『壹』 薄層色譜法的原理
薄層色譜法的原理：薄層色譜法利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同，使在流動相（溶劑）流過固定相（吸附劑）的過程中，連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達到各成分的互相分離的目的。
薄層色譜法（TLC）系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。待點樣、展開後，根據比移值（Rf）與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值（Rf）作對比，用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，也用於跟蹤反應進程。
『貳』 色譜分離技術中，薄層色譜的基本操作過程及注意事項
薄層色譜操作注意事項
影響薄層色譜分析的因素有很多，比如樣品處理方法、薄層板制備技巧、點樣方法、展開劑的遴選、溫濕度的掌控等等很多方面，在這里對其操作要點作一下簡單介紹:
1鋪制薄層板：鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀：過稠，板容易出現拖動或停頓造成的層紋；過稀，水蒸發後，板表面較粗糙。勻漿配比一般是硅膠G:水=1：2～3，硅膠G:羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2。研磨勻漿的時間，根據經驗來定，與空氣濕度有關，一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外，也影響板塗層的厚度，進一步影響上樣量。塗層薄，點樣易過載；塗層厚，顯色不那麼明顯。通常，板的質量對薄層鑒別的影響不是很大，影響最大的是展開劑的配製和展開系統的飽和。
2點樣：盡量用小的點樣管。如果有足夠的耐性，最好只用1微升的點樣管。這樣，點的斑點較小，展開的色譜圖分離度好，顏色分明。樣品溶液的含水量越小越好，樣品溶液含水量大，點樣斑點擴散大。樣品溶液的溶劑一般是無水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。點好樣的薄層板用電吹風的熱風吹乾或放入乾燥器里晾乾。
薄層色譜用於定量時，點樣是最主要的誤差來源。
供試液的溶劑均有不同程度的洗脫力，所以在點樣的同時，樣品在原點就可是成環形展開，原點直徑的擴散促進了這種展開，Kaiser稱之為「上樣環形色譜效應」。如果樣品在溶劑中的溶解度很大，原點將變成空心環。這種效應對隨後的先行展開造成很不利的影響。
供試液的溶劑在原點的殘留，也會改變展開的選擇性，特別是供試液的溶劑與展開劑的極性相差較大時更明顯。再者，親水性溶劑殘留在原點吸收大氣中的水分（特別在高濕度環境）對色譜的影響也不可低估。因此點樣時的同步乾燥或繼後乾燥以除去原點殘存的溶劑是需要的。但應盡可能避免高溫加熱，如用吹風筒加熱，樣品變為固態後，部分或全部強烈的吸附在吸附劑的顆粒上，而促進了硅膠的有催化作用的活性表面故態化學反應，導致樣品的變性（尤其熱不穩定物質），至少移動相在展開時對這部分樣品的溶解速度比移動速度慢得多而形成拖尾（斑點拖尾的原因之一）。
『叄』 薄層色譜實驗步驟
薄層色譜實驗步驟如下：
1、將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的泡後，倒入塗布器中，在玻璃板上平穩地移動塗布器進行塗布（厚度為0.2至0.3毫米）。
2、取下塗好薄層的玻璃板，置水平台上於室溫下晾乾，後在110攝氏度烘30分鍾。即置有乾燥劑的乾燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。
3、用點樣器點樣於薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2.0厘米，點樣直徑為2到4毫米，點間距離約為1.5到2.0毫米，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
4、將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5到1.0厘米（切勿將樣點浸入展開劑中），密封室蓋，等展開至規定距離（一般為10到15厘米）。
5、取出薄層板，晾乾，按各品種項下的規定檢測，如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量，則可用薄層掃描法。