柱色譜實驗裝置圖簡約

㈠ 做柱色譜時，為什麼待分離物質要與吸附劑混勻

在這個實驗中 硅膠是吸附劑 你若不加吸附劑硅膠 兩種物質會一起流出來 不會分離
這個實驗的原理是不同物質在吸附劑下的吸附脫附速率不一樣 當吸附劑足夠多距離長 物質會在流動相中產生速度差與距離差 會使物質分離。
舉例子理解 當堵車時 ，同一路口不同的車道中的車開始位置相同 可能不同車道堵得不一樣 最終兩車會在下一路口會產生距離。硅膠就相當於這裡面的其他車 可能不恰當 有助於你理解

另外你補充的是拌粉，這個我也不理解 我們實驗室中用硅膠分離物質，一般來說，是將兩種或多種物質 選擇一種合適的溶劑 這兩種物質在流動相中與吸附劑中的分配比例不同 最終實現分離。覺得原理類似。可能你的這個直接選擇填充吸附劑跟要分離的物質吸附 直接加入流動相即可 我們的是流動相中溶解著要分離的物質 我覺得這樣不拌粉也能分離

㈡ 制備色譜如何用

yun0145(站內聯系TA)那位高手幫幫忙！！！whate0545(站內聯系TA)制備薄層色譜使用薄層色譜板進行制備分離，從混合物中提取所需要的單體。與常用的柱色譜相比，具有簡單、快速與節省溶劑與人力的優點，是實驗室比較常用的制備方法之一，比較常用的是制備薄層板色譜、制備離心薄層色譜、制備干柱薄層色譜三個類別。
1、 制備薄層板色譜
制備板：一般使用200X200mm的薄層色譜板，吸附劑厚度最好為0.5~1mm，一般不超過2m，平均1mm厚需要的硅膠量為15~20g。為了得到低成本、鋪層均勻的高質量制備薄層板，建議使用上海科哲公司的TD-II型全自動制備薄層鋪板機。
點樣：制備薄層分離的樣品量大，一般採用條帶點樣、不使用圓點點樣；一般1mm厚的硅膠最大約100mg，樣品濃度不宜太稀，應在2~10%為宜。為了得到均勻而規則的點樣結果，建議使用上海科哲公司的SP-3型電動薄層條帶點樣器。同時展開劑的用量比較大，點樣位置要比較高
展開：薄層色譜層析缸要充分飽和，如制備板數量較多，請選用上海科哲公司的制備薄層板架；
顯色：一般使用紫外燈或碘蒸汽等非破壞方式顯色，或在板邊緣進行化學試劑顯色；
回收：將檢測到的樣品連同硅膠一齊刮下，防入砂芯漏斗，使用適當溶劑將組分洗脫，將洗脫溶劑蒸干即可。一般希望洗脫溶劑沸點較低，不與組分發生反應。
制備薄層板色譜優點是使用最為方便、便宜、節省人力，缺點是分離時間較長。
2、 制備離心薄層色譜
與普通制備板有三個不同點：
首先：色譜板是圓的，是徑向色譜，分離能力優於方板；
其次：洗脫液的流動不靠毛細現象，靠離心力，減少了分離時間與脫尾，分離效能很高；
最後：洗脫液是連續流動的，可以非常容易的形成梯度，並且不需要刮下吸附層，這樣可以使色譜板可以反復使用；
所以，制備離心薄層色譜的分離效能與分離速度要遠高於制備薄層板色譜，建議採用上海公司科哲公司的KH-CTLC型制備離心薄層色譜儀。
3、制備干柱薄層色譜
可以看作棒狀的薄層色譜，優點是簡單易行，快速經濟、制備量大。缺點是必須使用可透紫外的管材，而且在收集樣品時要割斷管材，使費用略高。上海科哲公司提供專用的薄層色譜柱。本方法與真空系統聯用，構成減壓真空色譜，性能會得到進一步提升。
這三種不同的方法在不同場合都擁有自己的優勢，總的來講，制備薄層板色譜適用於制備量較小、分離程度較好的場合；制備離心薄層色譜適用於制備量中等，分離程度較差的場合；制備干柱薄層色譜用於大量樣品制備的場合。三種設備如果互相聯用，分離效率會進一步提高。這三種設備也可與柱色譜聯用yun0145(站內聯系TA)非常感謝，很有用。wszyq1985(站內聯系TA)樣品量大的話，可以用硅膠住層析；如果樣兩很少，則制備色譜user53900(站內聯系TA):)制備薄層色譜，說起來是相當的簡單，呵呵我說說我自己的經驗
我上個項目就是提純分離，考慮到這個制備薄層，結果就用了，但是薄層的最大的缺點就是重復性太小了。我上一批能用薄層制備出來，但是，下次作的制備薄層分離的就不好，因為它的影響因素太多了，比如說溫度和濕度，人為的配比，都有一定的誤差，說的最直接的就是這一批下來的板子，這快分離所得到的結果，但是下一塊就不行，我有過這也的經歷。呵呵，日本那邊用這個方法的多，但是要有心理准備

