菠菜色素的提取與分離實驗裝置圖

① 某班學生以新鮮菠菜葉為材料進行葉綠體中色素的提取和分離的實驗時，由於各組操作不同，出現了如圖所示的

A、光合色素不能溶於水，甲沒有色素，可能是誤用蒸餾水做提取液和層析液專，故A正確；
B、乙中色素屬的量較少，可能是因為研磨時未加入SiO₂，導致研磨不充分、提取色素含量少，故B正確；
C、丙中葉綠素含量比類胡蘿卜素含量低，可能是因為研磨時未加入CaCO₃，導致部分色素被破壞，故C錯誤；
D、丁中葉綠素含量比類胡蘿卜素含量低，且色素含量較少，可能是因為研磨時未加入CaCO₃，導致部分色素被破壞所致，故D正確．
故選：C．

② 綠葉中色素的提取和分離的實驗中，菠菜葉，放入研缽中，加入無水乙醇、石英砂、CaCO2以後，迅速研磨

不可以，這是因為前面加的物質有些事保護葉綠素不被分解和破壞的比如碳酸鈣，石英砂是研磨用的，乙醇必須提前加入，不然不利於研磨。葉片用研棒干研很費勁。

③ 葉綠體色素實驗方法是怎麼樣的

操作難度：★★★

實驗方法：

下面我們介紹一下葉綠體色素的提取和分離方法，並了解一下葉綠體色素的種類。

葉綠體中一般含有綠色素（葉綠素a和b）和黃色素（胡蘿卜素和葉黃素）。這兩類色素均不溶於水，而溶於有機溶劑中。因此，常用酒精或丙酮來提取。

色素分離方法很多，紙層析是最簡便的一種。當溶劑不斷地從濾紙上流過時，由於混合物中各成分在固定相和流動相間具有不同的分配系數，因此，它們的移動速度不同，便可將混合取液中的各種色素分離開。

實驗所需要的材料和用具：菠菜葉片（或其他新鮮綠葉）、一台天平、研缽、量筒、漏斗、試管、試管架、色層分析濾紙、細玻棒、大培養皿兩個（底和蓋直徑相等）、95％酒精、碳酸鈣、汽油（純凈無色的）、小酒杯（或平底短玻管）1個、剪刀、滴管。

實驗步驟如下：

1.選取鮮綠的菠菜葉片，擦凈、剪碎後稱取3克鮮葉，放入研缽中，加少許碳酸鈣（可中和細胞中的有機酸，避免形成去鎂葉綠素）和5毫升酒精，研磨成糨糊狀。再加酒精5毫升，研勻後用漏斗過濾，濾液即為葉綠體色素提取液，內含有葉綠素a、葉綠素b及葉黃素和胡蘿卜素。

2.取色層分析濾紙，剪成圓形，其直徑應略大於培養皿的直徑（如無層析濾紙，也可用圓形定性或定量濾紙）。在濾紙圓心戳一圓形小孔。另取同樣的濾紙，剪成長5厘米、寬1.5厘米的窄條，用細玻棒沿長度方向捲成1.5厘米長的紙捻，抽出玻棒後再進一步搓成均勻、緊密的紙捻。

3.用細口滴管吸取葉綠體色素提取液，滴在紙捻的一端，風干（或用電吹風吹乾），再滴，再風干，如此重復3~5次。

4.將滴有色素的紙捻端插入圓形濾紙中心小孔中，使紙捻與圓形濾紙緊密接觸，且與紙面平齊，切勿高出紙面。

5.取兩個直徑相等的乾燥培養皿，在一個培養皿內放一小酒杯（或平底短玻管），杯內加入適量的汽油（或石油醚）作為擴散劑。把插有紙捻的圓形濾紙平放在培養皿上，使紙捻下端浸入汽油中，迅速蓋上另一培養皿，兩培養皿周邊對齊。

6.小杯內的汽油沿紙捻擴散到圓形濾紙上，並推動葉綠體色素也向濾紙四周擴散。待汽油擴散到培養皿邊緣時。取出濾紙，即可看到四種色素分離成四個同心圓環。用鉛筆標出各種色素的位置和名稱。

