薄層色譜有機實驗裝置圖

㈠ 對硝基乙醯苯胺溫度升高,哪一個產物佔比會提高

本實驗用乙醯苯胺作為起始原料，首先經過硝化獲得了鄰硝基乙醯苯胺和對硝基乙醯苯胺的混合物。接著採取了兩種分離純化的途徑：一種是先將製得的混合物經過重結晶後獲得純的對硝基乙醯苯胺，通過測定固體的熔點來驗證所得對硝基乙醯苯胺的純度。再將重結晶後的產品用氫氧化鈉的醇溶液水解，取水解後的產品作薄層析和熔點測定來確定水解後的產物。另一種方法是直接將硝化後的混合物水解，製得鄰硝基苯胺和對硝基苯胺的混合物。通過薄層分析和熔點的測定來證實兩者的存在。再分別用重結晶和水蒸氣蒸餾的辦法分離純化所獲得的產品。並通過薄層析和測熔點的方法來驗證產品的組成和純度。最後，根據實驗結果分析比較兩種分離純化途徑的優劣。緒言：對硝基苯胺常溫下是淡黃色針狀結晶，易於升華。熔點 148.5℃，沸點 331.7℃，相對密度1.424（20/4℃）。閃點199°，水中溶解度為0.0008g。微溶於冷水，溶於沸水、乙醇、乙醚、苯和酸溶液，有毒，空氣中容許濃度為5mg/m3。吸入、口服和皮膚接觸有害。所以在實驗過程中要盡量避免與之接觸。對硝基苯胺是染料工業極為重要的中間體，可直接用於合成：對苯二胺，鄰氯對硝基苯胺， 2.6-二氯-4硝基苯胺，5-硝基-2-氯苯酚等，同時還是防老劑，光穩定劑，顯影劑等的原料。可作黑色鹽 K，供棉麻織物染色、印花之用。並且可作農葯和獸葯的中間體，在醫葯工業中可用於生產氯硝胺、卡巴腫、硝基安定、喹啉脲硫酸鹽等。還可用於生產對苯二胺；抗氧化劑和防腐劑等。因此對硝基苯胺的合成具有很大的應用價值。工業上生產對硝基苯胺的方法有乙醯苯胺的硝化水解和對硝基氯苯氨解兩種方法。本實驗採用的是乙醯苯胺硝化水解的方法，具體步驟將在實驗部分給出。反應原理如下：1、乙醯苯胺的硝化
2、硝基乙醯苯胺的水解：而純化和分離的辦法主要採取了薄層析、重結晶、水蒸氣蒸餾三種辦法。三者的分離原理如下。薄層析：薄層色譜（TLC）是用來鑒別產物成分與辨別產物純度的有效方法。不同物質的極性不同因此與展開劑的作用力不同，當物質隨展開劑攀援而上時會由於攀援速度不同而分離開來。
溶劑前沿與起始線間距離品點與起始線距離
溶劑前沿
樣樣品點與起始線間距離品點與起始線距離
起始線
重結晶：重結晶是純化靜態物質的普適的、最常用的方法之一。用適當的溶劑把含有雜質的晶體溶解，配成接近沸騰的濃溶液，趁熱濾去不溶性雜質，使濾液冷卻析出結晶，以達到純化晶體的目的。水蒸氣蒸餾：有機物與水一起共熱，當體系總的蒸氣壓等於大氣壓力時，體系沸騰，此時，有機物在低於100 oC的溫度下隨蒸氣一起蒸出來，這樣的操作叫做水蒸氣蒸餾。♦ 水蒸氣蒸餾的用途及適用場合：水蒸氣蒸餾是用來分離和提純液態或固態有機化合物的一種方法，常用於下列場合：（1）某些沸點高的有機化合物，在常壓蒸餾雖可與副產品分離，但易將其破壞。（2）混合物中含有大量樹枝狀雜質或不揮發性雜質，採用蒸餾、萃取等方法都難於分離；（3）從較多固體反應物中分離出被吸附的液體。♦ 被提純物質必須具備以下幾個條件：（1）不溶或難溶於水；（2）共沸騰下與水不發生化學反應；（3）在100 oC左右時，必須具有一定的蒸氣壓[至少666.5 ~ 1333 Pa(5 ~ 10 mmHg)]實驗參數表格：
名稱 分子量 性狀 折光率 比重 熔點（oC） 沸點（oC） 溶解度（/100g）
水 醇 醚
乙醯苯胺 135.17 白色有光澤片狀結晶 1.5860 1.219 114.3 304 0.46（20oC） 36.9（20oC） 溶
臨硝基乙醯苯胺 180.16 淡黃色片狀或棱狀晶體 1.4149 94 100（0.133 KPa) 溶於沸水微溶於冷水 溶於乙醇 溶於乙醚
對硝基乙醯苯胺 180.16 無色晶體 1.41 215.6 100（1.06x10-3KPa） 溶於熱水 溶 溶
鄰硝基苯胺 138.13 橙黃色針狀晶體 1.44 69.7 284.5 微溶於冷水溶於沸水 溶於乙醇 易溶於乙醚
對硝基苯胺 138.13 淡黃色針狀晶體，易升華 1.424 148.5 331.7 0.0008g（冷水）溶於沸水 溶 溶
實驗內容：
實驗流程圖
鄰、對硝基苯胺
對硝基乙醯苯胺
測熔點 測熔點 薄層析
重結晶
水蒸汽蒸餾
水解

