjun
Qinghai University Medical College
Abstract Objective To explore an appropriate condition for the examination of the living bacteria staining. Methods The culture of Staphylococcus aureus, Micrococcus flavus, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa were collected and then centrifugally washed. The final concentration is 5×107 colony forming unit/milliliter(CFU/ml) diluted by normal saline(NS). The four strains of bacteria were preserved in the glycerophosphate buffer after being dyed and laved by the different concentration and acting time of crystal violet. In order to know the effect of various factors such as staining solution concentration, acting time, and glycerin buffer fabrication upon the bacterial survival rate, and two methods were carried out. One was observed by the microscope, the other was put into the culture dish. Results Comparing with that of the control group, the bacterial CFU was had no statistical significance (P>0.05) dyed by 2% crystal violet. When the concentration of the dye-solution was higher than 2%, there showed the difference (P<0.05). In 3 min dyeing time, CFU had no significant difference (P>0.05). The stained living bacteria preserved in the 30% glycerophosphate buffer within 48h have not shown significant difference (P>0.05),while after 60h, it showed significant difference (P<0.05). Conclusion The method is quite suitable for the morphological detection of the living bacteria.
Key Words Crystal Violet Living bacteria Staining
染色法著色滅活菌是細菌形態學檢測的常用方法，廣泛應用於臨床實驗室。而活體細菌的著色檢測有實際應用價值。為此我們首次通過苯胺染料結晶紫染色細菌，探討活體細菌著色的最佳濃度和染色時間，並對細菌保存液加以改進，旨在為活體細菌染色的形態學檢測建立方法。 1.1 材料
1.1.1 實驗菌種：金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌（質控菌種， 轉種於青海省第一人民醫院檢驗科），黃色微球菌（實驗室自備）。
1.1.2 主要試劑與器材：CV染料配製;稱取CV 2.0 g、2.5 g、3.0 g和3.5 g分別溶於95%無水乙醇10 ml ，加入90 ml 0.8%草酸銨溶液，制備成不同濃度的染液。 30%甘油磷酸鹽緩沖液配製：純甘油30 ml，1%磷酸鈉溶液70 ml，硫代硫酸鈉10 mg。5×107 CFU/ml麥氏細菌比濁管 購自青海省醫葯公司。營養瓊脂培養基購自上海生物製品所。CX21型Olympus生物顯微鏡，日本產；SPE-250BS型細菌生化培養箱，上海產。
1.2 方法
1.2.1 實驗細菌分組與處理：將金黃色葡萄球菌，黃色微球菌，大腸埃希菌和銅綠假單胞菌制備成菌液，經NS離心（4000r/min 10min）洗滌3次。根據文獻[1]用NS配製各細菌濃度（5×107CFU/ml）。實驗組每種細菌各分4株,均以8ml分裝於10ml試管內, 離心（4000r/min 10min）留取細菌沉澱物0.5 ml,加入染液0.5 ml 染色。設CV為2.0%、2.5%、3.0%和3.5%濃度染色組。經離心洗滌後,加入30%甘油磷酸鹽緩沖液8 ml保存備用。對照組不加染液以同樣方法操作。
