生理學實驗強度時間曲線測定裝置圖

⑴ 如圖甲表示在適宜溫度和CO2濃度條件下，光照強度對某綠色植物光合作用強度的影響曲線，圖乙表示該植物葉

（1）M點時，植物光合作用速率等於呼吸作用速率，即只有圖乙中的a₁a₄b₁b₄過程．此時細胞中合成ATP的部位有細胞質基質、線粒體、葉綠體．
（2）P點表示呼吸作用速率，其大小主要受溫度影響．
（3）突然停止光照，二氧化碳的固定速率不變，C₃還原的速率下降，導致C₃的含量增加．
（4）單位時間內二氧化碳的固定量表示真光合作用速率，等於凈光合作用速率與呼吸作用速率之和，相當於乙圖中的b₁+b₃．即0.6+0.4=1.0．
（5）根據表格可知，該實驗的自變數是光照強度．無關變數是指除自變數外，可能會影響實驗結果的因素，如二氧化碳濃度、黑藻的數量等．可以通過量筒中液體的體積變化量表示氧氣的釋放量．
（6）光照下，氧氣的釋放量表示光合作用速率大於呼吸作用速率，說明葉綠體產生的氧氣除了供給線粒體利用外，還釋放到細胞外，即a₃過程．
故答案為：
（1）細胞質基質、線粒體、葉綠體（不分順序）a₂a₃b₂b₃
（2）溫度
（3）上升
（4）1.0b₄（或b₁+b₃）
（5）光照強度CO₂濃度、黑藻量量筒中液體的體積
（6）a₃

⑵ 學校生物研究小組利用黑藻探究光照強度對光合速率的影響，設計一個實驗裝置如圖甲所示．經過對實驗結果分

（1）增加廣口瓶與冷光燈之間的距離導致光照強度減弱，短時間內光反應減弱，為暗反應提供的ATP和[H]減少，還原的三碳化合物減少，導致五碳化合物在短時間內含量下降，三碳化合物的合成量基本不變．
（2）在冷光燈提供光照的條件下，裝置甲有色小液滴向左移動，說明此時黑藻的光合作用小於呼吸作用，釋放二氧化碳被溶液吸收，導致瓶內壓強減小，液滴向左移動．
（3）已知該植物光合作用和呼吸作用的最適溫度分別為25℃和30℃．在其他條件不變的情況下，將環境溫度調節到25℃，是光合作用的最適溫度，此時光合作用速率最大．呼吸作用的最適溫度是30℃，25℃時呼吸作用速率下降，將環境溫度調節到25℃，圖乙中的A點將向左移動．
（4）光合作用的反應式是：6CO₂+6H₂O→C₆H₁₂O₆+6O₂，分析曲線圖，在恆溫30℃、光照強度達到B時，裝置甲中黑藻的葉綠體每小時釋放氧氣總量是8mg，根據光合作用的反應式，8小時固定CO₂量為44×8×8÷32=88mg．
（5）實驗探究需要遵循單一變數原則，對照原則，該實驗設計缺少對照實驗．
故答案為：
（1）下降基本不變
（2）光合作用速率小於呼吸作用速率
（3）左
（4）88
（5）缺少空白對照實驗

⑶ 某學習小組擬設計如圖1所示實驗裝置驗證Ba（OH）2溶液和H2SO4溶液發生的是離子反應（夾持儀器略去）．（1

（1）開始氫氧化鋇電離出氫氧根和鋇離子導電，隨反應進行，反應生成硫酸鋇沉澱和水，溶液中無導電微粒，燈泡熄滅，繼續加入硫酸，硫酸電離出氫離子和硫酸根導電，導電微粒的濃度越大，燈泡的亮度越大，
故答案為：燒杯中出現白色沉澱；燈泡由明變暗，直至熄滅，然後又逐漸變亮；實驗過程中燈泡的亮度發生變化，說明離子濃度發生變化，則該反應為離子反應；
（2）氫氧化鋇與硫酸反應生成硫酸鋇和水，反應的離子方程式Ba²⁺+2OH^-+SO₄^2-+2H⁺═BaSO₄↓+2H₂O，故答案為：Ba²⁺+2OH^-+SO₄^2-+2H⁺═BaSO₄↓+2H₂O；
（3）A．假設NaHSO₄為1mol，使原溶液中的SO₄^2-恰好完全沉澱，需要Ba（OH）₂1mol，則發生反應的離子的物質的量分別為1mol，離子方程式為H⁺+SO₄^2-+Ba²⁺+OH^-=BaSO₄↓+H₂O，故A錯誤；
B．1molNaHSO₄加入Ba（OH）₂溶液0.5mol至溶液顯中性，離子方程式Ba²⁺+2OH^-+SO₄^2-+2H⁺═BaSO₄↓+2H₂O，故B正確；
C．假設NaHSO₄為1mol，使原溶液中的氫離子和SO₄^2-恰好完全沉澱，需要Ba（OH）₂1mol，離子方程式為H⁺+SO₄^2-+Ba²⁺+OH^-=BaSO₄↓+H₂O，故C錯誤；
故答案為：B；
（4）導電微粒的濃度越大，燈泡的亮度越大，導電能力越強，即先減小再增大，故答案為：C．