㈢ 有機柱色譜實驗中，色譜柱中若留有空氣或填裝不均勻，對分離效果有何影響如何避免

會影響滲透速率和顯色的均勻
避免
1，裝柱過程中應不斷敲打色譜柱。
2，過程中，柱內洗脫劑的液面高度始終不能低於吸附劑最上端。

㈣ 柱色譜實驗中,微晶纖維素,乙醇和蒸餾水各起什麼作用

主料、溶劑、溶劑。
1、根據查詢微晶柱色譜的實驗研究報告進展得知，由於纖維素鈉具有較強吸濕性所以起到主料的作用。
2、而乙醇是促進微晶纖維素溶於色譜的溶劑。
3、蒸餾水是起輔助溶劑的作用。

㈤ 薄層色譜和柱色譜實驗的原理，步驟和注意事項

(1)薄層色譜---自下而上,展開分離!
(2)柱色譜---自上而下,展開分離!
(3)選擇適當的展開劑!

㈥ 甲基橙和亞甲基藍的柱色譜分離的實驗原理是什麼

實驗原理：利用甲基橙和亞甲基藍在中性氧化鋁的保留時間差異，實現二者的分離。
所用色譜管為內徑均勻、下端縮口的硬質玻璃管，下端用棉花或玻璃纖維塞住，管內裝有吸附劑。色譜柱的大小，吸附劑的品種和用量，以及洗脫時的流速，均按各單體中的規定。吸附劑的顆粒應盡可能保持大小均勻，以保證良好的分離效果，除另有規定外通常多採用直徑為0.07-0.15mm的顆粒。吸附劑的活性或吸附力對分離效果有影響，應予注意。
柱色譜分離
吸附劑的填裝干法:將吸附劑一次加入色譜管，振動管壁使其均勻下沉，然後沿管壁緩緩加入開始層析時使用的流動相，或將色譜管下端出口加活塞，加入適量的流動相，旋開活塞使流動相緩緩滴出，然後自管頂緩緩加入吸附劑，使其均勻地潤濕下沉，在管內形成松緊適度的吸附層。操作過程中應保持有充分的流動相留在吸附層的上面。濕法:將吸附劑與流動相混合，攪拌以除去空氣泡，徐徐傾入色譜管中，然後再加入流動相，將附著於管壁的吸附劑洗下，使色譜柱表面平整。俟填裝吸附劑所用流動相從色譜柱自然流下，液面將柱表面相平時，即加試樣溶液。
試樣的加入除另有規定外，將試樣溶於層析時使用的流動相中，再沿色譜管壁緩緩加入。注意勿使吸附劑翻起。或將試樣溶於適當的溶劑中。與少量吸附劑混勻，再使溶劑揮發去盡後使呈鬆散狀;將混有試樣的吸附劑加在已制備好的色譜柱上面。如試樣在常用溶劑中不溶解，可將試樣與適量的吸附劑在乳缽中研磨混勻後加入。
洗脫除另有規定外，通常按流動相洗脫能力大小，遞增變換流動相的品種和比例，分別分部收集流出液，至流出液中所含成分顯著減少或不再含有時，再改變流動相的品種和比例。操作過程中應保持有充分的流動相留在吸附層的上面。

