『壹』 HPLC原理及基本操作是什麼
原理
高效液相色譜法儀根據各種各樣的相互作用力來分離混合物。這種相互作用力通常是分析物及分析管柱之間的一種非共價性質。
使用高效液相色譜時,液體待檢測物在不同的時間被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由於被測物中不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,每個峰頂都代表一個另外化合物的種類,最後通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。
以液體為流動相而設計的色譜分析儀器稱為液相色譜儀。採用高壓輸液泵,高效固定相和高壓靈敏檢測器等裝置的液相色譜儀成為高效液相色譜儀。高效液相色譜儀種類繁多,但不論何種類型的高效液相色譜儀,基本上都分為4個部分:高壓輸液裝置,進樣系統,分離系統和檢測系統。
操作
將要分離和分析的樣品混合物以不連續的小體積(通常為微升)引入滲透通過色譜柱的流動相流中。樣品的組分以不同的速度通過色譜柱,這是與吸附劑(也稱為固定相)的特定物理相互作用的函數。每個組分的速度取決於其化學性質,固定相(柱)的性質以及流動相的組成。
特定分析物洗脫(從色譜柱中出現)的時間稱為其保留時間。在特定條件下測得的保留時間是給定分析物的識別特徵。
可以使用許多不同類型的色譜柱,其中填充了粒徑,孔隙率和表面化學性質各異的吸附劑。使用較小的顆粒尺寸的包裝材料需要使用較高的操作壓力(「背壓」)的和通常改善的色譜解析度(連續的分析物從柱中出現的峰之間的分離度)。吸收劑顆粒本質上可以是疏水的或極性的。
常用的流動相包括水與各種有機溶劑的任何混溶性組合(最常見的是乙腈和甲醇)。一些HPLC技術使用無水流動相(請參見下面的正相色譜法)。
流動相的水性成分可能包含酸(例如甲酸,磷酸或三氟乙酸)或鹽以幫助分離樣品成分。在色譜分析過程中,流動相的組成可以保持恆定(「等度洗脫模式」)或變化(「梯度洗脫模式」)。等度洗脫通常在分離與固定相親和力非常不同的樣品成分時非常有效。
在梯度洗脫中,流動相的組成通常從低到高洗脫強度變化。流動相的洗脫強度由分析物的保留時間反映,高洗脫強度可產生快速洗脫(=較短的保留時間)。
反相色譜中的典型梯度曲線可能始於5%的乙腈(在水或水性緩沖液中),然後在5–25分鍾內線性增長至95%的乙腈。恆定流動相組成的周期可以是任何梯度曲線的一部分。例如,流動相的組成可以在5%的乙腈中保持1-3分鍾,然後線性變化直至95%的乙腈。
流動相的選定組成取決於各種樣品組分(「分析物」)和固定相之間的相互作用強度(例如,反相HPLC中的疏水相互作用)。根據它們對固定相和流動相的親和力,在色譜柱中進行分離過程中,分析物會在兩者之間分配。
此分配過程類似於液-液萃取過程中發生的分配過程,但該過程是連續的,而不是逐步進行的。在此示例中,使用水/乙腈梯度洗脫,一旦流動相在乙腈中的濃度更高(即,在洗脫強度更高的流動相中),則更多的疏水性組分將較晚洗脫(從色譜柱中洗脫)。
流動相組分,添加劑(例如鹽或酸)和梯度條件的選擇取決於色譜柱和樣品組分的性質。通常對樣品進行一系列的試驗,以便找到可以充分分離的HPLC方法。
用途
高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛的應用於化學和生化分析中,常用於醫葯品、化學、環保、生命科學、與食品工業的研究上。
高效液相色譜從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別,它的特點是採用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,可將液體混合物中的成分分離、成分定性及定量分析。適於分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。例如:可檢測分析食品中的三聚氰胺的含量。
『貳』 HPLC-PAD和HPLC有什麼區別
嗯,hplc是分離裝置,高效液相色譜,其PDA是二極體陣列紫外檢測器。前面是高效液相色譜串聯紫外檢測器。後者是高效液相色譜只分離,沒有檢測。
『叄』 計量表安裝HPLC模塊什麼只有TCD在內
摘要 您好~這道問題問得很好,我需要一點時間編輯答案,還請您耐心等待一下。
『肆』 高效液相色譜儀主要包括哪幾個部分
高效液相色譜儀般由溶劑輸送系統、進樣系統、分離系統(色譜柱)、檢測系統和數據處理與記錄系統組成,具體包括儲液器、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數據工作站等幾部分。
其整體組成類似於氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恆定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由於液體流動相粘度遠遠高於氣體,為了減低柱壓高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小於氣相色譜柱。HPLC應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