知識延伸：

由於各種色素在擴散劑中的溶解度不同，以及濾紙對各色素的吸附能力不同，而達到分離的目的。擴散最快的是胡蘿卜素，為橙黃色；其次是葉黃素，為鮮黃色；再次是葉綠素a，為藍綠色；擴散最慢的是葉綠素b，為黃綠色。

④ 菠菜色素的提取和色素分離

一、實驗目的 通過綠色植物色素的提取和分離，了解天然物質分離提純方法。 通過薄層色譜分離操作，加深了解微量有機物色譜分離鑒定的原理。 二、實驗原理 綠色植物如菠菜葉中含有葉綠素（綠）、胡蘿卜素（橙）和葉 黃素（黃）等多種天然色素。 葉綠素存在兩種結構相似的形式即葉綠素a(C 55 H 72 O 5 N 4 Mg) 和 葉綠素b(C 55 H 7 O 6 N 4 Mg) ，其差別僅是a 中一個甲基被b 中的甲醯 基所取代。它們都是吡咯衍生物與金屬鎂的絡合物，是植物進行光 合作用所必需的催化劑。植物中葉綠素a 的含量通常是b 的3 倍。 盡管葉綠素分子中含有一些極性基團，但大的烴基結構使它易溶於 醚、石油醚等一些非極性的溶劑。 二、實驗原理 胡蘿卜素(C 40 H 56 )是具有長鏈結構的共軛多烯。它有三種異構體， 即a-, β - 和γ - 胡蘿卜素，其中β - 異構體含量最多，也最重要。在生物體 內，β - 體受酶催化氧化即形成維生素A 。目前β - 胡蘿卜素已可進行工 業生產，可作為維生素A 使用，也可作為食品工業中的色素。 葉黃素(C 40 H 56 O 2 )是胡蘿卜素的羥基衍生物，它在綠葉中的含量通 常是胡蘿卜素的兩倍。與胡蘿卜素相比，葉黃素較易溶於醇而在石油醚 中溶解度較小。 二、實驗原理N N N N Mg CO 2 CH 3 CH 2 O CH H 3 C H 3 C R CH 2 CH 3 CH 3 CH 2 CH 2 C O O CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 CH 3葉綠素 a (R=CH 3 )葉綠素 b (R=CHO)二、實驗原理CH 3 H 3 C R CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 R H 3 C CH 3 H 3 Cβ-胡蘿卜素（R=H） 葉黃素（R=OH）CH 2 OH維生素A三、基本操作與技術薄層色譜 薄層色譜常用TLC表示，又叫薄板層析，是色譜法中的一種，是 快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，屬固-液吸附 色譜，它兼備了柱色譜和紙色譜的優點，一方面適用於少量樣品（幾 到幾微克，甚至0.01微克）的分離；另一方面在製作薄層板時，把吸 附層加厚加大，因此，又可用來精製樣品，此法特別適用於揮發性較 小或較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的質。此外，薄層色 譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種「預試」。 薄層色譜的原理是利用吸附劑（硅膠、氧化鋁等）對不同組分吸 附能力的差異從而達到分離目的的方法。 三、基本操作與技術�6�1薄層板的制備 吸附劑：最常用硅膠GF254；硅膠HF254。 粘結劑：一般用所羧甲基纖維素鈉（CMC），也有用澱粉的。CMC 配成1％水溶液使用。 制板：以小板的制備為例，將硅膠加1％CMC，調成槳狀（在 平 鋪玻璃板上能晃動但不能流動），將其塗在載玻片上 （75 ×25），為使其坦平，可將載玻片用手端平晃動，致坦平 為止，放在干凈平坦的檯面上，晾乾之後放入110℃烘箱 活 化1小時即可使用。 三、基本操作與技術�6�1點樣 點樣用的毛細管為內徑＜1mm的管口平整的毛細管，將樣品溶於 低沸點的溶劑（乙醚、丙酮、乙醇、四氫呋喃等）配成1％溶液。 點樣前，可先用鉛筆在小板上距一端5mm處輕輕劃一橫線，作為 起始線，然後用毛細管吸取樣品在起始線上小心點樣，如需重復點樣， 則應待前次點樣的溶劑揮發後方可重點。若在同一塊板上點幾個樣， 樣品點間距離為5mm以上。 三、基本操作與技術�6�1展開 展開劑的選擇主要根據樣品的極性、溶解度和吸附劑的活性等因 素來考慮。 薄層的展開在密閉的容器中進行。先將選擇的展開劑放入色譜器 中（小板可用廣口瓶代替），使色譜器內空氣飽和5-10min，再將點好 試樣的薄層板放入色譜器中進行展開，點樣的位臵必須在展開劑液面 之上，當展開劑上升到薄層的前沿（離前端5-10mm）或多組分已明顯 分開時，取出薄層板放平晾乾，用鉛筆劃溶劑前沿的位臵後，即可顯 色。 三、基本操作與技術�6�1顯色 如果化合物本身有顏色，就可直接觀察它的斑點。如果本身無色， 可先在紫外燈光下觀察有無熒光斑點（有苯環的物質都有），用鉛筆在 薄層板上劃出斑點的位臵；對於在紫外燈光下不顯色的，可放在含少量 碘蒸氣的容器中顯色來檢查色點（因為許多化合物都能和碘成黃棕色斑 點），顯色後，立即用鉛筆標出斑點的位臵。�6�1計算比移值 記下原點至主斑點中心及展開劑前沿的距離，計算比移值（Rf）。 三、基本操作與技術 距離 溶劑前沿至原點中心的 點中心的距離 溶質最高濃度中心至原f R四、主要儀器與試劑儀器:研缽、布氏漏斗、圓底燒瓶、直形冷凝管、層析缸試劑:硅膠G ，甲醇，石油醚（60-90 ℃），丙酮，乙酸乙酯，菠菜葉 五、實驗裝臵圖 薄層板在層析缸中展開 六、實驗流程圖 菠菜 菠菜汁 萃取液 研磨 過濾 石油醚-甲醇 萃取 浸膏 水 洗滌、蒸餾 薄層層析R f值 分別用展開劑（a ）石油醚- 丙酮=8:2 （體積比）和（b ） 石油醚- 乙酸乙酯=6:4 （體積比）展開，比較不同展開劑系 統的展開效果。 七、實驗關鍵及注意事項薄層層析時，薄層板的制備要厚薄均勻，表面平整光潔。點樣與展開應按要求進行：點樣不能戳破薄層板面；展開 時，不要讓展開劑前沿上升至底線。否則，無法確定展開 劑上升高度，即無法求得Rf值和准確判斷粗產物中各組分 在薄層板上的相對位臵。 八、思考題 在一定的操作條件下為什麼可利用Rf值來鑒定化合物？ 在混合物薄層色譜中，如何判定各組分在薄層上的位臵？ 展開劑的高度若超過了點樣線，對薄層色譜有何影響？

