液相色譜的梯度洗脫裝置的作用

Ⅰ 請教高效液相色譜梯度洗脫問題

梯度抄洗脫裝置分兩種： 高壓梯度：用兩台高壓輸液泵將兩種溶劑輸入 低壓梯度：在常壓下將兩種溶劑（或多元溶劑）混合，然後用高壓輸液泵將流動相輸入到色譜柱中。 梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時間、降低最小檢測量和提高分離精度。

Ⅱ 液相色譜儀的梯度洗脫有哪些優點該如何選擇

梯度洗脫裝置分兩種：高壓梯度：用兩台高壓輸液泵將兩種溶劑輸入低壓梯度版：在常壓下將兩種溶劑（權或多元溶劑）混合，然後用高壓輸液泵將流動相輸入到色譜柱中。梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時間、降低最小檢測量和提高分離精度。但在使用中，梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。梯度洗脫時應注意:1、注意各溶劑間的互溶性。2、對溶劑的純度要求更高（影響重現性）。3、注意梯度變化時系統壓力的變化，防止超出限度。4、梯度結束後，用初始流動相沖洗，使柱子平衡一段時間（再生），使系統回復到初始狀態。（梯度周期）5、低壓梯度要注意脫氣，混合後容易產生氣泡。6、容易出現鬼峰，應作空白試驗。7、梯度選擇時盡量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。8、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇性檢測器（如紫外吸收檢測器或熒光檢測器），而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器（如示差折光檢測器）。9、要注意水相中鹽的濃度，防止在有機相提升過程中鹽的析出。

Ⅲ 請問做液相色譜時在什麼樣的情況下必須進行梯度洗脫這跟流動相的種類有無關系

討論這個問題，必須要先討論等度洗脫和梯度洗脫相比：
等度洗脫優點是流動相比例不隨時間進行變化，這樣，能最大限度保證壓力穩定，基線平直，在連續進樣時，可隨時停止，如果上一針有沒有跑出來的峰，下一針也能直接看到，不會漏檢峰，還有就是在一般性外標或內標時，當樣品出峰較晚時，可採用簡單方法極快檢測。舉例：假如主峰在10分鍾出峰（無其它干擾峰），你正常進一針，然後等兩三分鍾再進一針，再等兩三分鍾進一針，這樣一共運行20分鍾就出了三個峰，這樣的方法對標准樣和樣品的檢測時，能極大縮短時間。而此方法用梯度是不可行的。所以等度洗脫在內外標時作用最大。
梯度洗脫是等度的輔助，但這些年一般的歸一化檢測已經取代了等度。主要是因為，等度洗脫如果出峰較多時，就會使各峰峰寬出現前窄後寬，積分上也有歧視現象，還有就是等度洗脫有的出峰過早有的過晚，還有的兩峰相隔過寬或過窄，這時，梯度的作用就非常明顯了。它可以把出峰過早的峰用低有機相-高水相向後拖動，便於分離，還能把後面出峰較晚的峰用高有機相-低水相提前跑出來。這樣的好處不僅能節約時間，還能使各峰峰型都比較窄，積分更准了。
用梯度和等度與流動相也有一定關系。比如正相色譜時是不能用梯度的，在反相色譜時，等度，梯度都可以使用。

Ⅳ 高效液相色譜分析法中為什麼要採用梯度淋洗

梯度洗復脫（gradient elution）又稱為制梯度淋洗或程序洗提。
在氣相色譜中，為了改善對寬沸程樣品的分離和縮分析間周期，廣泛採用程序升溫的方法。而在液相色譜中則採用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。從而可以使一個復雜樣品中的性質差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
梯度洗脫的優點：1.縮短分析周期；2.提高分離能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。
梯度洗脫的原理： 流動相由幾種不同極性的溶劑組成，通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性，使每個流出的組分都有合適的容量因子k'，並使樣品種的所有組分可在最短時間內實現最佳分離。
梯度洗脫特點： 提高柱效改善檢測器的靈敏度當樣品中的一個峰的k'值和最後一個峰的k'值相差幾十倍至幾百倍時，使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩定，必須使用恆流泵，否則難獲重復結果。

