❶ 薄層色譜法分離偶氮苯和蘇丹三的實驗現象有哪些
有順(Z)-反(E)-異構體。反式為橙紅色棱形晶體,蒸氣為深紅色,溶於乙醇、乙醚和醋酸,不溶於水。順式為橙紅色片狀晶體,不穩定,在常溫下慢慢變成反式。偶氮苯有毒,易燃;在鹼性條件下還原成氫化偶氮苯,在鋅和醋酸中還原成苯胺
❷ 薄層色譜法工作原理
薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。
薄層層析可根據作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。
吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面,吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上,都可能發生吸附現象。
物質分子之所以能在固體表面停留,這是因為固體表面的分子(離子或原子)和固體內部分子所受的吸引力不相等。在固體內部,分子之間相互作用的力是對稱的,其力場互相抵消。
(2)薄層色譜分離實驗裝置擴展閱讀:
一、薄層色譜的特點:
靈敏度及解析度高、分離快速、操作方便、同時分離多個樣品、樣品預處理簡單、設備簡單。
由於這些特點,薄層色譜在實際工作中的應用十分廣泛。由於通常用薄層色譜分析法進行定量分析的過程中,薄層掃描儀是最為重要的,因此對它進行略詳的介紹。
薄層掃描儀的基本結構及主要功能基本是相同的,每台儀器都包括光源、分光器、檢測器、數據處理及信號輸出幾個部分。
二、優點
它保持了操作方便、設備簡單、顯色容易等特點,同時展開速率快,一般僅需15~20分鍾;混合物易分離,分辨力一般比以往的紙層析高10~100倍。
它既適用於只有0.01μg的樣品分離,又能分離大於500mg的樣品作制備用,而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。薄層層析的缺點是對生物高分子的分離效果不甚理想。
❸ 薄層色譜法實驗過程中,點樣點過大會有什麼結果
薄層板點樣點後,經展開劑展開,在原點的樣品隨展開劑展開的過程斑點會逐漸變大,如果點樣的斑點過大,經展開劑展開後斑點將變得更大,斑點變大後極性相近的物質無法達到完全分離,導致薄層層析失敗。
在進行薄層實驗時,點板的環節很重要,關乎到實驗的成敗,所以點板時一定有耐心,用力要輕,少量多次,待前面點的樣品溶劑揮干後再點第二次,斑點的直徑最好控制在3mm內。
❹ 什麼叫薄層色譜法原理是什麼!!急!!
一、薄層色譜法
薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。
二、薄層色譜法的基本原理
例如用硅膠和氧化鋁作支持劑,其主要原理是吸附力與分配系數的不同,使混合物得以分離。當溶劑沿著吸附劑移動時,帶著樣品中的各組分一起移動,同時發生連續吸附與解吸作用以及反復分配作用。
由於各組分在溶劑中的溶解度不同,以及吸附劑對它們的吸附能力的差異,最終將混合物分離成一系列斑點。如作為標準的化合物在層析薄板上一起展開,則可以根據這些已知化合物的Rf值(後面介紹Rf值)對各斑點的組分進行鑒定,同時也可以進一步採用某些方法加以定量。
(4)薄層色譜分離實驗裝置擴展閱讀:
薄層色譜法(TLC)薄層色譜具有選用范圍廣,重現性好等優點,常用於中葯各種成分的鑒別。
用固定波長對薄層展開的各斑點作薄層掃描圖譜比目測的層析圖譜更為客觀准確,因而具有更好的指紋鑒別意義。但由於受薄層板的質量和開放式層析系統等外界因素的影響,易引起一定的實驗誤差。
薄層色譜法與紙層析和紙層析比較TLC快速、分離效率高、靈敏度高、顯色方法多樣、圖像易保存。
❺ 做薄層色譜法實驗時,在展開操作中應注意哪些事項
1、展開室應預先用展開劑飽和
2、點樣後,應待溶劑揮發完,再放入展開室中展開
3、展開劑不可浸過樣點。
❻ 薄層色譜實驗為什麼要在密閉容器中進行
在密來閉容器中進行為了自防止溶劑揮發,使溶劑的蒸汽壓在密閉容器中迅速達到平衡,防止溶液跑樣不均勻。
薄層色譜法(TLC),系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層,待點樣、展開後,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比;
用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法,薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用於跟蹤反應進程。
薄層層析可根據作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析、薄層分配層析、薄層離子交換層析、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。
吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面,吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。
在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上,都可能發生吸附現象。
❼ 關於用薄層層析法分離葉綠體色素 為什麼我做了3次實驗,都得到6條線
你是想知道步驟嗎?
