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實驗室用到的過濾除菌裝置

發布時間:2021-02-15 17:41:56

Ⅰ 關於實驗室抽慮除菌的操作

問:最近要做一些培養基,有一些糖類需要過濾除菌,但不知道怎麼操作,還需要什麼輔助設備
答:你只要有濾膜和配套的過濾器就可以了,一般在超凈工作台上進行。濾膜用0.22微米或0.45微米兩種規格,指的是濾膜的孔徑大小吧。一般0.22就夠了!
答:如果溶液的量比較大,超過500ml,可以採用已滅菌的抽濾瓶,預先墊好0.22um 的濾膜。抽濾瓶滅菌前要檢查封口用紗布或棉花堵牢,使用時,不用在無菌室中進行,只要保證收集瓶無菌狀態就可以。抽濾後,過濾好的溶液在無菌條件下倒進已滅菌的空試劑瓶中。
如果用小量的溶液過濾,無菌室內用一次性注射器和一次性0.22um濾膜(millipore或pall都有賣)就可以。
答:看過濾的量,如果量小,用注射器加濾器、0.22微米濾膜過濾,濾器加上濾膜後蓋緊,稍旋松,飯盒密封100度蒸餾水煮沸30分鍾滅菌,用來承接無菌糖水的瓶需高壓。用時在無菌操作台上操作,並先旋緊濾器,注意濾器外流下去的哪怕一滴也會造成染菌;過濾應該是費力的,如果感覺很輕松,則濾膜已破。0.45微米的濾膜一般用於兩次過濾的第一次,以防止0.22堵塞。注射器,若能高壓更好些。
如果量大,正壓可用蠕動泵接皮管接不銹鋼濾器大張濾膜,這些都是要高壓的。負壓可用抽濾。

Ⅱ 請問制備培養基時如何過濾除菌

1、滅菌方法
培養基的滅菌方法主要有兩種,高壓除菌及0.22um微孔濾膜過濾除菌。與過濾相比,高壓滅菌的工作強度小,成本較低,但易造成營養成分的流失,而且在多次加樣(無菌谷氨醯胺溶液,無菌碳酸氫鈉溶液等)過程中容易造成二次污染。大多數培養基採用0.1~0.2μm孔徑的微孔濾膜進行過濾滅菌,並且已成為培養基除菌的發展方向,它可低限度地減少培養基的營養損失。
1.1 高壓滅菌

某些培養基(如MEM)可進行高壓滅菌,例如清大天一的MEM培養基中的MD605、MD609等。這類培養基一般不含有L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉,一般是在培養基高壓滅菌後加入L-谷氨醯胺和碳酸氫鈉的無菌的液體。另外可高壓的谷氨酸鹽(如L-丙氨醯-L-谷氨醯胺)可代替L-谷氨醯胺。
可高壓滅菌的培養基在121℃、15psi,15分鍾的條件下完全可達到滅菌效果及營養成分的最小損失,不需將滅菌時間延長。為保證高壓滅菌的效果,滅菌設備的驗證很關鍵。
1.2 過濾滅菌
可供過濾滅菌使用的濾膜很多,其材料多為polyethersulphone(PES)、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。一般情況下採取正壓過濾,正壓過濾較之負壓過濾具有流速高、過濾快、不易污染,可避免蛋白質產生大量氣泡等優點。一般使用過濾器可參照各供應商的產品說明書。
目前大多數實驗室和制葯企業採用微孔濾膜濾器(如Zeiss濾器)或立式微孔濾器(Millipore、Pall)除菌。微孔濾膜濾器為不銹鋼,中間可夾放0.22um濾膜。使用這種濾器最重要步驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。如在使用Zeiss濾器時,先要用培養用水將濾膜充分潤濕,在安裝濾膜時可在其上放置一層定性濾紙再固定。消毒時旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都要包好(可用牛皮紙、紗布、無紡布等);高壓滅菌後,在無菌環境中立即將旋鈕扭緊。過濾除菌結束後,要打開濾器,檢查濾膜是否完整,如果濾膜破裂,需重新進行過濾除菌過程。立式微孔濾器可以選用不同的微孔濾柱體積,因為濾膜的折疊,膜面積顯著增大,液體處理量大,而且不容易發生堵塞現象。

Ⅲ 實驗室常用的滅菌方法有乾熱滅菌.高壓蒸汽滅菌.紫外線滅菌.過濾除菌四種各有那些優缺點

1.高壓蒸汽滅菌

為濕熱滅菌方法的一種。是微生物培養中最重要的滅菌方法。這種滅菌方法是基於水在煮沸時所形成的蒸汽不能擴散到外面去,而聚集在密封的容器中,在密閉的情況下,隨著水的煮沸,蒸汽壓力升高,溫度也相應增高。壓力和溫度之間的關系見表9-1。

高壓蒸汽是最有效的滅菌法,能迅速地達到完全徹底滅菌。一般在15磅/英寸2壓力下(121.6℃),15~30分鍾,所有微生物包括芽孢在內都可殺死。它適用於對一般培養基和玻璃器皿的滅菌。

進行高壓蒸汽滅菌的容器是高壓蒸汽滅菌鍋。高壓蒸汽滅菌鍋是一個能耐壓又可以密閉的金屬鍋,有立式與卧式兩種。

可以用電熱、煤氣、蒸汽等。鍋上裝有壓力表,有的還裝有溫度計,能及時了解鍋內壓力及溫度。鍋上還設有排氣口,其作用是在密閉之前,利用蒸汽將鍋內的冷空氣排凈,另外還裝有安全活門,如果壓力超過一定限度,活門即可自動打開,放出過多的蒸汽。