對硝基苯胺
對硝基苯胺
鄰硝基苯胺
測熔點 薄層析
薄層析
測熔點
薄層析
測熔點
對硝基苯胺
實驗步驟1、乙醯苯胺的硝化：在100 mL三口燒瓶中放入5.00g製得的乙醯苯胺，加入10.0mL冰醋酸。安裝上電磁攪拌裝置。在三頸瓶口分別裝上溫度計、迴流冷凝管、恆壓滴液漏斗。在恆壓漏斗中加入4.0 mL濃硝酸（比重為1.14 g/mL， 0.03 mol）和8 .0mL濃硫酸（比重為1.84 g/mL）配成混酸。三頸瓶外用電熱煲控溫在50±5 oC，邊攪拌邊緩慢加入混酸（約需20 min），加完後60 oC左右繼續反應1小時。然後將反應液倒入20 g碎冰中，即有黃色沉澱析出，過濾、水洗至中性。
實驗裝置圖（一）硝化裝置2、硝基乙醯苯胺的水解：將得到的固體均分為兩份，一份進行重結晶，粗產品轉移到50ml燒瓶中，加入約10mL乙醇，在攪拌下加熱至沸騰。觀察有未溶解的固體，再補加乙醇約8mL後固體全部溶解，最後補加了5mL乙醇。稍冷後，加入0.5g活性炭，並煮沸10min。在保溫漏斗中趁熱過濾除去活性炭。濾液倒入熱的燒杯中。然後自然冷卻至室溫，冰水冷卻，待結晶完全析出後，進行抽濾。用少量冷水洗滌濾餅兩次，壓緊抽干。將結晶轉移至表面皿中，烘乾後測定重結晶後固體的熔點，再將重結晶後的固體用自配的氫氧化鈉醇溶液在加熱沸騰的情況下迴流水解半小時，再加入3.0mL水加熱沸騰的情況下迴流水解20min。再將溶液稍冷後倒入20 g冰水中，過濾，用水洗至弱鹼性，烘幹得水解產物。取水解後的產物做薄層分析和熔點測定。水解裝置 + 重結晶裝置 實驗裝置（二）2.2 取另一份直接水解，水解方法與2.1中一樣，水解之後仍將固體均分為兩分，一份進行重結晶，重結晶的方法與2.1類似，只是乙醇的用量減半。再將重結晶的樣品烘乾測定熔點，並做薄層分析。將另一半固體進行水蒸氣蒸餾，將蒸餾後收集到的餾分每次用10mL氯仿分兩次萃取。將萃取所得液體再次蒸餾，直至燒瓶內溶劑僅剩3mL自然冷卻至室溫，將所得樣品進行薄層分析。蒸餾裝置 萃取裝置實驗裝置（三)實驗結果與討論：1.實驗結果：1.1熔點測定結果
物質 T初（oC） T全（oC） 熔距ΔT（oC） 標准熔點T（oC）
對硝基乙醯苯胺（初產品重結晶） 165.0 193.0 28.0
168.0 190.0 22.0 215.6
對硝基苯胺（重結晶加水解） 144.0 149.0 5.0
143.0 152.0 9.0 148.5
直接水解的初產品 60.0 63.0 3.0
61.0 63.0 2.0 69.7
水解+重結晶後的產品 59.0 65.0 6.0
61.0 66.0 5.0 69.7
對硝基苯胺（水解+水蒸氣蒸餾） 145.0 149.0 4.0 148.5
146.0 150.0 4.0
1.2薄層析結果：
物質 Rf值 樣點黃色深淺 樣點性狀
重結晶再水解產品 樣點1 0.59 顏色很淺， 橢球狀
純鄰硝基苯胺 0.63 顏色深 橢球狀
樣點2 0.28 顏色極深 長條楔形
純對硝基苯胺 0.28 顏色深 橢球狀
直接水解的初產品 樣點1 0.59 顏色深 橢球狀
純鄰硝基苯胺 0.61 顏色深 橢球狀
樣點2 0.28 顏色淺 橢球狀
純對硝基苯胺 0.28 顏色深 橢球狀
水解+重結晶後的產品 樣點1 0.56 顏色深 橢球狀
純鄰硝基苯胺 0.56 顏色深 橢球狀
樣點2 0.28 顏色很淺 橢球狀
純對硝基苯胺 0.28 顏色深 橢球狀
對硝基苯胺（水解+水蒸氣蒸餾） 樣點1 無 無 無
純鄰硝基苯胺 0.61 顏色深 橢球狀
樣點2 0.27 顏色深 橢球狀