⑷ 圖甲是採用黑白瓶法測定某池塘夏季各深度24小時內的平均氧濃度變化曲線，縱軸表示水池深度，橫軸表示瓶中

（1）當光照適宜時，水深2m處凈光合速率為1.5g/m²﹒h，由於呼吸速率為1.5g/m²﹒h，故每平方米1小時製造的氧氣總量為1.5+1.5=3（g）；水深3m處，凈光合速率為0，說明光合速率等於呼吸速率，若將白瓶從2m移到3m處，光照強度小，光反應速率減慢，故C₃的還原減弱，C₃的含量增加．
（2）光照3m時，光合速率等於呼吸速率，光合作用的光反應階段和有氧呼吸的三個階段都能產生ATP，則產生ATP的場所有葉綠體、細胞質基質和線粒體．
（3）①隨著燈泡與試管距離的增加，光照強度減弱，光合作用產生的O2減少
②隨著光合作用的進行，水中CO₂含量逐漸下降，光合作用產生的O₂減少
（4）圖乙中若用¹⁸O標記水，水和丙酮酸參與有氧呼吸第二階段，生成了含有放射性的C¹⁸O₂．
故答案為：
（1）3增加
（2）葉綠體、細胞質基質、線粒體
（3）①光照強度減弱，光合作用產生的O₂減少②水中CO₂含量逐漸下降，光合作用產生的O₂減少
（4）水和丙酮酸參與有氧呼吸第二階段，生成了含有放射性的C¹⁸O₂

⑸ 生化試劑實驗中的反應曲線怎麼看，要大白話，詳細點，謝謝謝謝

一、基本結構
（一）按照反應裝置的結構，自動生化分析儀主要分為流動式(FLOW SYSTEM)、分立式(DISCRETE SYSTEM)兩大類。

1．流動式 指測定項目相同的各待測樣品與試劑混合後的化學反應在同一管道流動的過程中完成。這是第一代自動生化分析儀。

2．分立式 指各待測樣品與試劑混合後的化學反應都是在各自的反應杯中完成。其中有幾類分支。

(1)典型分立式自動生化分析儀。此型儀器應用最廣。

(2)離心式自動生化分析儀，每個待測樣品都是在離心力的作用下，在各自的反應槽內與試劑混合，完成化學反應並測定。由於混合，反應和檢測幾乎同時完成，它的分析效率較高。

3．袋式自動生化分析儀是以試劑袋來代替反應杯和比色杯，每個待測樣品在各自的試劑袋內反應並測定。

4．固相試劑自定生化分析儀(亦稱干化學式自動分析儀) 是將試劑固相於膠片或濾紙片等載體上，每個待測樣品滴加在相應試紙條上進行反應及測定。操作快捷、便於攜帶是它的優點。

(二)典型分立式自動生化分析儀基本結構

1．樣品(SAMPLE)系統

樣品包括校準品、質控品和病人樣品。系統一般由樣品裝載、輸送和分配等裝置組成。

樣品裝載和輸送裝置常見的類型有：

(1)樣品盤(SAMPLE DISK)，即放置樣品的轉盤有單圈或內外多圈，單獨安置或與試劑轉盤或反應轉盤相套合，運行中與樣品分配臂配合轉動。有的採用更換式樣品盤，分工作和待命區，其中放置多個弧形樣品架(SECTOR)作轉載台，儀器在測定中自動放置更換，均對樣品盤上放置的樣品杯或試管的高度、直徑和深度有一定要求，有的需專用樣品杯，有的可直接用采血試管。樣品盤的裝載數，以及校準品、質控品、常規樣品和急診樣品的裝載數，一般都是固定的。這些應根據工作需要選擇。

(2)傳動帶式或軌道式進樣 即試管架(RACK)不連續，常為10個一架，靠步進馬達驅動傳送帶，將試管架依次前移，再單架逐管橫移至固定位置，由樣品分配臂采樣。

(3)鏈式進樣試管固定排列在循環的傳動鏈條上，水平移動到采樣位置，有的儀器隨後可清洗試管。

分配加樣裝置大都由注射器、步進馬達或傳動泵、加樣臂和樣品探針等組成，①注射器(SYRINE UNIT)。根據注射器直徑和活塞移動距離的多少，定量吸取樣品或試劑。它的精度決定加樣的精度，一般可精確到1微升。注射器漏液時，首先考慮是否探針堵塞，其次是注射器活塞磨損等。有的加液系統採用容積型注射泵和數控脈沖步進馬達，提高精度。②樣品探引(PROBE)與加樣臂相聯，直接吸取樣品。探針均設有液面感應器，防止探針損傷和減少攜帶污染。有的設有阻塞檢測報警系統當探針樣品中的血凝塊等物質阻塞時．儀器會自動報警沖洗探針，並跳過當前樣品，對下一樣品加樣。有的還有智能化防撞裝置遇到阻礙探針立即停止運動並報警。即使如此，它仍是非正規操作時的易損件。為了保護探針，除預先需要根據樣品容器的高低、最低液面高度等進行設置外、，樣品容器的規格、放置以及液面高度等設定條件不得隨意改變。在某些儀器上，采樣器和加液器組合在一起，加樣品和加試劑或稀釋液一個探針一次完成。③加樣臂。連接探引，在樣品杯(試劑瓶)和反應杯之間運動，完成采樣和加樣(加試劑)。它的運動方式，與儀器工作效率及工作壽命有一定關系。④閥門用以決定液體流動方向。⑤稀釋系統。對樣品進行預稀釋、過後稀釋或加倍，對標准原液系列稀釋等。不同儀器的稀釋方式有所差異，要注意識別。試劑系統亦有稀釋功能：