使用高效液相色譜時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由於被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,最後通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。
(4)HPLC通信模塊檢測裝置擴展閱讀
高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。
與試樣預處理技術相配合,HPLC 所達到的高解析度和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。
HPLC成為解決生化分析問題最有前途的方法。由於HPLC具有高解析度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫葯研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是一個重要的發展方向。
液相色譜-質譜聯用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農葯和多核芳烴等; 液相色譜- 紅外光譜聯用也發展很快,如在環境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發烴類,使環境污染分析得到新的發展。
『伍』 物聯網系統中的檢測裝置與一般的相比有何不同
感測網是隨機分布的集成有感測器、數據處理單元和通信單元的微小節點,通過自組織的方式構成的無線網路。
『陸』 HPLC主要部件有哪些,各自的作用
HPLC主要部件可分為「高壓輸液泵」、「色譜柱」、「進樣器」、「檢測器」、「餾分收集器」以及「數據獲取與處理系統」等部分。
主要作用:
1、高壓輸液泵
功能
驅動流動相和樣品通過色譜分離柱和檢測系統;
性能要求
流量穩定(±1),耐高壓(30~60Mpa),耐各種流動相:例如:有機溶劑、水和緩沖液;
種類
往復泵和隔膜泵。
2、色譜柱
功能
分離樣品中的各個物質;
尺寸
10~30cm長,2~5mm內徑的內壁拋光的不銹鋼管柱;
填料粒度
5 ~10μm ,高效微粒固定相;
3、進樣器
功能
將待分析樣品引入色譜系統;
種類
①注射器,10Mpa以下,1~10μm微量注射器進樣
②停流進樣
③閥進樣,常用、較理想、體積可變,可固定
④自動進樣器,有利於重復操作,實現自動化
4、檢測器
功能
將被分析組在柱流出液中濃度的變化轉化為光學或電學信號;
分類
①示差折光化學檢測器
②紫外吸收檢測器
③紫外-可見分光光度檢測器
④二極體陣列紫外檢測器
⑤熒光檢測器
⑥電化學檢測器
5、餾分收集器
功能
如果所進行的色譜分離不是為了純粹的色譜分析,而是為了做其它波譜鑒定,或獲取少量試驗樣品的小型制備,餾分收集是必要的;
方法
①手工,少數幾個餾分,手續麻煩,易出差錯。
②餾分收集器收集,比較理想,微機控制操作準確。
6、數據
獲取與處理功能
把檢測器檢測到的信號顯示出來。
『柒』 光通信檢測儀器有哪些
你問的很寬泛
有 光功率計、光譜分析儀等
還有光學綜合指標測試系統,能測試光通信模塊的插損,回損,偏振損耗,RIPPLE,帶寬、串擾等等。
『捌』 HPLC設備儀器
高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用於分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內,由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動時,經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式列印出來。HPLC廣泛應用於生命科學、食品科學、葯物研究以及環境研究中。
『玖』 HPLC、UV、GC、TLC是什麼檢測方法
TLC:薄層色譜法.系將適宜的固定相塗布於玻璃板、塑料或鋁基片上,成一均勻薄層。待點樣、展開後,根據比移值(Rf)與適宜的對照物按同法所得的色譜圖的比移值(Rf)作對比,用以進行葯品的鑒別、雜質檢查或含量測定的方法。薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,也用於跟蹤反應進程。
PC:紙色譜法.是一種可以測試物質的純度與分離混合物的方法,因為它可以快速的完成分析,而且對材料的限制很少,所以是一種極方便而且有用的分析方法。紙色譜法用的分離原則跟薄層色譜法一樣,物質分布在一個固定相與流動相。固定相通常是濾紙,流動相會帶著物質在上面流動,這個裝置將會根據混合物中不同物質對固定相的附著力和對流動相的溶解度而分離出來。分析顏料時,如果顏料中含有不只一種物質,不同顏色的物質會就根據溶劑和不同溶質的極性分開,這是因為不同的分子結構極有可能有不同的極性。這些不同的極性造就對溶劑的不同溶解度,使各種溶質會在溶劑擴散的不同位置沉澱在固定相上以斑點呈現,就可以根據固定相上的斑位置及大小作分析。