純對硝基苯胺 0.27 顏色深 橢球狀
鄰硝基苯胺（水解+水蒸氣蒸餾） 樣點1 0.54 顏色深 橢球狀
純鄰硝基苯胺 0.54 顏色深 橢球狀
樣點2 無 無 無
純對硝基苯胺 0.26 顏色深 橢球狀
2、實驗討論（1）熔點測定分析由硝化產物直接重結晶得到的對硝基乙醯苯胺的熔點測定結果來看，熔程長，熔點相較於標準的對硝基乙醯苯胺的熔點-215.6oC來說偏低了許多。造成該實驗結果的主要原因有：① 從得到的產品的晶型來看，產品呈土黃色泥狀，基本看不出晶態。而晶體的晶型對晶體的熔點有很大的影響，我所得到的產品更偏向於是多晶或非晶，所以熔程較長。② 熔點低說明所含的雜質多，重結晶的效果欠佳，包含的雜質初步判斷為臨硝基乙醯苯胺。判斷的理由是硝化過程中，在酸的作用下會有少量的乙醯苯胺被水解生成苯胺，但由於量少，在重結晶的過程中會全部溶解於溶劑中，不會給實驗結果帶來很大影響，而含量較多的鄰硝基乙醯苯胺則會因為重結晶的的效果不佳而使得實驗結果偏低。③ 熔點儀的溫度計測溫不準，造成所得數值偏低，這在其他的幾個熔點測定實驗中也可以看出。④ 晶體不夠乾燥。①、② 兩個解釋最本質的原因是重結晶的過程中所加的溶劑量不夠，溶劑用量不足會使得鄰硝基乙醯苯胺在低溫時並不能完全溶解在溶劑中，而隨著對硝基乙醯苯胺一起析出，再加上晶體析出過程中，由於溶劑量過少，溶質析出過快，成核密度太大，微粒不能形成晶體而是以沉澱形式存在，且相對表面積增大，吸附現象嚴重，總的結果就是熔程長、熔點偏低。
（2）薄層析結果分析①從薄層析結果來看，鄰硝基苯胺的樣點隨溶劑移動的速度更快，比移值更大，是由於鄰硝基苯胺的極性比對硝基苯胺小，因此與吸附劑的結合力更弱，在吸附與脫吸的交替過程中脫吸占上風，因此與溶劑一起攀爬的速度快於對硝基苯胺。②薄層析中，硝化後重結晶再水解的樣品的樣點拉得很長，並不是清晰的一點，說明產品純度不高。除了有鄰硝基苯胺和對硝基苯胺外還有其他有色雜質，這可能是硝化過程中由於溫度控制不當，有多硝基化合物生成。多硝基化合物的生成會使得產品顏色加深，而我所得到的產品顏色確實很深。由此觀之確實有少量多硝基化合物存在。（3)綜合分析1、為什麼要用氫氧化鈉醇溶液作為水解試劑：胺基具有給電子性會使醯基碳鈍化，因此水解所需的條件要劇烈一些，氫氧化鈉醇溶液鹼性強，水解效果好，以乙醇作溶劑提供了一個均相體系使反應更容易發生。2、水解產品分析重結晶後水解的產品中對硝基苯胺占絕大部分，但仍有少量的鄰硝基苯胺，這從薄層析和熔點測定的結果中都可以看出。薄層析結果顯示樣品存在兩個樣點，一個與純的鄰硝基苯胺樣點移動的速度一致，但顏色很淺；一個與純的對硝基苯胺樣點移動的速度一致，但顏色深。熔點測定時，熔點與對硝基苯胺的熔點十分接近。這兩個實驗結果都表明產物主要是對硝基苯胺。造成最終的產品中仍有鄰硝基苯胺的原因很大一部分在於重結晶時的效果不好，有鄰硝基乙醯苯胺，所以在水解之後產品不純。直接水解後的樣品熔程短，熔點為62oC，十分接近鄰硝基苯胺的熔點，而薄層色譜中樣品仍有兩個樣點，一個與純的鄰硝基苯胺樣點移動的速度一致，顏色很深；一個與純的對硝基苯胺樣點移動的速度一致，但顏色很淺。由熔點測定結果和薄層色譜結果可以得出，直接水解的產物中鄰硝基苯胺居多。將初產品重結晶後，測得的熔點為63oC，相比於未重結晶的產品更接近純的鄰硝基乙醯苯胺的熔點，但改善不大。除了熔點改善不大之外，薄層色譜也十分相近。另外還有明顯的熔程變長。而理論上重結晶後應該會使得熔程變短，熔點更接近真實值，所以實驗結果與理論之間出現了悖論。這其中的原因是我在直接水解之後，將水解後的產品