2.試劑(REAGENT)系統一般由試劑儲放和分配加液裝置組成。

(1)試劑倉常與試劑轉盤結合在起。多數儀器將試劑倉設為冷藏室，以提高在線試劑的穩定期。

(2)分配加液裝置(DISPENSE UNIT)。與樣品系統的類似。，試劑探針常常可以對試劑預加溫，雙試劑系統的試劑2(R2)探針起始量宜較下，以便配合不同R1/R2比例的試劑。

(3)試劑瓶(BOTTLE)。有不同的形狀及大小規格。如 COBAS MIRA PLUS儀有4、10、15、35ML等規格，瓶底呈凹形，OLYMPUS AU600儀有30和60ML兩種；日立7060儀有20、50、100ML三種等規格。應根據工作量和試劑規格．考慮試劑瓶殘留死體積和更換頻率，合理選用。獨特設計的卡式試劑盒，體積小，防蒸發，方便儲存。

(4)配套試劑常有條形碼，儀器設有條形碼檢查系統，可對試劑的種類、批號、存量、有效期和校準曲線等貨剌，進行核對校驗，如BECKMANCX7等。

(5)試劑瓶蓋自動開關系統，更有利於試劑保存。有的儀器可在運行中添加，更換試劑，有的則須在暫停狀態進行。

3.條形碼(BARCODE)識讀系統

一般由掃描系統、信號整形和解碼器三部分組成。掃描系統以光源掃射黑條白空相間的條碼符號由於條和空對光的反射不同、不同寬窄的條符反射光持續時間不同，產生強度不同的反射光．再經光電轉換元件接收並轉換成相應強度的電信號，最後通過信號整形，由解碼器解譯。系統自動識別樣品架及樣品編號識別試劑、校準品及其批號、失效期，有的並可識別校驗校準曲線等信息。

實驗室常用條形碼類型有CODE 39、CODE 128、2 OF 5 STANDARD、INTERLEAVED2OF 5等。要自編樣品條形碼需要條形碼輸入器，條形碼閱讀系統與條形碼要匹配。已有全自動試管分配暨條形碼粘貼准備系統。

4．反應系統

(1)反應盤裝載一系列反應比色杯（CUVETTES）,多為轉盤形式。反應測定過程中按固定程序，在加樣臂、加液臂、攪拌棒、光路和清洗裝置之間轉動。有的儀器在反應杯中完成反應後再吸入比色杯比色，現在更常見反應和檢測同在比色杯中進行，效率更高，尤其適於連續監測法。比色杯多採用硬質石英玻璃、硬質玻璃、無紫外光吸收的丙烯酸塑料等，使用壽命不一。DIMENSION系列的比色杯在機器內自動製造，自動封口，免沖洗，無污染。流動池式主要在小型分析儀用。容積一般幾十微升，但抽液管道佔用較多反應液，多樣品連續使用，增加交叉污染機會。

蠕動泵(PUMP)。半自動生化儀需要蠕動泵抽吸反應液進人流動比色池作測定。要求定期對蠕動泵校準，即通過吸人定量的水來檢驗泵的吸液量是否准確。一般均設有泵校準功能。

(2)混合裝置(MIXING UNIT) 如採用多頭迴旋攪拌棒(二頭雙清洗式攪拌系統)。攪拌棒常具特氟隆不粘塗層，避免液體粘附。

(3)溫控裝置生化分析儀通過恆溫控制裝置來保持孵育溫度的調控和恆定也是由計算機來控制的，理想的孵育溫度波動應小於±01℃。保持恆溫的方式有三種。①空氣浴恆溫：即在比色杯與加熱器之間隔有空氣。空氣浴恆溫的特點是方便、速度快、不需要特殊材料，但穩定性和均勻性較水浴稍差。羅氏(ROCHE)的COBAS和0LYMPUS AU2700系統採用的就是空氣浴恆溫模式。②水浴循環式：即在比色杯周圍充盈有水，加熱器控制水的溫度。水浴恆熱的特點是溫度恆定，但需特殊的防腐劑以保證水質的潔凈，且要定期更換循環水。日立系統生化分析儀採用的即是水浴循環恆溫裝置。⑧恆溫液循環間接加熱式：結構原理是在比色杯周圍流動著一種特殊的恆溫液(具無味、無污染、惰性、不蒸發等特點)。比色杯和恆溫液之間有極小的空氣狹縫，恆溫液通過加熱狹縫的空氣達到恆溫，其溫度穩定性優於乾式，和水浴式循環式相比不需要特殊保養。

5．清洗(WASH)系統

探針和攪拌棒採用激流式等方式自動沖洗。清洗裝置一般由吸液針、吐液針和擦拭刷組成。清洗工作流程為吸出反應一吸於一注入純水一吸干一擦乾。清洗液有鹼性和酸眭兩種。一般說來，在吸出反應液後，儀器先用鹼性液沖洗，再用酸性液沖洗，最後用去離子水沖洗三遍。擦拭刷的功能是吸去杯壁上掛淋的水，刷體內部有負吸裝置。使用進程中要注意擦拭刷是否磨損。

值得注意的是，對於常規沖洗還不能清除交叉污染(CARRY—OVER)的實驗要特別處理，以減少交叉污染或攜帶污染。例如，膽固醇測定試劑中的膽酸鹽對血清總膽汁酸的測定有干擾，在消除交叉污染的程序中，可輸入程序，指令總膽汁酸不在測試膽固醇的比色杯中進行測定，如不能避開，儀器則對比色杯進行特別沖洗，防止發生交叉污染。

