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實驗五薄層色譜法的應用請寫出薄層色譜實驗裝置的主要組成部分

發布時間:2022-08-16 13:58:52

A. 薄層色譜法實驗步驟

薄層色譜法的實驗步驟包括薄層板的制備、點樣、樣品的展開和斑點定位。

B. 薄層色譜法到底包括哪些啊

將固定相(如硅膠)薄薄地均勻塗敷在底板(或棒)上,試樣點在薄層一端,在展開罐內展開,由於各組分在薄層上的移動距離不同,形成互相分離的斑點,測定各斑點的位置及其密度就可以完成對試樣的定性、定量分析的色譜法。

C. 薄層色譜實驗步驟

薄層色譜實驗步驟如下:
1、將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的泡後,倒入塗布器中,在玻璃板上平穩地移動塗布器進行塗布(厚度為0.2至0.3毫米)。
2、取下塗好薄層的玻璃板,置水平台上於室溫下晾乾,後在110攝氏度烘30分鍾。即置有乾燥劑的乾燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。
3、用點樣器點樣於薄層板上,一般為圓點,點樣基線距底邊2.0厘米,點樣直徑為2到4毫米,點間距離約為1.5到2.0毫米,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
4、將點好樣品的薄層板放入展開室的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5到1.0厘米(切勿將樣點浸入展開劑中),密封室蓋,等展開至規定距離(一般為10到15厘米)。
5、取出薄層板,晾乾,按各品種項下的規定檢測,如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出,或直接在薄層上對色譜斑點作掃描定量,則可用薄層掃描法。

D. 什麼叫薄層色譜法原理是什麼!!急!!

一、薄層色譜法

薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。

二、薄層色譜法的基本原理

例如用硅膠和氧化鋁作支持劑,其主要原理是吸附力與分配系數的不同,使混合物得以分離。當溶劑沿著吸附劑移動時,帶著樣品中的各組分一起移動,同時發生連續吸附與解吸作用以及反復分配作用。

由於各組分在溶劑中的溶解度不同,以及吸附劑對它們的吸附能力的差異,最終將混合物分離成一系列斑點。如作為標準的化合物在層析薄板上一起展開,則可以根據這些已知化合物的Rf值(後面介紹Rf值)對各斑點的組分進行鑒定,同時也可以進一步採用某些方法加以定量。

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薄層色譜法(TLC)薄層色譜具有選用范圍廣,重現性好等優點,常用於中葯各種成分的鑒別。

用固定波長對薄層展開的各斑點作薄層掃描圖譜比目測的層析圖譜更為客觀准確,因而具有更好的指紋鑒別意義。但由於受薄層板的質量和開放式層析系統等外界因素的影響,易引起一定的實驗誤差。

薄層色譜法與紙層析和紙層析比較TLC快速、分離效率高、靈敏度高、顯色方法多樣、圖像易保存。

E. 薄層色譜法工作原理

薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。

薄層層析可根據作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。

吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面,吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上,都可能發生吸附現象。

物質分子之所以能在固體表面停留,這是因為固體表面的分子(離子或原子)和固體內部分子所受的吸引力不相等。在固體內部,分子之間相互作用的力是對稱的,其力場互相抵消。

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一、薄層色譜的特點:

靈敏度及解析度高、分離快速、操作方便、同時分離多個樣品、樣品預處理簡單、設備簡單。

由於這些特點,薄層色譜在實際工作中的應用十分廣泛。由於通常用薄層色譜分析法進行定量分析的過程中,薄層掃描儀是最為重要的,因此對它進行略詳的介紹。

薄層掃描儀的基本結構及主要功能基本是相同的,每台儀器都包括光源、分光器、檢測器、數據處理及信號輸出幾個部分。

二、優點

它保持了操作方便、設備簡單、顯色容易等特點,同時展開速率快,一般僅需15~20分鍾;混合物易分離,分辨力一般比以往的紙層析高10~100倍。

它既適用於只有0.01μg的樣品分離,又能分離大於500mg的樣品作制備用,而且還可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。薄層層析的缺點是對生物高分子的分離效果不甚理想。

F. 薄層色譜法的原理

薄層色譜法的原理:薄層色譜法利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。
薄層色譜法(TLC)系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用於跟蹤反應進程。

G. 薄層色譜法的原理是什麼

薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同,使在流動相(溶劑)流過固定相(吸附劑)的過程中,連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,從而達到各成分的互相分離的目的。

薄層層析可根據作為固定相的支持物不同,分為薄層吸附層析(吸附劑)、薄層分配層析(纖維素)、薄層離子交換層析(離子交換劑)、薄層凝膠層析(分子篩凝膠)等。一般實驗中應用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。

吸附是表面的一個重要性質。任何兩個相都可以形成表面,吸附就是其中一個相的物質或溶解於其中的溶質在此表面上的密集現象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上,都可能發生吸附現象。

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薄層色譜法的應用:

1、葯物和葯物代謝

薄層色譜法在合成葯物和天然葯物中的應用很廣。有些文獻和內容偏重於合成葯物、化合物及其代謝產物,有文獻為在中草葯分析中的應用。

每一類葯物,例如磺胺、巴比妥、苯駢噻嗪、甾體激素、抗菌素、生物鹼、強心甙、黃酮、揮發油和萜等,都包括幾種或十幾種化學結構和性質非常相似的化合物,可以在上述文獻中找出一、二種全盤的展開劑,一次即能把每一類的多種化合物很好地分開。葯物代謝產物的樣品一般先經預處理後用薄層分析,應用也很廣,但有時因含量甚微,不用採用氣相和高效液相色譜法靈敏。

2、化學和化工

化工和化學方面的有機原料和產品都可用薄層色譜法分析。例如含各種功能基的有機物,石油產品,塑料單體,橡膠裂解產物,油漆原料,合成洗滌劑等,內容非常廣泛。

3、醫學和臨床

薄層色譜法的應用還滲透到醫學和臨床中去,例如它是一種快速的診斷方法可用於妊娠的早期診斷。方法是基於在孕婦的尿中能檢出比未媳婦婦女的尿中含更多的孕二醇,把兩者的尿提取後點在薄層上比較,即可作出判斷。這一方法可不用動物而在2~3小時內化驗出結果。

4、毒物分析和法醫化學

如前所述,經典的毒物分析有許多缺點,毒物分析和法醫化學採用薄層色譜法等新的手段,對麻醉葯、巴比妥、印度大麻、鴉片生物鹼等均可分析。

H. 薄層色譜法的介紹

薄層色譜法(TLC),系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用於跟蹤反應進程。

I. 薄層色譜法的用途,要詳細哦

薄層色譜是化學的一種分離和分析方法
⑴定性鑒別 化學上經典的定性鑒別,例如經典的有機定性分析或經典的毒物分析,是利用各種化合物的溶解度不同和所含功能基的不同,用溶劑提取或用試劑處理,把它們分組或分為單一組分,然後作試管反應或點滴反應(顏色反應),或根據它們衍生物的理化性質進行定性鑒別.這種方法的缺點是樣品用量叫大,分離手續麻煩,分析時間較長(幾小時或幾時個小時),並可能有雜質干擾.,現採用合適的展開劑和現色劑在薄層上作為分離和鑒別,根據樣品中組分的 值和現色情況,同時用標准作對照,一般即能卻證為某一化合物.用薄層色譜法定性,樣品用量小,分離方便,分離時間短(幾分鍾或幾時分鍾),檢出靈敏度高. 例如,再毒物分析中檢驗是否巴比妥安眠葯中毒時,取胃內容物或尿樣品,先用鹽酸酸化後,用乙醚提取,乙醚提取液脫水,過濾蒸干,溶於無水乙醇中,點在硅膠版上用氯仿 無水乙醇(36 1)展開,用硫酸汞二苯偶碳醯肼試劑顯色,並用標准品對照,意見出巴比妥,苯巴比妥,戊巴比妥和異巴比妥。鑒別速度快(1小時),這對於搶救中毒患者和及時為醫生提供治療方案極為重要
(2)葯品的質量控制和雜質檢查 葯品的純度,通常用熔點,吸光值等物理常數作為鑒定的指標。但是薄層檢查也是葯品質量控制和雜質檢查的一種有效方法,有時甚至比一般方法更有效。一些國家的葯典和葯品規范已經採用。方法是把一定量得樣品 溶液(例如,相當於 樣品)電在薄層上,用展開劑展開並顯色,同時用純品作對照,如果樣品只顯示出純品 值一致的一個斑點,則表示含有雜質.進一步可用薄層作雜質的限量檢查.再上例中,如果已經知道顯色劑對雜質的最小檢出量為 ,在薄層上點樣 後不顯出雜質斑點,則雜質的量低於 ,或低於 ,也就是樣品的純度不低於 . 例如鎦體葯物的合成和精緻工作中,常含結構類似的雜質,即按上述方法控制其質量和雜質的限量.
⑶化學反應進程的控制,反應副產物的檢出以及中間體的分析, 在化學反應進行到一定時間或反應終了時,把反應液取出作薄層分析,可以知道還剩下多少原料葯未起作用.方法是把反應液或其有機溶劑提取液點在薄層上,同時點原料作參比對照,看薄層上是否出現原料葯斑點.還可以用薄層檢查反應副產物.如果化學反應分步進行,則每一步反應的中間體的質量和產率也都可用薄層進行定性和定量. 例如在合成強力黴素的過程中,需要中間地甲烯土黴素氫化物為脫氧土黴素.氫化反應是否完全,可用薄層檢查,如果反應完全,則反應釜中幾乎沒有或只有極少量的甲烯土黴素存在,薄層板上只顯示出一個脫氧土黴素,如果薄層板上有上下二個明顯的斑點,表示反應還沒有完全,尚需繼續還原,直到只顯示出脫氧土黴素的一個斑點為止才能出料.
(4) 柱色譜法分離條件的探索 柱色普法的實驗條件,例如選用什麼吸附劑和洗脫劑較好各個組分按什麼順序從柱中洗脫出來,每一分洗脫液中是含單一組分或就含幾種沒有分開的組分等,都可以在薄層上進行探索和檢驗。薄層上所有的展開劑雖不完全照搬柱色普法上,但仍有參考價值。
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