2.乾熱滅菌

微生物培養中常用的乾熱滅菌是指熱空氣滅菌。一般在電烘箱中進行。乾熱滅菌所需溫度較濕熱滅菌高,時間也較濕熱滅菌長。這是因為蛋白質在乾燥無水的情況下不容易凝固。一般須在160℃左右保持恆溫3~4小時,方能達到滅菌的目的。

乾熱滅菌適用於空玻璃器皿的滅菌,凡帶有橡膠的物品和培養基,都不能進行乾熱滅菌。

3.間歇滅菌

各種微生物的營養體在100℃溫度下半小時即可被殺死。而其芽孢和孢子在這種條件下卻不會失去生活力。間歇滅菌就是根據這一原理進行的。

間歇滅菌的方法是用100℃、30分鍾殺死培養基內雜菌的營養體,然後將這種含有芽孢和孢子的培養基在溫箱內或室溫下放置24小時,使芽孢和孢子萌發成為營養體。這時再以100℃處理半小時,再放置24小時。如此連續滅菌3次,即可達到完全滅菌的目的。

間歇滅菌通常在流動蒸汽的滅菌鍋中進行,也可用普通鋁鍋代替。這種滅菌方法多用於明膠、牛乳等物質的滅菌,這類物質在100℃以上的溫度下處理較長時間,會被破壞,而用間歇滅菌法就既起到了殺菌作用,又使被處理的物質免遭破壞。

4.紫外線滅菌

紫外線殺菌力最強的是波長2650~2660Å的部分。無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌。無菌室和緩沖間的照射時間為20~50分鍾(視房間大小而定),接種箱照射10~15分鍾即可。

為了加強紫外線滅菌的效果,在照射前,可在無菌室、緩沖間或接種箱內噴灑5%石炭酸,以使空氣中附著有微生物的塵埃降落,同時也可以殺死一部分微生物。無菌室的工作台的檯面和椅子,可用2~3%的來蘇兒擦洗。然後再照射紫外線。由於紫外線對人體有傷害作用,所以人不要直視正在照射的紫外線燈,也不要在照射情況下進行工作。

滅菌後,為了檢驗紫外線的滅菌效果,可以在無菌室、緩沖間或接種箱內放一套盛有培養基的培養皿,將皿蓋打開5~10分鍾,蓋好後,放入溫箱中培養。如果只有一、二個菌落,可認為滅菌效果良好。如雜菌叢生。則需延長照射時間或同時加強其它滅菌措施。

Ⅳ 高中中實驗室過濾裝置的使用

高中實驗室過濾裝置僅使用於不溶性固體與液體的分離

Ⅳ 過濾除菌操作時,濾器和過濾瓶等裝置使用前用什麼設備進行消毒滅菌

過濾除菌操作時,濾器和過濾瓶等裝置使用前用高壓蒸鍋進行消毒滅菌

都需要高回壓滅菌,不過答如果你使用的濾器是進口滅過菌的就不需要了,前提是你沒拆開過。

KRBB液的配方是:NaCl 118.5mmol/L, CaCl2 2.54mmol/L, KH2PO4 1.19mmol/L, KCl 4.74mmol/L, NaHCO325mmol/L, MgSO4 1.19mmol/L, HEPES 10mmol/L, BSA 1%)。 而10mmol/L HEPES緩沖液配製方法如下:准確稱取HEPES 2.383g,加入新鮮三蒸水定容至。

Ⅵ 實驗室用熱過濾裝置有哪些

也就是配個加熱套,根據你不同的過濾器皿,都會有相對應的軟性加熱套,把你的器皿很好的包裹好,進行溫控過濾。

Ⅶ 實驗室過濾和純化的實驗室裝置有哪些

固液分離:
離心機、三角漏斗(過濾)、布氏漏斗(減壓過濾)。
固體純化:重結晶、熔融結晶。
液液分離:
分液、萃取(分液漏斗)
蒸餾、精餾。

Ⅷ 過濾除菌操作時,濾器和過濾瓶等裝置使用前用什麼設備進行消毒滅菌

過濾復除菌操作時,濾器和過制濾瓶等裝置使用前用高壓蒸鍋進行消毒滅菌

都需要高壓滅菌,不過如果你使用的濾器是進口滅過菌的就不需要了,前提是你沒拆開過。

KRBB液的配方是:NaCl 118.5mmol/L, CaCl2 2.54mmol/L, KH2PO4 1.19mmol/L, KCl 4.74mmol/L, NaHCO325mmol/L, MgSO4 1.19mmol/L, HEPES 10mmol/L, BSA 1%)。 而10mmol/L HEPES緩沖液配製方法如下:准確稱取HEPES 2.383g,加入新鮮三蒸水定容至。

Ⅸ 實驗室減壓過濾裝置有哪些

通常指抽濾
主要有真空泵,抽濾漏斗,抽濾瓶,濾紙等

Ⅹ 實驗室常用過濾方法進行凈水.圖為一過濾裝置,該過濾裝置中有幾處錯誤,你能找出來嗎①______②______

圖中無玻璃棒引流,可能會弄破濾紙,使過濾失敗;漏斗的下端沒有緊靠接受的燒杯,可能會使液體外濺.
答案:①沒有用玻璃棒引流②漏斗下端管口沒有靠緊燒杯內壁

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