⑤ 怎麼從菠菜葉中提取綠色的葉綠體

光合色素的提取和分離如下：

一、光合色素的提取

1、選材：選擇鮮綠、柔軟的綠色菠菜葉。

2、研磨配塌：

（1）5g菠菜葉，去葉脈，剪碎放入研缽中。

（2）分別加入無水乙醇有機溶劑，要少量多次加，以利於溶解色素；加CaCO3是為了保護色素（CaCO3能中和有機酸），是因為在研磨過程中，培哪圓液泡也容易被破碎，液泡中的有機酸容易分解色素，色素被分解的多了，提取液中的色素就少了，實驗效果不明顯。加石英砂（SiO2）使研磨更加迅速。

3、過濾：不能使用濾紙，濾紙有吸水性，一般要用尼龍布或紗布，最後得到提取液。

二、光合色素的分離

1、原理：根據不同色素在層析液中溶解度不同。

2、過程

（1）制備濾紙條。

（2）用毛細玻璃管在濾紙條上劃線，應先用鉛筆劃線，再用毛細玻璃管蘸取提取液劃線，要多次反復的劃，第一次幹了，再劃第二次，要盡可能細，盡可能直。

（3）燒杯中的層析液（20份在60—90℃下分離出來的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成的）。

（4）色素分離的方法：紙層析法。

實驗目的

1、使學生了解光合作緩喊用的發現過程。

2、使學生了解葉綠體中色素的種類、顏色及其吸收的光譜；初步學習光合色素的提取方法及其在濾紙上的分布。

3、掌握光合作用的概念、實質、總反應式、光反應、暗反應的具體過程、光反應與暗反應的區別與聯系及光合作用的意義。

4、應用所學的光合作用的知識，了解植物栽培與合理利用光能的關系。