Ⅳ 液相色譜梯度洗脫

主要還是因為你的儀器設置問題。你不能只看泵的設置時間，還有你的燈及其它項的設置，逐一檢查，一定是其它項設成了30分鍾才會出現這樣的問題，不象是硬體問題，我以有也遇到過這樣的情況。

Ⅵ 高效液相色譜儀器的結構及其各部分作用

1、溶劑輸送系統；儲液器，用來貯存數量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進入泵內。脫氣器，脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內流出時釋放出氣泡進入檢測器，從而引起雜訊，不能正常檢測。

輸液泵，將儲液器中的流動相連續不斷地以高壓形式進入液路系統，使樣品在色譜柱中完成分離過程。梯度洗脫裝置，是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。

2、進樣系統；進樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進樣方式可以分為兩種：閥進樣或自動進樣。比較常用的是採用自動進樣器裝樣。

3、分離系統；色譜柱：對樣品進行分離，是整個色譜系統的心臟，它的質量優劣直接影響到分離的效果。

4、檢測系統；檢測器：將色譜柱連續流出的樣品組分轉變成易於測量的電信號，被數據系統接收，得到樣品分離的色譜圖。

5、數據處理和記錄系統；對色譜數據進行處理，並參與HPLC儀器的自動控制。

(6)液相色譜的梯度洗脫裝置的作用擴展閱讀

與試樣預處理技術相配合，HPLC 所達到的高解析度和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。

HPLC成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於HPLC具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫葯研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。

Ⅶ 高效液相色譜分析中,可用於梯度洗脫的檢測器有那些

高校液相色譜中，梯度洗脫是指輸液泵最少2元以上的，就是至少有2個泵。一般常用的紫外檢測器，熒光檢測器，蒸發光散射檢測器，質譜檢測器等都可以用於梯度洗脫。但是對於示差折光檢測器是不能用於梯度洗脫的。

Ⅷ 在高效液相色譜中梯度洗脫裝置的作用是什麼

梯度洗脫裝置分兩種：
高壓梯度：用兩台高壓輸液泵將兩種溶劑輸入專
低壓梯度：屬在常壓下將兩種溶劑（或多元溶劑）混合，然後用高壓輸液泵將流動相輸入到色譜柱中。
梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時間、降低最小檢測量和提高分離精度。
但在使用中，梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。
梯度洗脫時應注意:
1、注意各溶劑間的互溶性。
2、對溶劑的純度要求更高（影響重現性）。
3、注意梯度變化時系統壓力的變化，防止超出限度。
4、梯度結束後，用初始流動相沖洗，使柱子平衡一段時間（再生），使系統回復到初始狀態。（梯度周期）
5、低壓梯度要注意脫氣，混合後容易產生氣泡。
6、容易出現鬼峰，應作空白試驗。
7、梯度選擇時盡量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。
8、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇性檢測器（如紫外吸收檢測器或熒光檢測器），而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器（如示差折光檢測器）。
9、要注意水相中鹽的濃度，防止在有機相提升過程中鹽的析出。

Ⅸ 高效液相色譜儀的最基本組件和梯度洗脫的含義,種類是什麼

一、參考網路：http://ke..com/view/971281.htm
在所有色譜技術中，液相色譜法（liquid chromatography，LC）是最早（1903年）發明的，但其初期發展比較慢，在液相色譜普及之前，紙色譜法、氣相色譜法和薄層色譜法是色譜分析法的主流。到了20世紀60年代後期，將已經發展得比較成熟的氣相色譜的理論與技術應用到液相色譜上來，使液相色譜得到了迅速的發展。特別是填料制備技術、檢測技術和高壓輸液泵性能的不斷改進，使液相色譜分析實現了高效化和高速化。具有這些優良性能的液相色譜儀於1969年商品化。從此，這種分離效率高、分析速度快的液相色譜就被稱為高效液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC），也稱高壓液相色譜法或高速液相色譜法。