沖洗水的水溫自動控制到與恆溫反應槽溫度相近，保證反應系統的恆溫，並增加去污力。急診測定後採用針對性清洗，似乎比採用固定的全面清洗程序更有效率更經濟。耗水量儀器間相差較大。

ABBOTT AEROSET 自動生化分析儀等系統具有自動清洗功能(SMART WASH)和最佳標本順序選擇功能(OSS)。即儀器根據試劑或樣品間交叉污染的項目組合，自動改變檢測順序，避免互有影響的分析項目；確實無法迴避時，則採用選定的特殊清洗劑作自動清洗。

6．比色系統

(1)光源多數采有鹵素燈，工作波長為325～800NM。鹵素燈的使用壽命較短，一般只有1 000～L 500小時。當燈的發光強度不夠時，儀器會自動報警，應及時更換，部分生化分析儀採用的是長壽命的氙燈，24小時待機可工作數年，工作波長285-750NM。

(2)比色杯 自動生化分析儀的比色杯也是反應杯。比色杯的光徑0.5～0.7 CM不等，通常為石英或優質塑料。光徑小的省試劑，當比色杯光徑小於1 CM時，部分儀器可自動校正為1CM。生化分析儀的比色杯自動沖洗裝置在儀器完成比色分析後做自動反復沖洗、吸乾的動作，比色杯在自動檢查合格後繼續循環使用。要及時更換不合格的比色杯。如採用的是石英比色杯，比色杯要定期檢查清洗。

(3)單色器與檢測器各類自動生化分析儀應用的是可見一紫外吸收光譜法，即監測200-700NM光區某特定波長下發色基團吸光度的變化，輔以微機軟體系統的計算來完成測定。可見一紫外吸光譜定量的基礎是LAMBER—BEER定律。

傳統的分光度測定普遍採用前分光，即在光源燈和樣品杯之間先要用濾光片、棱鏡或光柵分光，通過可調的狹縫，取得與樣品「互補」的單色光之後，照射到樣品杯，再用光電池或光電管作為檢測器，測定樣品對單色光的吸收量(吸光度)。

而現代大多生化分析儀採用後分光測量技術。後分光測定：將一束白光(混合光)先照到樣品杯，然後再用光柵分光，同時用一列發光二極體排在光柵後面作為檢測器。後分光的優點是不需移動儀器比色系統中的任何部件，可同時選用雙波長或多波長進行測定，這樣可降低比色的雜訊，提高分析的精確度和減少故障率。

生化儀的單色器即分光裝置，有干涉濾光片和光柵分光兩類。干涉濾光片有插入式和可旋轉的圓盤式兩種。插入式就是將需用的濾光片插入濾片槽中，圓盤式是將儀器配備的濾光片都安裝在圓盤中，使用時旋轉至所需濾光片處即可。干涉濾光片價格便宜，但易變潮霉變，從而影響檢測結果的准確性，半自動生化分析儀多採用此種濾光片。

光柵分光可分為全息反射式光柵和蝕刻式凹面光柵兩種。前者是在玻璃上覆蓋一層金屬膜後製成，有一定程度的相差易被腐蝕；後者是將所選波長固定地刻制在凹面玻璃上，耐磨損、抗腐蝕、無相差。全自動生化分析儀多採用光柵分光。

7．程序控制系統

計算機是自動生化分析儀的大腦，標本、試劑的注加和識別，條碼的識別，恆溫控制，沖洗控制，結果列印，質控的監控，儀器各種故障的報警等都是由計算機控制完成。儀器一代勝過一代，自動化程度越來越高，有的儀器甚至可以完成部分日常保養程序。自動生化分析儀數據處理功能日趨完善，如：反應進程中吸光度，各種測定方法，各種校準方法室內質控結果的統計等，生化儀都可進行處理。計算機還可以調看病人的數據、儀器的性能指標、儀器的運行狀態等。自動生化儀中的質控和病人結果還可通過儀器計算機與實驗室信息系統(LIS)的對接進行網路管理。

程序控制器是系統的硬體部分。它主要包括：

(1)微處理器和主機電腦。用於儀器各個單元和總體控制，應具有程式控制操作、故障診斷、多種數據處理和儲存等強大功能。一般根據儀器功能的需要和電腦硬體市場的主流產品來配置。

(2)顯示器(CRT MONITOR UNIT)。通常用鍵盤、滑鼠、觸摸屏等方式進行操作。

(3)系統及配套軟體。多採用WINDOWS-NT或WINDOWS界面，具全圖形化設計，多菜單選擇，信息導引，故障報警，幫助提示，人機「對話」，方便直觀，不少儀器有即時反應曲線顯示。

(4)通過RS 232 C等數據介面與其他計算機、列印機等設備傳輸數據。具人工智慧雙向通訊系統(HOST QUERY)，儀器可直接自行向主電腦詢問病人／樣品基本資料及檢測項目。有的具遠程通訊及監控功能，可遙控遠處測試及維修檢查，實現網路工作。

