薄層色譜實驗裝置示意圖

① 薄層色譜法工作原理

薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法，它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同，使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中，連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達到各成分的互相分離的目的。

薄層層析可根據作為固定相的支持物不同，分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。

吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面，吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上，都可能發生吸附現象。

物質分子之所以能在固體表面停留，這是因為固體表面的分子(離子或原子)和固體內部分子所受的吸引力不相等。在固體內部，分子之間相互作用的力是對稱的，其力場互相抵消。

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一、薄層色譜的特點：

靈敏度及解析度高、分離快速、操作方便、同時分離多個樣品、樣品預處理簡單、設備簡單。

由於這些特點，薄層色譜在實際工作中的應用十分廣泛。由於通常用薄層色譜分析法進行定量分析的過程中，薄層掃描儀是最為重要的，因此對它進行略詳的介紹。

薄層掃描儀的基本結構及主要功能基本是相同的，每台儀器都包括光源、分光器、檢測器、數據處理及信號輸出幾個部分。

二、優點

它保持了操作方便、設備簡單、顯色容易等特點，同時展開速率快，一般僅需15～20分鍾；混合物易分離，分辨力一般比以往的紙層析高10～100倍。

它既適用於只有0．01μg的樣品分離，又能分離大於500mg的樣品作制備用，而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。薄層層析的缺點是對生物高分子的分離效果不甚理想。

② 薄層色譜實驗為什麼要在密閉容器中進行

在密來閉容器中進行為了自防止溶劑揮發，使溶劑的蒸汽壓在密閉容器中迅速達到平衡，防止溶液跑樣不均勻。

薄層色譜法（TLC），系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層，待點樣、展開後，根據比移值（Rf）與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值（Rf）作對比；

用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法，薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，也用於跟蹤反應進程。

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薄層層析可根據作為固定相的支持物不同，分為薄層吸附層析、薄層分配層析、薄層離子交換層析、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。

吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面，吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。

在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上，都可能發生吸附現象。

③ 薄層色譜法的主要顯色定位方法有哪些

1、在日光下觀察，劃出有色物質的斑點位置。

2、在紫外燈（254nm或365nm）下觀察有無專暗斑或熒光斑屬點並記錄其顏色、位置及強弱。能發熒光的物質或少數有紫外吸收的物質可用此法檢出。

3、熒光薄層板檢測，熒光薄層板是在硅膠中摻入了少量熒光物質製成的板。在254nm紫外燈下，整個薄層板呈黃綠色熒光，被測物質由於熒光猝滅作用而呈現暗斑。

4、既無色又無紫外吸收的物質，可採用顯色劑顯色。

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薄層色譜方法要求硅膠粉末的粒度分布窄、平均粒徑約15微米，薄層厚度為250微米左右，支持物一般為玻璃板，也可採用其他適用的物質。

將欲分析的樣品溶液以點狀或線狀加至薄層板上。然後將它插到 一個動相的液體(展開劑)中，使動相向上移動達到色譜分離的目的。

通常把流動相極性小而固定相極性大的體系稱為正相薄層色譜法；反之，則把流動相極性大而固定相極性小的體系稱為反相薄層色譜法。

與其它色譜方法相比具備如下優點：

①展開時間短，一般只需十至幾十分鍾。

②操作簡單，所用儀器設備也簡單，分離效果好。

③顯色劑多樣化，選擇性鑒定能力強。

④ 薄層色譜法，怎麼調展開劑使兩個靠的很近方的點分開

一般體系都是 氨水 甲醇 二氯甲烷，乙酸乙酯，正己烷（或石油醚）回，如果混合物對酸不穩定就答加一點點氨水，對鹼不穩定就加一點點醋酸。

主要看極性吧，需要分離的物質極性大，就多用極性大的試一試，極性小就多用極性小的。一般都是從極性小的開始試。首先你得對你的產物極性有個初步的認識，如果實在判斷不出來，就從正己烷：乙酸乙酯=50：1開始慢慢調吧。。。

⑤ 薄層色譜法實驗步驟

薄層色譜法的實驗步驟包括薄層板的制備、點樣、樣品的展開和斑點定位.

⑥ 做薄層色譜法實驗時，在展開操作中應注意哪些事項

1、展開室應預先用展開劑飽和

2、點樣後，應待溶劑揮發完，再放入展開室中展開
3、展開劑不可浸過樣點。

⑦ 薄層色譜的實驗步驟

薄層板的制備
點樣
展開
檢視

⑧ 柱色譜法和薄層色譜法實驗報告的最後問題與討論怎麼寫

在實驗中復遇到什麼問題，如制何解決的？以及對實驗的一些思考
比如做薄層色譜時會想 為什麼要預飽和？出現峰拖尾嚴重該如何處理？ 不同極性的樣品對應的展開劑選擇？
柱色譜法：柱子裝好的重要性？ 注意隨時補充洗脫劑，防止走干。

⑨ 薄層色譜法具體操作包括什麼步驟

網路答案：http://ke..com/link?url=-ipyhYFViz7e3vy___covtb-7QdWbfWMoIM_W_