㈡ 薄層色譜實驗步驟

薄層色譜實驗步驟如下：
1、將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的泡後，倒入塗布器中，在玻璃板上平穩地移動塗布器進行塗布（厚度為0.2至0.3毫米）。
2、取下塗好薄層的玻璃板，置水平台上於室溫下晾乾，後在110攝氏度烘30分鍾。即置有乾燥劑的乾燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。
3、用點樣器點樣於薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2.0厘米，點樣直徑為2到4毫米，點間距離約為1.5到2.0毫米，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
4、將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5到1.0厘米（切勿將樣點浸入展開劑中），密封室蓋，等展開至規定距離（一般為10到15厘米）。
5、取出薄層板，晾乾，按各品種項下的規定檢測，如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量，則可用薄層掃描法。

㈢ 薄層色譜法工作原理

薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法，它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同，使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中，連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達到各成分的互相分離的目的。

薄層層析可根據作為固定相的支持物不同，分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。

吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面，吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上，都可能發生吸附現象。

物質分子之所以能在固體表面停留，這是因為固體表面的分子(離子或原子)和固體內部分子所受的吸引力不相等。在固體內部，分子之間相互作用的力是對稱的，其力場互相抵消。

(3)薄層色譜有機實驗裝置圖擴展閱讀：

一、薄層色譜的特點：

靈敏度及解析度高、分離快速、操作方便、同時分離多個樣品、樣品預處理簡單、設備簡單。

由於這些特點，薄層色譜在實際工作中的應用十分廣泛。由於通常用薄層色譜分析法進行定量分析的過程中，薄層掃描儀是最為重要的，因此對它進行略詳的介紹。

薄層掃描儀的基本結構及主要功能基本是相同的，每台儀器都包括光源、分光器、檢測器、數據處理及信號輸出幾個部分。

二、優點

它保持了操作方便、設備簡單、顯色容易等特點，同時展開速率快，一般僅需15～20分鍾；混合物易分離，分辨力一般比以往的紙層析高10～100倍。

它既適用於只有0．01μg的樣品分離，又能分離大於500mg的樣品作制備用，而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。薄層層析的缺點是對生物高分子的分離效果不甚理想。

㈣ 薄層色譜法簡介

目錄

• 1 拼音
• 2 英文參考
• 3 概述
• 4 薄層色譜法的定義
• 5 薄層色譜法的儀器與材料
• 5.1 薄層板
• 5.2 點樣器
• 5.3 展開容器
• 5.4 顯色劑
• 5.5 顯色裝置
• 5.6 檢視裝置
• 6 薄層色譜法的操作方法
• 6.1 薄層板制備
• 6.2 點樣
• 6.3 展開
• 6.4 顯色與檢視
• 7 系統適用性試驗
• 7.1 檢測靈敏度
• 7.2 比移值（Rf）
• 7.3 分離效能
• 8 測定法
• 8.1 鑒別
• 8.2 雜質檢查
• 9 薄層掃描法
• 10 參考資料