自動生化分析儀均採用程序控制的自動分析。分析程序一經確定，工作時只要簡單地輸入測定項目或編碼，儀器即可按編製程序自動完成測定、計算和報告。具體的控製程序因儀器而異，一般分為固定程序和自編程序兩種。固定程序為儀器廠家預先設定，常與指定試劑配套；有的不能更改，有的也可由用戶修改。它與配套試劑一同使用時，既方便工作，質量也比較可靠，但成本較高。自編程序靈活實用，便於開發新項目，強調程序的靈活性。比如，成批測定過程中應可隨時插入急診標本測定而不打亂原有程序；單個急診標本測定操作簡捷、消耗少，可靈活預稀釋或重復測定。

二、儀器一般工作流程

生化分析儀的正確應用，只是掌握了測定技術原理還不夠，還需要對具體儀器的工作流程及測定計算方法有足夠的了解。

(一)一般工作流程

工作流程可以通過儀器的測定周期來考察。重點關注比色杯空白讀數點(CB)、加樣品點（S）、各試劑加液點(R1、R2、……)、試劑空白讀數點(RB)、各測定讀數點(P)、各點時間間隔及周期總時間等。每個儀器一般都在反應轉盤的固定位置和反應測定周期的固定時間設置樣品試劑和稀釋的加液位，以及測定讀數點。如HITACHI 7170在P1到P34周期為10分鍾時，PO前加樣品，RL在PL前，R2在P5和P6間，R3在P16和P17間，R4在：P33和P34間。

(二)數據處理計算方法

儀器在各個吸光度讀數點讀取的吸光度數據，並不一定都納人濃度計算。儀器往往根據儀器定義和操作者設定的要求，對吸光度原始數據作計算處理，轉換成所謂反應數據，再按系數或公式作濃度計算。舉例如下：

1．HITACH 7170的終點法測定點(A )吸光度計算為(AX+AX－1)／2。實際吸光度=吸光度數據×10 000。

2．0LYHPUS AU 600試劑空白數據：P0點試劑空白(RB)=P0點吸光度一比色杯水空白(WB)；任一測定點試劑空白(RB )。該點吸光度一比色杯水空白(WB)。

3．MONARCH 1 000兩點終點法的反應數據。(終點測定吸光度一終點空白吸光度)一(始點測定吸光度一始點空白吸光度)。

4．AU 600的終點法(帶試劑空白，END法)的反應數據=終點吸光度一P0點吸光度(試劑空白，RB)。終點法(不帶試劑空白，END)．法)的反應數據=終點吸光度-比色杯水空白(WB)。

5．AU 600的兩點法(自身空白)的反應數據=[加第二試劑後測定點讀數一P0點讀數]一[加第二試劑前測定點讀數一PO點讀數]。

三、主要操作程序

(一)儀器運行前操作程序

主要進行儀器的基本設置：

L．試驗項目設置對試驗名稱、編碼，試驗組合(PROFILE)、試驗輪次(ROUND)，必要時包括試驗順序等設置。

2．各試驗的參數設置包括試驗間比值、結果核對等參數的設定。

3．劑設置根據有關試驗參數，設置各試驗的試劑位、試劑瓶規格，必要時設定試劑批號、失效期等。

4．校準品設置對校準品的位置、濃度和數量等進行設置。

5．質控設置 根據質控要求。設置質控物個數，質控規則，質控項目及相應質控參數等。

6．樣品管設置 包括樣品管類型，殘留液高度（死體積），識別方式等設置。

7．其他設置對數據傳輸方式、結果報告格式、復查方式及復查標准等設置。

(二)常規操作程序

開機(預熱、保養)-設置開始條件(日期時間索引、輪次、樣品起始號等)-根據需要，申請校準、質控和病人測定項目(包括架號、杯號或順序號。測定中可繼續申請)_裝載校準品、質控物和病人標本-裝載試劑-核對儀器起始狀態（未應用條碼系統，採用順序識別樣品時，尤其要核對測定起始編號是否與樣品架號和申請號相符）-定標和質控測定-檢查定標和質控結果-病人標本測定-測定過程監控（試劑檢查，觀察分析結果，編輯校正）-數據傳遞（列印報告，向檢驗管理系統傳輸，包括工作量統計、財務統計、病人情況追蹤、質控分析等)。測定後保養。

(三)測定結果檢查分析

1．要了解和熟悉儀器的各種警示符號的含義與作用在正確設定參數的前提下，利用各種警示符能提高 們發現問題和解決問題的效率。

2．要熟悉和靈活運用儀器的相關操作屏(界面) 如：用反應過程監測(REACTION MONITOR)，觀察反應時間進程曲線；用校準追蹤(CALIBRATION TRACE)回顧分析校準曲線；利用統計(STATISTICS)了解不同日期段病人測定均值及數據分析；運用分析數據編輯(DATA EDIT)察看和校正測定數據。

3．校準的檢查要充分利用儀器設置的功能，監測校準曲線圖形、各校準點吸光度值(不能忽略試劑空白值及空白速率值)、計算K值等的波動情況，以及與以往的比較。必要時，應進一步檢查反應時間進程曲線。必須結合質控數據來把握實驗條件。

4．病人結果的檢查除了目測觀察或用血清指數了解標本性狀，注意和了解臨床資料及診斷外，學會分析反應時間進程曲線及數據是重要的基本功。

四、基本測定方法

(一)終點法(END POINT METHOD)

根據反應達到平衡時反應產物的吸收光譜特徵及其吸光度大小，對物質進行定量分析的方法。對一般化學反應來說，反應完全(或正、逆反應動態平衡)、反應產物穩定時為反應終點。對抗原一抗體反應來說，是抗原和抗體完全反應、形成最大且穩定的免疫復合物時為終點。在反應時間進程曲線上為與X軸平行線區段。在測定計算方式上，一般分為一點法和兩點法兩種。