㈦ 柱色譜法和薄層色譜法實驗報告的最後問題與討論怎麼寫

在實驗中遇到什麼問題，如何解決的？以及對實驗的一些思考
比如做薄層色譜時會想
為什麼要預飽和？出現峰拖尾嚴重該如何處理？
不同極性的樣品對應的展開劑選擇？
柱色譜法：柱子裝好的重要性？
注意隨時補充洗脫劑，防止走干。

㈧ 柱色譜的幾個問題

1 沒有那種東西……你確定那個塞子後面沒有連著氣泵或者加壓球？不然隔絕了大氣專壓，液面上壓屬強減小，只能越流越慢才對。（難道是柱子下面的減壓裝置……那個塞子是塞在哪裡的啊……）

2 （展開劑是對薄層層析和紙層析說的，柱色譜里叫流動相。）分正相色譜和反相色譜。正相色譜的流動相極性大於固定相極性，極性小的待分離物先流出。反相色譜相反。

㈨ 色譜柱的注意事項

色譜柱 的正確使用和維護十分重要，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中，需要注意下列問題，以維護色譜柱。
①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節流速時應該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩（如前所述）。
②應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變為全部是水，反之亦然。
③一般說來色譜柱不能反沖，只有生產者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。
④選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠「飽和」，避免分析柱中的硅膠基質被溶解。
⑤避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。
⑥經常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內的雜質。在進行清洗時，對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規分析需要50~75ml。
下面列舉一些色譜柱的清洗溶劑及順序，作為參考：硅膠柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次沖洗，然後再以相反順序依次沖洗，所有溶劑都必須嚴格脫水。甲醇能洗去殘留的強極性雜質，已烷使硅膠表面重新活化。反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次沖洗，再以相反順序依次沖洗。如果下一步分析用的流動相不含緩沖液，那麼可以省略最後用水沖洗這一步。一氯甲烷能洗去殘留的非極性雜質，在甲醇（乙腈）沖洗時重復注射100~200μl四氫呋喃數次有助於除去強疏水性雜質。四氫呋喃與乙腈或甲醇的混合溶液能除去類脂。有時也注射二甲亞碸數次。此外，用乙腈、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脫能除去蛋白質污染。
陽離子交換柱可用稀酸緩沖液沖洗，陰離子交換柱可用稀鹼緩沖液沖洗，除去交換性能強的鹽，然後用水、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表面的有機物）、甲醇、水依次沖洗。
⑦保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發乾燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。
⑧色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進入柱內，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。
在後兩種情況發生時，小心擰開柱接頭，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取凈）再把柱內填料整平。然後用適當溶劑濕潤的固定相（與柱內相同）填滿色譜柱，壓平，再擰緊柱接頭。這樣處理後柱效能得到改善，但是很難恢復到新柱的水平。
柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱（5~30mm），可以起到保護、延長柱壽命的作用。採用保護柱會損失一定的柱效，這是值得的。
通常色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上。以硅膠為基質的填料，只能在pH2~9范圍內使用。柱子使用一段時間後，可能有一些吸附作用強的物質保留於柱頂，特別是一些有色物質更易看清被吸著在柱頂的填料上。新的色譜柱在使用一段時間後柱頂填料可能塌陷，使柱效下降，這時也可補加填料使柱效恢復。
每次工作完後，最好用洗脫能力強的洗脫液沖洗，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當採用鹽緩沖溶液作流動相時，使用完後應用無鹽流動相沖洗。含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道，不宜長期與之接觸。裝在HPLC儀上柱子如不經常使用，應每隔4~5天開機沖洗15分鍾。