一、提取綠葉中的色素
1、稱取5克綠葉,剪碎,放入研缽中
2、向研缽中加二氧化硅和碳酸鈣,再加10ML無水乙醇,迅速研磨.
3、將研磨液倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一塊單層尼龍布)中進行過濾.將濾液收集到試管中,及時用棉塞將試管塞嚴.
二、制備濾紙條
將濾紙條的一端剪去兩角,並在距這一端1CM處用鉛筆畫一條細的橫線.
三、畫濾液細線
用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻畫出一條細線.待濾液干後,再畫一兩次.
四、分離綠葉中的色素
將3ML層析液倒入試管中,將濾紙條(有濾液細線的一端朝下)輕輕插入層析液中,隨後用棉塞塞緊試管口.注意:不能讓濾液細線觸及層析液.
五、觀察與記錄
觀察試管內濾紙條上出現了幾條色素帶,以及每條色素帶的顏色.
❽ 薄層色譜分析實驗
不是長期處於接觸狀態不會有特別影響的,蘇丹Ⅲ苯溶液是比較常用的實驗室試劑,一般實驗室都有通風設備,不必擔心,如果覺得對皮膚啊什麼不好的話,通風櫥內帶手套操作!
❾ 制備薄層色譜法的優缺點是什麼 簡述制備薄層分離的過程,找出每一步驟的關鍵操作。
轉載:《分析測試網路網》
PTLC的應用體會
PTLC也就是我們通常所說的制備薄層板,對於一些在TLC小板上分離度比較好的化合物,我們可以考慮用制備薄層來進行分離,進而得到單品。這個也算是實驗室一種很常規的一種分離方法,大家應該有所體會。
下面就是我做PTLC的過程:
第一,鋪板:稱取30克的薄層硅膠,加入3倍量的千分之五的CMC-Na沿著一個方向攪勻,攪拌的時間大概在25分鍾左右,當然個體存在差異,力氣大的可能15分鍾也可以攪的很勻。放在窗檯晾乾24小時也就可以使用了。
第二,洗板:在點樣之前,先用純甲醇把板洗一下,因為硅膠板中有一些雜質本身會影響我們的樣品,一般會看到友一層淡黃色的帶被推到最前沿,那就是雜質了,這樣洗板的目的也就達到了,將洗好的板拿出來放在通風櫥吹乾待用。
第三,點樣:這是關鍵的一步,若是點樣點的不好,會非常影響我們制備薄層板的效果,嚴重的甚至達不到分離的目的。一般我是將樣品溶液10-50mg(點樣量不可過多,超載的話在展開的板上出現鋸齒狀,點也不可砸壞,會大大的影響效果)線性滴加於硅膠板上,盡量不要用水來溶解樣品,否則會擴散的很嚴重,效果不好。
第四,飽和:先把展開劑(展開劑最好不要用水,甲醇等極性打的展開劑,可能會使硅膠,CMC-Na等一起洗下來)(20ml)左右放在展開槽一側,把PTLC板放在另一側30分鍾進行預飽和,之後將展開劑傾斜倒入另一側進行展開,這樣可以避免邊緣效應,目的還是一個,為了使我們的分離效更好。
第五,刮板:將上面展開後的板拿出吹乾以後,確定自己要刮的范圍,用鉛筆畫上即可,接著用刀片將所畫的范圍刮下來即可。將掛下的硅膠用小柱裝上,用展開溶劑將其洗出即可,充的話盡量充干凈,不然浪費的都是自己的樣品啊。
我在制備TLC的時候就是上面的步驟了,這其中可能有一些我想的還不周到的地方,希望大家海涵!
優缺點要有對比才好說吧,
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