1．一點法(ONE POINT) 以試劑和樣品混合之前的空氣空白(GB)、水空白(WB)或試劑空白(RB)的吸光度值為測定計算基點，以反應終點的吸光度讀數減去空白讀數，得到反應吸光度。通過與相同條件下校準液反應吸光度的比較，求得測定結果。常與一點校準法配合使用，即採用一個校準濃度，校準曲線通過零點且成線性。也應用多點校準。

2．兩點終點法(TWO POINT END)即終點一始點法 以試劑和樣品混合之後的某一時間點作為始點，以反應終點的吸光度讀數減去始點讀數。一定條件下可降低樣品對反應或反應本身的特異性於擾(主要指色度干擾)。常採用雙試劑，多以加R2前某一點作測定始點；某些情況下，也可以加R2後一點作測定始點。若使用單試劑，主反應啟動太快或儀器起始讀數點受限時難以運用。

固定時間法(FIXED METHOD)與兩點終點法的區別只是在：測定讀數的末點不在反應平衡區段，而是根據方法學選擇。如血清肌酐(苦味酸法)測定。

3．三點終點法 即雙終點法，在一個通道內一次進行兩項反應相關的終點法測定。比如同測游離脂肪酸和甘油三酯。某些儀器(如HITACHI系列)設置此方法。

(二)連續監測法(CONTINUOUS MONITORING METHOD)

又稱速率法(RATE ASSAY)。即連續監測反應過程，根據所測定的產物生成或底物消耗的速度進行定量分析的方法。在反應時間進程曲線上為反應呈恆速區段(斜率保持不變)，常用於酶活性線性反應期測定。

1．連續監測法即零級反應速率法，亦稱斜率法。在較長的反應時間區段內(至少90-120秒)，每隔一定時間(常為2~30秒)讀取一次吸光度值，至少讀取4點，得到3個△A；一般將連續多次讀數作最小二乘法處理，讀數間隔時間太短的作帶速率時間(TR)多點法處理，均取線性反應部分的讀數，求出單位時間內的反應速率△A/MIN。此法必須以零級反應為測定計算的基礎，因為只有在零級反應下，單位時間內的吸光度變化(反應速率△A/MIN)才與酶活力呈正比。此法相對減少了分析誤差，大大提高了分析速度和准確性。但是，半自動生化分析儀採用單樣品連續監測，相當耗時。應用連續監測法，首先應准備線性范圍內的高、中、低濃度的樣品，分別作反應時間進程曲線，了解不同濃度下反應全過程，兼顧確定延遲時間和線性監測期。

2．兩點速率法即所謂擬一級速率法。在反應中選取兩時問點T 1、T 2，讀取吸光度A 1、A2，計算(A2-A1)，(T2-T1)=△A，△T。此方法與終點兩點法的區別主要有兩點：後一讀數點反應未達終點，以速率計算結果。它與連續監測法比較，缺點在於人為確定T 1、T 2，不定因素較多，不能保證反應在T 1-T 2期間呈線性，影響結果准確性；應在常規測定前，先做預試驗來確定線性時間段。若在選擇的時間段內反應不成線性(如零級反應期短，儀器無法設置或測定)，則只能改用終點法。優點在於方法簡單；酶活力較低、測定吸光度值較小時，可增加測定時間段而不受儀器連續監測時間點的局限，減少讀數誤差。

3．速率B法在一個通道內一次進行兩項反應相關的速率法測定。它既可以是兩項試驗測定，也可用於干擾或／及樣品空白自動補償0後一用途的原理是：利用儀器的微機自動處理，在第一反應(干擾反應)一直維持線性的前提下，可以從第二反應(主反應)速率中扣除第一反應速率的延續影響。如用於消除膽紅素轉化為膽綠素吸光度下降、對肌酐苦味酸法測定的負干擾等。某些儀器(如HITACHI系列)設置此方法。

(三)空白(BLANK)校正

在分光光度法中，常利用空白溶液來調節儀器的吸光度零點，或用來抵消某些測定的干擾因素。在生化分析儀測定中，除了採用雙或多波長、兩點法等排除背景干擾外，常要運用專門空白測定，以便從樣品測定吸光度中扣除其影響。正確選擇空白校正，對提高准確度起重要作用。

1．試劑空白一般在方法類型和校準模式中，即分為有或無試劑空白兩大類。試劑空白單獨測定或與校準配合測定，並需預選裝載去離子水樣品杯或試劑空白架。校準或病人樣品的各測定點吸光度，均要扣除相應測定點的試劑空白吸光度或空白速率值。無試劑空白的方法，多直接以反應杯的水空白作為測定基準值。

在不少儀器中，試劑空白測定類似校準測定，並非在病人樣品測定時實時測定。所以，要注意它的測定頻率，避免因試劑批號或質量的變化造成試劑空白的改變引起的計算誤差。

2.樣品空白 主要為了消除樣品本身混濁或色度的干擾。常採用空白通道法，測定校正結果=顯色反應通道結果-空白通道結果。多數儀器須另外佔用測定通道，分析速度減半，但去干擾的准確性應高於兩點終點
參考資料：
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⑹ 二氧化碳吸收的24小時曲線圖

