制備海葵毒素的實驗裝置

① 海葵毒素的海葵毒素

---環外含氮類 如沙群海葵毒素（palytoxin,PTX），最春帆鬧早是從腔腸動物皮沙海葵
科沙群海葵屬毒沙群海葵Palythoa toxica中分離出來的毒性極強的化合物，分子式C129H223N3O54，LD50 0.15μg/kg(小鼠，ip)，其卵的毒性最大，1g卵所含毒素足以殺死10萬只20g體重的小白鼠，所以它是迄今為止在非蛋白毒素轎宏中毒性最強的化合物，具有抗癌、溶血等多種生物活性。大海中優美的閨秀魚在海葵有毒的扒罩觸須中從容出沒，奼紫嫣紅，萬態千姿。
1980年我國有關單位在民間普查時發現了沿海漁民使用海葵治病的情況。他們在舟山黃龍島採集了縱條礬海葵Haliplanella luciae（V·）進行了一系列葯理學實驗，發現海葵毒素很有價值的生物活性。

② 海葵毒素是從海洋生物中出來的一種劇毒物質．科學家用了8年時間才完成了海葵毒素的全合成，其結構簡式如

由圖可以知道一個海葵毒素分子中含的N原子數為3個，海葵毒素分子的相對分子質量為：Mr=

③ 海葵毒素的海葵毒素的合成

海葵跡前毒素是從海洋生物中分離出的一種劇毒物質，分子式為C129H223N3O54，可能存在的異構體數目為271個之多，因此合成海葵毒素是一項極具挑戰性的工作。
哈佛大學Kishi教授領導姿運清的研究小組經過8年努力，於1989年完成了海葵毒素的全合成。
海葵毒素的全合成是有機化學100多年來積極探悄族索、不斷積累的結果，它的成功預示著有機合成必將步入新的輝煌。

④ 海洋生物葯物的海產生物毒素

已闡明河魨毒素，石房蛤毒素，岩沙海葵毒素和5種海葵多肽毒素的化學結構。河魨毒素和石房蛤毒素是肌肉神冊蘆穗經的阻滯劑，能阻抑鈉離子傳導，其葯理作用類似局麻葯，但強度要比常用的局麻葯高出千倍左右。岩沙海葵毒素是很強的細胞毒，對接種艾氏腹水癌的試驗小鼠有完全的治療作用，是目前非蛋白毒素中毒性最強的毒素之一，也是目前已知的最強的血管收縮劑之一。 5種海葵多肽毒素對心臟神經等均有作用。另外，沙蠶毒素有殺蟲作用，導致殺蟲葯巴丹(Padan)問世州卜。駿河毒素嘩芹和新駿河毒素含有氮甙，具有很強的抗膽鹼活性等。

⑤ 岩沙海葵毒素的毒理

PTX是已知結構的非肽類天然生物毒素中毒性最強和結構最復雜的化學物質。其毒性不僅比神經性毒劑沙林高出幾個數量級，而且比劇毒性的河豚毒素或石房蛤毒素也大數十倍，是已知毒性最強烈的海洋生物毒素之一。該毒嫌好素對家兔的半數致死量LD50為25ng/kg，從中毒到死亡的時間僅3～5分鍾，臨床症狀可表現為感覺異常、麻痹，並伴有眩暈、全身無力、肌痛等全身中毒症狀和ECG不規律以及橫紋肌溶解等，心臟和神經系統是其作用的主要部位。
PTX是已知的最強的冠狀動脈收縮劑，它比血管緊張素Ⅱ的作用至少強100倍，使冠狀動脈血管強烈收縮，伴隨出現心臟變力與變時反應。心律失常，T波增大，心室收縮力進行性減低，血壓下降，心肌供氧不足，可迅速引起心臟功能衰竭，隨之發生呼吸衰竭而導致死亡。該毒素還可引起血管壞死，內臟廣泛性出血及腎功能衰竭等改變，這些可能與其細胞毒性作用有關。 PTX之所以具有如此強烈的毒性，是因為它能選擇性地作用於細胞膜上Na+-K+-ATPase，使膜上鈉離子通道M閘門打開且不能關閉。從而加速Na+的內流，以及K+外流，引起持續的去極化作用，影響細胞的功能，從而引發一液察系列葯理學毒理學作用，導致平滑肌、心肌及骨骼肌收縮。此外，PTX也作用於肌質網上的Ca2+-ATPase，引起Ca2+載體的缺失。當將毒素加入到Ca2+-ATPase的時候，就會增加對磷酸酶水平的作用。Ca2+濃度飽和時，磷酸酶的水平就會減少。PTX會阻斷Ca2+游離構象中的酶，以妨礙其催化循環的進程。
有研究表明，PTX導致小鼠角質化細胞基因表達的改變。PTX能刺激用於金屬蛋白酶MMP-13的mRNA的增加，該酶能起致癌作用。同時它還能刺激c-Fos與活性蛋白AP-1位點結合，從而來促進MMP-13基因啟動。 免疫學檢測技術是一種靈敏度高、特異性好的檢測技術，用於PTX研究的主要是ELISA和固相放射免疫技術等。固相放射免疫技術的缺點主要是所用儀器昂貴，而且存在放射性污染，對環境和人體在一定程度上造成不良影響，也不易推廣。能用於PTX免疫分析的主要是多克隆抗體和單克隆抗體。在抗體方面，已有人制備了抗PTX的多克隆抗體，並嘗試應用於PTX的實際檢測當中。ELISA檢測技術是當前應用於鑒定PTX中效果最理想的技術。該技術的核心是需要制備高靈敏性和高特異性的抗體。相對於多克鬧者茄隆而言，單克隆抗體具有高度專一性的特點。特別是單克隆抗體產生於一個永久性的細胞譜系，能以較低的變異性連續產生，更加適用於單一表位的檢測。在應用與ELISA時，單克隆抗體還具有質地均一、特異性高、滴度高、反應靈敏、可標准化，並且能進行工業性大規模生產的優點。