旋光度測定的實驗裝置圖

A. 旋光度法測葡萄糖濃度實驗的實驗內容

1．旋光儀的結構
旋光度可以由旋光儀來測定。旋光儀有兩種：一種是數字自動顯示測定結果的自動旋光儀，另一種是目測刻度而得結果圓盤旋光儀，如圖10-2所示。
圖10-2 WXG-4圓盤旋光儀
2．旋光度的測定
（1）樣品溶液的配製
准確稱取一定量的樣品，在50ml的容量瓶中配成溶液。通常可以選用水、乙醇、氯仿作溶劑。若用純液體樣品直接測試，則測定前只需確定其相對密度即可。
由於葡萄糖溶液具有變旋光現象，所以待測葡萄糖溶液應該提前24小時配好，以消除變旋光現象，否則測定過程中會出現讀數不穩定的現象。
（2）預熱野歷
打開旋光儀電源開關，預熱5～10分鍾，待完全發出鈉黃光後方可觀察使用。
（3）調零
在測定樣品前，必須先用蒸餾水來調節旋光儀的零點。洗凈樣品管後裝入蒸餾水，使液面略凸出管口。將玻璃蓋沿管口邊緣輕輕平推蓋好升脊返，不要帶入氣泡，旋緊（隨手旋緊不漏水為止，旋得太緊，玻片容易產生應力而引起視場亮度發生變化，影響測定準確度）上螺絲帽蓋。將樣品管擦乾後放入旋光儀，合上蓋子。開啟鈉光燈，將刻度盤調在零點左右，會出現大於或小於零度視場的情況。如圖10-3中a和b所示。旋動粗動、微動手輪，使視場內三部分的亮度一致，即為零點視場，如圖10-3c所示。記下刻度盤讀數，重復調零4~5次取平均值。若平均值不為零而存在偏差值，應在測量讀數中將其減去或者加上。
a.大於或小於零度視場 b.零度視場 c.小於或大於零度視場
圖10-3 三分視場的不同情況
（4）測定
樣品的測定和調零方法相同。每次測定之前樣品管必須先用蒸餾水清洗1~2遍，再用少量待測液潤洗2～3次遍，以免受污物的影響，然後裝上樣品進行測定。旋動刻度盤，尋找較暗照度下亮度一致的零度視場。若讀數是正數為右旋；讀數是負數為左旋。讀數與零點值之差，即為樣品在測定溫度時的旋光度。記下測定時樣品的溫度和樣品管長度。測定完後倒出樣品管中溶液，用蒸餾水把管洗凈，擦乾放吵飢好。
按以上方法測定5%葡萄糖溶液的旋光度4~5次，測定值填入下表相應位置。再測定未知濃度的葡萄糖溶液的旋光度4~5次，測定值填入下表相應位置。
（5）數據記錄與處理
按表中設計的項目進行相應處理，最終求出未知濃度葡萄糖溶液的濃度。 1 2 3 4 5 零點值 零點平均值 5%葡萄糖的旋光度 旋光度平均值 差值* 比旋光度 未知濃度葡萄糖的旋光度 旋光度平均值 差值* 葡萄糖溶液濃度 * 差值 = 旋光度平均值 － 零點平均值