（1）氣孔是植物體與外界進行氣體交換的「窗口」，因此植物體吸收和釋放二氧化碳主要是通過葉片上的氣孔完成的．
（2）「觀察曲線可知」，AB段的二氧化碳濃度逐漸升高（填「升高」或「降低」），這是植物進行呼吸作用的結果．
（3）BE段二氧化碳的濃度逐漸降低（填「升高」或「降低」）j是由於這段時間有光，植物進行光合作用，植物吸收的二氧化碳多於（填「多於」或「少於」）釋放的二氧化碳．
（4）裝置內二氧化碳濃度最低的時間點約為18時，二氧化碳濃度的變化曲線可說明植物對維持空氣中的碳一氧平衡有重要作用．
故答案為：（1）氣孔    
（2）升高；呼吸
（3）降低；光；光合；多於
（4）18；碳一氧

⑺ 在適宜的條件下，測定光照強度對植物光合作用速率的影響．下圖甲表示實驗組的裝置，圖乙表示在不同光照強

（1）圖甲中的植物進行光合作用，需要光合作用的原料二氧化碳，圖中B裝的是碳酸氫鈉，目的是為植物進行光合作用提供二氧化碳；根據圖乙，在光照強度為2千勒司的時候，氧氣既不吸收也不釋放，說明光合作用強度等於呼吸作用強度，所以圖甲內的氣體的體積不會增加，液面不移動．
（2）在光照強度為4千勒司的時候，凈光合作用強度為6mgO₂/100cm²葉片?小時，根據光合作用的方程式可知：每100cm²葉片每小時有機物（假設產物是葡萄糖）增重：180×6÷（6×32）≈5.6mg．
（3）在F點和F點以後，在增加光照強度，光合作用強度不再增加，所以光照強度不再影響光合作用強度，影響因素可能是CO₂濃度、溫度等．
（4）若圖甲中的葉片過密，導致呼吸作用增大，所以圖乙中的曲線整體下移．
（5）在B瓶中加入離體的葉綠體為實驗材料後，植物不再進行呼吸作用，而植物真正的光合作用強度=凈光合作用強度+呼吸作用強度，在光照強度為8Klx時，每100cm²葉片每小時氧氣為12mg+6mg=18mg．
（6）將該植物葉片從光下移到黑暗中，光反應停止，[H]和ATP減少，則三碳化合物的還原減弱，導致三碳的消耗減少，而三碳的合成不變，所以葉綠體中C₃化合物含量短時間內的變化上升．
故答案為：（1）碳酸氫鈉（或Na₂CO₃）；不變（或液面等高）
（2）5.6mg（保留1位小數）
（3）CO₂濃度、溫度等（回答一種即可）
（4）向下．
（5）18mg
（6）上升

⑻ 生理學實驗設計~~~急求

家兔動脈血壓的神經和體液調節
【目的】

本實驗採用直接測量和記錄動脈血壓的急性實驗方法，觀察神經和體液因素對動脈血壓的調節作用。

【原理】

在生理情況下，人和其它哺乳動物的血壓處於相對穩定狀態，這種相對穩定是通過神經和體液因素的調節而實現的，其中以頸動脈竇－主動脈弓壓力感受性反射尤為重要。此反射既可在血壓升高時降壓，又可在血壓降低時升壓，反射的傳入神經為主動脈神經與竇神經。家兔的主動脈神經為獨立的一條神經，也稱減壓神經，易於分離和觀察其作用。在人、犬等動物，主動脈神經與迷走神經混為一條，不能分離。反射的傳出神經為心交感神經、心迷走神經和交感縮血管纖維，心交感神經興奮，其末梢釋放去甲腎上腺素，去甲腎上腺素與心肌細胞膜上的b受體結合，引起心臟正性的變時變力變傳導作用，心迷走神經興奮，其末梢釋放乙醯膽鹼，乙醯膽鹼與心肌細胞膜上的M受體結合，引起心臟負性的變時變力變傳導作用，交感縮血管纖維興奮時釋放去甲腎上腺素，後者與血管平滑肌細胞的a-受體結合引起阻力血管的收縮。

本實驗應用液壓傳遞系統直接測定動脈血壓。即由動脈插管、測壓管道及壓力換能器相互連通，其內充滿抗凝液體，構成液壓傳遞系統。將動脈套管插入動脈內，動脈內的壓力及其變化，可通過密閉的液壓傳遞系統傳遞壓力，通過壓力換能器將壓力變化轉換為電信號，用微機生物信號採集處理系統記錄動脈血壓變化曲線。

【預習要求】

1．儀器設備知識 參見第二章第三節 RM6240微機生物信號採集處理系統（或第四節PcLab和MedLab微機生物信號採集處理系統）。

2．實驗理論 實驗動物知識參見第三章第一節 生理科學實驗常用實驗動物的種類；第四章第一節 動物實驗的基本操作、第四節 實驗動物手術；統計學知識參見第5章第四節 常用統計指標和方法；生理學教材有關動脈血壓的調節。檢索全文資料庫中的相關研究論文，檢索方法參見第五章第五節。