1 拼音

báo céng sè pǔ fǎ

2 英文參考

thinlayer chromatography (TLC) [朗道漢英字典]

thin layer chromatography [21世紀雙語科技詞典]

TLC [朗道漢英字典]

plate chromatography [湘雅醫學專業詞典]

thin layer chromonere [湘雅醫學專業詞典]

3 概述

薄層色譜法亦稱薄層層析法。是將吸附劑或載體均勻地鋪在玻璃板、塑料板或鋁基片上形成一均勻薄層，待點樣、展開後，與適宜的對照物按同法在同板上所得的色譜圖對比，並可用薄層掃描儀進行掃描，用以進行葯品的鑒別，雜質檢查或含量測定的方法。按分離機制可分為吸附、分配、離子交換、凝膠過濾等法。適用於微量樣品的分離鑒定，具有分離速度快，分離效率高的特點。

4 薄層色譜法的定義

薄層色譜法系將供試品溶液點樣於薄層板上，經展開、檢視後所得的色譜圖，與適宜的對照物按同法所得的色譜圖作對比，用於葯品的鑒別或雜質檢查的方法[1]。

5 薄層色譜法的儀器與材料

5.1 薄層板

自製薄層板除另有規定外，玻璃板要求光滑、平整，洗凈後不附水珠，晾乾。最常用的固定相有硅膠G、硅膠GF254、硅膠H和硅膠HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F254等。其顆粒大小，一般要求粒徑為5～40μm。

薄層塗布，一般可分為無黏合劑和畢數含黏合劑兩種。前者系將固定相直接塗布於玻璃板上，後者系在固定相中加入一定量的黏合劑，一般常用10%～15%煅石膏（CaSO4·2H2O在140℃加熱4小時），混勻後加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液（0.2%～0.5%）適量調成糊狀，均勻塗布於玻璃板上。使用塗布器塗布應能使固定相在玻璃板上塗成一層符合厚度要求的均勻薄層。

市售薄層板分普通薄層板和高效薄層板，如硅膠薄宏數配層板、硅膠GF254薄層板、聚醯胺薄膜和鋁基片薄層板等。高效薄層板的粒徑一般為5～7μm。

5.2 點樣器

常用具支架的微量注射器或定量毛細管，應能使點樣位置正確、集中。

5.3 展開容器

應使用適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開缸，並有嚴密的蓋子，底部應平整光滑，或有雙槽。

5.4 顯色劑

見各品種項下的規定。可採用噴霧顯色、浸漬顯色或置適宜試劑的蒸氣中熏蒸顯色，用以檢出斑點蔽指。

5.5 顯色裝置

噴霧顯色要求用壓縮氣體使顯色劑呈均勻

細霧狀噴出；浸漬顯色可用專用玻璃器皿或用適宜的玻璃缸代替；蒸氣熏蒸顯色可用雙槽玻璃缸或適宜大小的乾燥器代替。

5.6 檢視裝置

檢視裝置為裝有可見光、短波紫外光（254nm）、長波紫外光（365nm）光源及相應濾片的暗箱，可附加攝像設備供拍攝色譜用，暗箱內光源應有足夠的光照度。

6 薄層色譜法的操作方法

6.1 薄層板制備

自製薄層板除另有規定外，將1份固定相和3份水在研缽中按同一方向研磨混合，去除表面的氣泡後，倒入塗布器中，在玻璃板上平穩地移動塗布器進行塗布（厚度為0.2～0.3mm），取下塗好薄層的玻璃板，置水平台上於室溫下晾乾後，在110℃活化30分鍾，即置有乾燥劑的乾燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。

市售薄層板臨用前一般應在110℃活化30分鍾。聚醯胺薄膜不需活化。鋁基片薄層板可根據需要剪裁，但須注意剪裁後的薄層板底邊的硅膠層不得有破損。如在貯放期間被空氣中雜質污染，使用前可用適宜的溶劑在展開容器中上行展開預洗，110℃活化後，置乾燥器中備用。

6.2 點樣

除另有規定外，用點樣器點樣於薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2.0cm，樣點直徑為2～4mm（高效薄層板為1～2mm），點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜，一般為1.0～2.0cm（高效薄層板可不小於5mm）。點樣時必須注意勿損傷薄層板表面。