氣相色譜只適合分析較易揮發、且化學性質穩定的有機化合物，而HPLC則適合於分析那些用氣相色譜難以分析的物質，如揮發性差、極性強、具有生物活性、熱穩定性差的物質。現在，HPLC的應用范圍已經遠遠超過氣相色譜，位居色譜法之首。

高效液相色譜的類型

廣義地講，固定相為平面狀的紙色譜法和薄層色譜法也是以液體為流動相，也應歸於液相色譜法。不過通常所說的液相色譜法僅指所用固定相為柱型的柱液相色譜法。

通常將液相色譜法按分離機理分成吸附色譜法、分配色譜法、離子色譜法和凝膠色譜法四大類。其實，有些液相色譜方法並不能簡單地歸於這四類。按分離機理，有的相同或部分重疊。但這些方法或是在應用對象上有獨特之處，或是在分離過程上有所不同，通常被賦予了比較固定的名稱。

現在的液相色譜儀一般都做成一個個單元組件，然後根據分析要求將各所需單元組件組合起來。最基本的組件是高壓輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和數據系統（記錄儀、積分儀或色譜工作站）。此外，還可根據需要配置流動相在線脫氣裝置、梯度洗脫裝置、自動進樣系統、柱後反應系統和全自動控制系統等。

液相色譜儀的工作過程：輸液泵將流動相以穩定的流速（或壓力）輸送至分析體系，在色譜柱之前通過進樣器將樣品導入,流動相將樣品帶入色譜柱,在色譜柱中各組分因在固定相中的分配系數或吸附力大小的不同而被分離，並依次隨流動相流至檢測器，檢測到的信號送至數據系統記錄、處理或保存。

二、梯度洗脫（gradient elution）又稱為梯度淋洗或程序洗脫。在同一個分析周期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。
梯度洗脫（gradient elution）又稱為梯度淋洗或程序洗脫。
在氣相色譜中，為了改善對寬沸程樣品的分離和縮短分析周期，廣泛採用程序升溫的方法。而在液相色譜中則採用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。從而可以使一個復雜樣品中的性質差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
梯度洗脫的優點：1.縮短分析周期；2.提高分離能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。
梯度洗脫的原理：
流動相由幾種不同極性的溶劑組成，通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性，使每個流出的組分都有合適的容量因子k，並使樣品種的所有組分可在最短時間內實現最佳分離。
梯度洗脫特點：
提高柱效，改善檢測器的靈敏度。當樣品中的一個峰的k值和最後一個峰的k值相差幾十倍至幾百倍時，使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩定，必須使用恆流泵，否則難獲重復結果。梯度洗脫常用一個弱極性的溶劑A和一個強極性的溶劑B。
梯度洗脫裝置示意圖2 梯度洗脫示意圖1（梯度洗脫參考：http://ke..com/view/1311799.htm）
如圖（兩個圖一種原理，前者為洗脫裝置和柱子之間封閉，適用於配備壓力泵的色譜柱，後者為洗脫裝置和柱子之間隔離開來，是梯度洗脫的簡易裝置。）：兩個容器放於同一水平上，兩容器連通，B與柱相連，當溶液由B流入柱時，A中的溶液就會自動來補充，經攪拌與第一容器的溶液相混合，這樣流入柱中的緩沖液的洗脫能力即成梯度變化。
洗脫時應滿足以下要求：①洗脫液體積應足夠大，一般要幾十倍於床體積，從而使分離的各峰不致於太擁擠。②梯度的上限要足夠高，使緊密吸附的物質能被洗脫下來。③梯度不要上升太快，要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。目的物的過早解吸，會引起區帶擴散；而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。
梯度洗脫可分為低壓梯度(又稱為外梯度)和高壓梯度(又稱為內梯度)。
(1)低壓梯度裝置。低壓梯度是採用比例調節閥，在常壓下預先按一定的程序將溶劑混
合後，再用泵輸入色譜柱系統，也稱為泵前混合。
(2)高壓梯度裝置。由兩台(或多台)高壓輸液泵、梯度程序控制器(或計算機及介面板控
制)、混合器等部件所組成。兩台(或多台)泵分別將兩種(或多種)極性不同的溶劑輸入混合
器，經充分混合後進入色譜柱系統。