1.2.2 指標檢測： CV濃度和染色時間與細菌存活率及甘油磷酸鹽緩沖液對細菌活力影響測定,均採用平皿傾注法。細菌動力檢測採用(懸滴法)鏡下觀察。
1.2.3 統計學方法：兩組實驗數據以均數±標准差(x±S)表示,組間比較採用方差分析和Dunnett檢驗。 2.1 結晶紫耐性實驗結果（見表1～2）
2%濃度染色細菌3 min時活性不減，與對照組相比CFU無顯著性差異（P>0.05）。在革蘭氏陽性菌染料濃度>2.5%、陰性菌>3.0%、染色時間>4 min染色時，細菌CFU有差異性（P<0.05）。 表1細菌在不同濃度CV著色時的活性比較結果 註：*與對照組相比有統計學意義（P<0.05）.表22%CV不同著色時間的細菌存活率比較結果註：*與對照組相比有統計學意義（P<0.05）
2.2 甘油磷酸鹽緩沖液對細菌活性影響（見表3～4）
甘油濃度50%時CFU有差異性（P0.05）。而由30%甘油磷酸鹽緩沖液所保存的著色細菌在48 h內其活性無顯著性變化（P>0.05），60 h後有變化（P<0.05）。表3不同甘油濃度的磷酸鹽緩沖液對著色菌活性影響比較結果（ 註：*與對照組相比有統計學意義 （P<0.05）.表430%甘油緩沖液保藏著色菌的存活率比較結果 註：*與對照組相比有統計學意義 （P<0.05）. CV是分子量為408da的人工苯胺染料,分子中有色基團通過正電荷的助色基團與細菌胞漿中帶負電荷的多相膠體成分靜電親和而著色,高濃度結晶紫可抑制細菌代謝的重要酶蛋白,成為導致細菌著色後滅活的重要因素[2]。故著色細菌的活性與染料濃度、染色時間密切相關。我們通過結晶紫染料耐性實驗表明,將2%CV著色革蘭陽性菌的葡萄球菌和黃色微球菌與革蘭陰性菌的大腸埃希菌和銅綠假單胞菌染色3 min並保存於改良的30%甘油磷酸鹽緩沖液中。 著色細菌鏡下觀測保存液中其細菌胞漿色澤均勻、動力及活性在48 h內無顯著性差異（P>0.05）。 適用於實驗室活體細菌染色法的形態學檢測,以及活體細菌色澤標記的生物學研究。
實驗中發現著色細菌60 h後對染料有不同程度的脫色作用(著色細菌色澤逐漸變淡,細菌保藏液色澤變濃),我們認為是活體細菌通過胞吐作用外排染料的結果,這可能也是著色細菌得以存活的重要機制。其原因為著色的活體細菌在代謝過程中產生的有機酸改變了細菌胞漿內等電點,使著色染料與胞漿中多相膠體成分解離所致。
GENMED結晶紫細胞群落染色試劑盒產品說明書（中文版）
主要用途
GENMED結晶紫細胞染色試劑是一種旨在使粘附生長的單細胞層細胞（群落）攝取結晶紫染料而獲得細胞繁殖密度定量信息的廣譜染色材料和權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研製、成功實驗證明、頂級雜志推薦的。其適用的細胞是呈單細胞層（Monolayer）生長的人體和動物細胞。產品嚴格無菌，即到即用，性能長期穩定，細胞著色率100%。
技術背景
結晶紫也可稱之為龍膽紫。當它溶解後，可以被活細胞攝入。同時可以使DNA、蛋白質、脂肪著色。染色顯示細胞核呈藍色，細胞質呈粉紅色。肉眼顯示整個細胞呈深藍色。在分光光度計或酶標儀上可以進行定量分析以評價細胞生長繁殖情況。
產品內容
GENMED清理液（Reagent A） 毫升
GENMED染色液（Reagent B） 毫升
GENMED溶解液（Reagent C） 毫升
產品說明書 1份
保存方式
GENMED清理液（Reagent A）保存在4℃冰箱里，其餘的保存在室溫下；GENMED染色液（Reagent B），避免光照，有效保證1年
用戶自備
封口膜：用於密封培養板後長期保存
顯微鏡：用於觀察細胞染色情況
分光光度計：用於定量檢測細胞生長繁殖情況
實驗步驟
1． 小心抽掉多孔細胞培養板里的培養液
2． 輕輕加入適量的GENMED清理液（Reagent A）到每個培養孔里（見下表） 多孔培養板 容量 3． 小心抽去清理液
4． 加入適量的GENMED染色液（Reagent B）到每個培養孔里（見下表） 多孔培養板 容量 5． 在室溫下靜置 分鍾
6． 抽去GENMED染色液（Reagent B）
7． 重復實驗步驟 和 三次，培養孔顯示粉紅色
8． 抽去所有液體，倒置培養板在紙巾上，使其吸干培養孔里的殘存液體
9． 肉眼或顯微鏡觀察：細胞核呈藍色，細胞質呈粉紅色。整個細胞呈深藍色
10．用封口膜密封培養板，在室溫下長時間保存
11．如果重新啟封觀察，發現樣本乾枯或收縮，只需加上適量的GENMED清理液（Reagent A）則可
12．如果需要定量測試，加上適量的GENMED溶解液（Reagent C）（見下表） 多孔培養板 容量 13．輕輕搖動培養板，直到GENMED溶解液（Reagent C）均勻分布
14．在室溫下，孵育 分鍾
15．即刻放進分光光度計測讀，波長為 nm
注意事項
1． 本產品為250次（24孔板）、500次（48孔板）、1000次（96孔板）操作
2． 細胞染色前後的清洗過程中，小心操作，以免將細胞沖洗掉，而影響定量分析
3． 在細胞清洗過程中，可以將培養板整個翻轉，一次性傾倒其染色液和清洗液
4． 本公司提供系列細胞繁殖檢測試劑產品
質量標准
1． 本產品經鑒定性能長期穩定
2． 本產品經鑒定效果滿意，細胞固著力強，著色率100%