6.3 展開

展開缸如需預先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑，必要時在壁上貼兩條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封頂蓋，使系統平衡或按各品種項下的規定操作。

將點好供試品的薄層板放入展開缸中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5～1.0cm（切勿將樣點浸入展開劑中），密封頂蓋，待展開至適宜的展距（如：20cm的薄層板，展距一般為10～15cm；10cm的高效薄層板，展距一般為5cm左右），取出薄層板，晾乾，按各品種項下的規定檢測。

展開可以單向展開，即向一個方向進行；也可以進行雙向展開，即先向一個方向展開，取出，待展開劑完全揮發後，將薄層板轉動90°，再用原展開劑或另一種展開劑進行展開；亦可多次展開。

6.4 顯色與檢視

熒光薄層板可用熒光猝滅法；普通薄層板，有色物質可直接檢視，無色物質可用物理或化學方法檢視。物理方法是檢出斑點的熒光顏色及強度；化學方法一般用化學試劑顯色後，立即覆蓋同樣大小的玻璃板，檢視。

7 系統適用性試驗

按各品種項下要求對檢測方法進行薄層色譜法系統適用性試驗，使斑點的檢測靈敏度、比移值（Rf）和分離效能符合規定。

7.1 檢測靈敏度

系指雜質檢查時，供試品溶液中被測物質能被檢出的最低量。一般採用對照溶液稀釋若干倍的溶液與供試品溶液和對照溶液在規定的色譜條件下，在同一塊薄層板上點樣、展開、檢視，前者應顯示清晰的斑點。

7.2 比移值（Rf）

系指從基線至展開斑點中心的距離與從基線至展開劑前沿的距離的比值。鑒別時，可用供試品溶液主斑點與對照品溶液主斑點的比移值進行比較，或用比移值來說明主斑點或雜質斑點的位置。

除另有規定外，比移值（Rf）應在0.2～0.8之間。

7.3 分離效能

鑒別時，在對照品與結構相似葯物的對照品製成混合對照溶液的色譜圖中，應顯示兩個清晰分離的斑點。雜質檢查的方法選擇時，可將雜質對照品用供試品自身稀釋對照溶液溶解製成混合對照溶液，也可將雜質對照品用待測組分的對照品溶液溶解製成混合對照溶液，還可採用供試品以適當的降解方法獲得的溶液，上述溶液點樣展開後的色譜圖中，應顯示兩個清晰分離的斑點。

8 測定法

8.1 鑒別

薄層色譜法用於鑒別時，可採用與同濃度的對照品溶液，在同一塊薄層板上點樣、展開與檢視，供試品溶液所顯主斑點的顏色（或熒光）與位置（Rf）應與對照品溶液的主斑點一致，而且主斑點的大小與顏色的深淺也應大致相同。或採用供試品溶液與對照品溶液等體積混合，應顯示單一、緊密的斑點；或選用與供試品化學結構相似的葯物對照品與供試品溶液的主斑點比較，兩者Rf應不同，或將上述兩種溶液等體積混合，應顯示兩個清晰分離的斑點。

8.2 雜質檢查

薄層色譜法用於雜質檢查時，可採用雜質對照品法、供試品溶液的自身稀釋對照法，或兩法並用。供試品溶液除主斑點外的其他斑點應與相應的雜質對照品溶液或系列濃度雜質對照品溶液的相應主斑點比較，或與供試品溶液的自身稀釋對照溶液或系列濃度自身稀釋對照溶液的相應主斑點比較，不得更深。

通常應規定雜質的斑點數和單一雜質量，當採用系列自身稀釋對照溶液時，也可規定估計的雜質總量。

9 薄層掃描法

系指用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜有吸收紫外光或可見光的斑點，或經激發後能發射出熒光的斑點進行掃描，將掃描得到的圖譜及積分數據用於葯品的鑒別，雜質檢查或含量測定。

除另有規定外，薄層掃描方法可根據各種薄層掃描儀的結構特點及使用說明，結合具體情況，選擇反射方式，採用吸收法，或熒光法，用雙波長或單波長掃描。測定方法有內標法及外標法，由於影響薄層掃描結果的因素很多，故薄層掃描定量測定應在保證供試品斑點的量在校正曲線的線性范圍內的情況下，與對照品同板點樣，展開，掃描，測量和計算。

