梯度洗提裝置作用

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❷ HPLC系統由哪些部分組成簡述各部分的功能

HPLC儀一般由溶劑輸送系統、進樣系統、分離系統（色譜柱）、檢測系統和數據處理與記錄系統組成。

1、溶劑輸送系統

儲液器：用來貯存數量足夠、符合要求的流動相。配有溶劑過濾器，以防止流動相中的顆粒進入泵內。

脫氣器：脫氣的目的是為了防止流動相從色譜柱內流出時釋放出氣泡進入檢測器，從而引起雜訊，不能正常檢測。

輸液泵：將儲液器中的流動相連續不斷地以高壓形式進入液路系統，使樣品在色譜柱中完成分離過程。

梯度洗脫裝置：是在分離過程中通過逐漸改變流動相的組成增加洗脫能力的一種裝置。

2、進樣系統

進樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進樣方式可以分為兩種：閥進樣或自動進樣。比較常用的是採用自動進樣器裝樣。

3、分離系統

色譜柱：對樣品進行鉛戚分離，是整個色譜系統的心臟，它襲激世的質量優劣直接影響到分離的效果。

4、檢測系統

檢測器：將色譜柱連續流出的樣品組分轉變成易於測量的電信號，被數據系統接收，得到樣品分離的色譜圖。

5、數據處理和記錄系統

對色譜數據進行處理，並參與HPLC儀器的自動控制。

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應用

高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。

與試樣預處理技術相配合，HPLC 所達到的高解析度和高靈敏度，使分離和拍肢同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。

❸ 高效液相色譜分析法中為什麼要採用梯度淋洗

梯度洗復脫（gradient elution）又稱為制梯度淋洗或程序洗提。
在氣相色譜中，為了改善對寬沸程樣品的分離和縮分析間周期，廣泛採用程序升溫的方法。而在液相色譜中則採用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中，按一定程度不斷改變流動相的濃度配比，稱為梯度洗脫。從而可以使一個復雜樣品中的性質差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達到良好的分離目的。
梯度洗脫的優點：1.縮短分析周期；2.提高分離能力；3.峰型得到改善，很少拖尾；4.增加靈敏度。但有時引起基線漂移。
梯度洗脫的原理： 流動相由幾種不同極性的溶劑組成，通過改變流動相中各溶劑組成的比例改變流動相的極性，使每個流出的組分都有合適的容量因子k'，並使樣品種的所有組分可在最短時間內實現最佳分離。
梯度洗脫特點： 提高柱效改善檢測器的靈敏度當樣品中的一個峰的k'值和最後一個峰的k'值相差幾十倍至幾百倍時，使用梯度洗脫效果特別好。梯度洗脫中為保證流速的穩定，必須使用恆流泵，否則難獲重復結果。