3．預繪制實驗原始數據記錄表格和統計表格。

【材料】

家兔，動脈插管，血壓換能器，生物信號採集處理系統，200g/L氨基甲酸乙酯，1000U/ml的肝素，0.1g/L去甲腎上腺素，10-2g/L乙醯膽鹼。

【方法】

1．實驗系統連接及參數設置

（1）頸動脈血壓測量記錄裝置。將血壓換能器固定於鐵支柱上，其位置應與心臟在同一平面。

（2）壓力換能器輸出線接微機生物信號處理系統第4通道（亦可選擇其它通道）。微機生物信號處理系統參數設置：

① RM6240系統：點擊「實驗」菜單，選擇「循環」或「自定義實驗項目」菜單中的「兔動脈血壓調節」。系統進入該實驗信號記錄狀態。儀器參數：4通道時間常數為直流，濾波頻率100Hz，靈敏度12Kpa，采樣頻率800Hz，掃描速度 500ms/div。連續單刺激方式，刺激強度5~10V，刺激波寬2ms，刺激頻率30 Hz。

② PcLab和MedLab系統：點擊「文件」菜單「打開配置」中的「動脈血壓記錄」項目。系統進入該實驗信號記錄狀態。儀器參數：1通道放大倍數200、直流（DC）耦合，采樣間隔1ms；串刺激方式，波寬2ms，刺激強度5~10V，時程1s，頻率30 Hz。

（3）血壓換能器定標 為定量記錄血壓及血壓變化的幅度，測量系統需在記錄之前定標。定標方法：在見圖7-16-1中，三通連接水銀檢壓計和充以生理鹽水的注射器，打開彈簧夾使與大氣相通，儀器開始記錄，並將通道基線調至與零線重合。注射器緩慢注水，排盡空氣，夾上彈簧夾。繼續注水，使水銀檢壓計壓力達到24.0Kpa（180mmHg）。保持采樣一段時間，打開微機生物信號處理系統定標（單位修正）對話框，輸入水銀檢壓計指示的壓力值。實驗過程中不能改變定標數值。

實驗室一般情況下已將儀器和血壓換能器系統進行了定標，無須再定標。

2．手術准備（參見第四章第一節 動物實驗的基本操作、第四節 實驗動物手術）

（1）家兔稱重後，氨基甲酸乙酯按1g/kg體重的劑量於耳緣靜脈注射麻醉。注意麻醉劑不能過量，注射速度不宜過快。

（2）動物仰卧固定縛於手術台上，固定四肢，前肢交叉固定，用棉繩鉤住兔門齒，將繩拉緊並縛於兔台鐵柱上。

（3）暴露頸部氣管、頸總動脈、頸靜脈、迷走神經和減壓神經。用玻璃分針仔細分離右側上述神經，穿細絲線。分離兩側頸總動脈和兩側頸靜脈，各穿一線備用。

（4）給動物靜脈注射肝素，劑量為1000u/kg體重。等1分鍾後再進行下一步驟，以使肝素在體內血液中混合均勻。

（5）頸總動脈插管 左頸總動脈遠心端結扎，近心端用動脈夾夾住，並在動脈下面預先穿一絲線備用。用眼科剪在靠近結扎處動脈壁剪一「V」字形切口，將動脈套管向心方向插入頸總動脈內，扎緊固定。打開動脈夾。

【模擬實驗操作方法】

1．模擬實驗窗口（圖6-2-7） 家兔頸部動脈插管用三通壓力換能器與水銀檢壓計相連，水銀檢壓計指示動脈血壓，家兔呼吸運動用其腹部動畫展現，並與模擬記錄儀記錄的血壓曲線二級波同步。

2．手術刀 滑鼠點擊手術刀並拖動至家兔頸部釋放，啟動動脈插管錄像，動脈插管錄像結束，記錄儀描記動脈血壓曲線。滑鼠點擊手術刀並拖動至家兔頸部手術放大圖的神經上方釋放，切斷神經。

3．模擬三道記錄儀 第一道記錄動脈血壓曲線，第二道記錄心率，第三道記錄實驗項目標記。模擬記錄儀面板設靈敏度、位移、紙速調節按鈕，面板設數字顯示框，分別顯示記錄儀第一道靈敏度、動脈血壓、心率、實驗項目。

4．刺激器 打開電源開關後，滑鼠器點擊刺激電極拖動至家兔頸部手術放大圖的神經上方釋放，釋放位置不同、可分別產生刺激迷走神經中樞端、迷走神經末梢端、主動脈神經中樞端、主動脈神經末梢端引起的動脈血壓變化。

5．注射器 滑鼠器點擊注射器拖動至家兔耳部上方釋放，向輸入框輸入葯品劑量，點擊確定，葯品從家兔耳緣靜脈注入。動脈血壓因葯物作用而發生變化，葯品劑量1:10000 去甲腎上腺素 0.3ml。

6．測量按鈕 按測量按鈕，模擬記錄儀顯示所做實驗項目的實驗曲線，模擬記錄儀面板按鈕變為圖標按鈕，有放大、縮小、壓縮、擴展、定點陣圖標按鈕，分別可使模擬記錄儀內的實驗曲線縱向放大或縮小，橫向壓縮或擴展，定點陣圖標按鈕可使所選記錄曲線處的位置移到模擬記錄儀左邊框。

7．測量狀態 在測量狀態下，滑鼠器在模擬記錄儀內移動，可對實驗曲線進行測量，並從模擬記錄儀的面板數字顯示框「血壓」和「Time」中讀出血壓值和心動周期時間。在曲線上點擊，可測量相對值。拖動模擬記錄儀面板上的滾動條，可使實驗曲線左右滾動，顯示前後實驗數據曲線。

⑼ 植物的光合作用和呼吸作用強度可以用單位時間內呼吸或釋放二氧化碳的量來表示．圖甲曲線表示在恆溫30℃時