㈠ 紙色譜法鑒定氨基酸怎麼操作謝謝!
紙色譜法是屬於分配色譜的一種,通常用特製的濾紙如新華一號濾紙作為固定相(水的支持劑),含有一定比例的水的有機溶劑(展開相)作流動相,應用於多官能團或高極性化合物如糖或氨基酸的分離、鑒定。
Rf比移值是一個特定常數。Rf值隨被分離化合物的結構、固定相與流動相的性質、溫度等因素不同而異。當溫度、濾紙等實驗條件固定時,它是一個常數。這也就是用紙色譜進行定性分析的依據。
用標准氨基酸作出紙色譜和Rf值,與在相同條件下作出的混合物的紙色譜和Rf相對照,以達到分離、鑒定氨基酸的目的。當然,在實際應用中,紙上層析的操作要復雜得多。尤其是Rf值相接近的氨基酸需要用兩向紙上層析才能達到分離鑒定的目的。
氨基酸經紙上層析後,常用茚三酮顯色劑顯色。必須注意!指印含有一定量的氨基酸,在實驗方法中足以檢出(可以檢出以微克計的痕跡量)。