㈤ 色譜分離技術中，薄層色譜的基本操作過程及注意事項

薄層色譜操作注意事項

影響薄層色譜分析的因素有很多，比如樣品處理方法、薄層板制備技巧、點樣方法、展開劑的遴選、溫濕度的掌控等等很多方面，在這里對其操作要點作一下簡單介紹:

1鋪制薄層板：鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀：過稠，板容易出現拖動或停頓造成的層紋；過稀，水蒸發後，板表面較粗糙。勻漿配比一般是硅膠G:水=1：2～3，硅膠G:羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2。研磨勻漿的時間，根據經驗來定，與空氣濕度有關，一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外，也影響板塗層的厚度，進一步影響上樣量。塗層薄，點樣易過載；塗層厚，顯色不那麼明顯。通常，板的質量對薄層鑒別的影響不是很大，影響最大的是展開劑的配製和展開系統的飽和。
2點樣：盡量用小的點樣管。如果有足夠的耐性，最好只用1微升的點樣管。這樣，點的斑點較小，展開的色譜圖分離度好，顏色分明。樣品溶液的含水量越小越好，樣品溶液含水量大，點樣斑點擴散大。樣品溶液的溶劑一般是無水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。點好樣的薄層板用電吹風的熱風吹乾或放入乾燥器里晾乾。

薄層色譜用於定量時，點樣是最主要的誤差來源。

供試液的溶劑均有不同程度的洗脫力，所以在點樣的同時，樣品在原點就可是成環形展開，原點直徑的擴散促進了這種展開，Kaiser稱之為「上樣環形色譜效應」。如果樣品在溶劑中的溶解度很大，原點將變成空心環。這種效應對隨後的先行展開造成很不利的影響。
供試液的溶劑在原點的殘留，也會改變展開的選擇性，特別是供試液的溶劑與展開劑的極性相差較大時更明顯。再者，親水性溶劑殘留在原點吸收大氣中的水分（特別在高濕度環境）對色譜的影響也不可低估。因此點樣時的同步乾燥或繼後乾燥以除去原點殘存的溶劑是需要的。但應盡可能避免高溫加熱，如用吹風筒加熱，樣品變為固態後，部分或全部強烈的吸附在吸附劑的顆粒上，而促進了硅膠的有催化作用的活性表面故態化學反應，導致樣品的變性（尤其熱不穩定物質），至少移動相在展開時對這部分樣品的溶解速度比移動速度慢得多而形成拖尾（斑點拖尾的原因之一）。

㈥ 如何使用ChemDraw繪制薄層色譜層析圖

weiweizoe(站內聯系TA)滑鼠放在點上，按住shift鍵，看方向拖動就可以了sally88814(站內聯系TA)滑鼠回放在點上答，按住shift鍵，用滑鼠拉就OKxiajun(站內聯系TA)在chemdraw中點擊類似長方形的方框拖動就可以了，同理選擇一個圓點拖動就可以畫出產物點，還可以用畫圖工具畫出薄層色譜，方法也是拖動滑鼠放大縮小一個產物點。wushuiweibin(站內聯系TA)點方塊的那個就好了
fhfy(站內聯系TA)用photoshop畫畫也可以呀！！

㈦ 薄層色譜和柱色譜實驗的原理，步驟和注意事項

(1)薄層色譜---自下而上,展開分離!
(2)柱色譜---自上而下,展開分離!
(3)選擇適當的展開劑!

㈧ 薄層色譜法怎麼做

先制備薄層板，即在大小適當的玻璃板上，均勻塗上吸附劑，厚度在一毫米以內，然後在距底邊1。5厘米處點上樣品溶液，形成一個小點，稱為「原點」。再將薄層板置於盛有動相溶劑的玻缸內（此溶劑稱為「展開溶劑」，玻缸稱為「展開槽」）。

當溶劑沿薄層擴散到距原點以上一定距離時，取出薄層板，記錄展開溶劑擴展前沿距原點的距離A。用噴灑顯色試劑或紫外光線照射的方法使被分離的化合物顯絕孝色，此過程稱為「顯譜」。觀察並記錄所顯斑點的中心距原點的距拆猛離。斑點在薄層板上的位置通常用比移值（Rf）表示。

基本原理：

薄層層析可根據作為固定相的支持物不同，分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固旅宏橋定相的薄層吸附層析。

吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面，吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上，都可能發生吸附現象。

以上內容參考：網路-薄層色譜法