HPLC:高效液相色譜法.是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。
GC:氣相色譜.可分為氣固色譜和氣液色譜。氣固色譜指流動相是氣體,固定相是固體物質的色譜分離方法。例如活性炭、硅膠等作固定相;氣液色譜指流動相是氣體,固定相是液體的色譜分離方法。例如在惰性材料硅藻土塗上一層角鯊烷,可以分離、測定純乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等雜質。
『拾』 如何安裝agilent 1200 hplc工作站
一、安裝資源
光碟1、Agilent Technologies EZChrom Elite Version 3.3.2
ISO文件:G4650-60025_032509.iso
光碟2、Agilent Technologies EZChrom Elite Instrument Control Add-on Version 3.3.2 Rev.1
ISO文件:G4650-60026_032509.iso
光碟3、Agilent Technologies LC Hardware Information & Utilities Version B.01.01 November 2008
ISO文件:G4800-60120.iso
光碟4、Agilent Technologies LAN Card G1369A User's Guide Rev.A.01.04 November 2006
ISO文件:G1369A.iso
我們主要使用到光碟1和2這兩個盤。這些盤應該都會隨儀器一起附帶。
2
二、安裝步驟
1、彈出光碟機,插入光碟1(EZChrom Elite工作站),安裝向導程序自動啟動;如果沒有啟動,在光碟機右鍵菜單點自動播放,則安裝向導程序啟動。
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2、選擇安裝語言,選擇「安裝中文版本」。
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3、選擇上面第一項,「安裝 EZChrom Elite」進入下一步。
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4、單擊「下一步」,進入安裝路徑選擇界面。
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5、單擊「瀏覽」,選擇安裝路徑。
7
6、我們選擇了D:\Program Files\EZChrom Elite\作為企業路徑。我們是單機安裝,接下來的對話框留空不填。
8
7、安裝完成,選擇稍後重新啟動計算機,單擊「完成」。
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8、關閉安裝向導,退出光碟1,放入光碟2,進入LC驅動程序安裝步驟,右擊選擇自動播放,進入安裝向導界面。
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9、選擇語言,單擊「安裝中文版本」,進入下一步。
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10、選擇第三個選項,安裝「Agilent LC(1100,1200 HPLC包括PDA)」。
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11、單擊「下一步」,讀取安裝進度。
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12、選擇稍後重啟計算機,單擊「完成」按鈕完成安裝。
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13、退出安裝向導,取出光碟機,關閉其他正在運行的應用,重啟Windows系統。
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三、配置HPLC系統
1、先配置計算機網卡屬性——IP地址設置為192.168.254.10,子網掩碼設置為255.255.255.0,其餘留空。
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2、將HPLC儀器通信線纜連接到計算機網卡介面、將加密狗(類似U盤)連接到USB埠,按下儀器各個模塊的電源開關,給儀器通電。
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3、雙擊桌面上的EZChrom Elite圖表,打開程序,進入主界面。
4、在右側空白處右擊,選擇新建儀器。
5、命名儀器,選擇儀器類型,我們選「Agilent 1100/1200 系列 LC」。
6、單擊「配置」按鈕,進入配置界面。
7、單擊自動配置,設置IP地址為:192.168.254.11,單擊「確定」。
8、儀器與軟體自動配置,請等待。
9、配置完成,如圖。
10、一路單擊「確定」,進入主界面。
11、打開儀器,進入控制界面,首次使用會彈出「儀器向導」對話框,現在可以正常使用了。
四、數據維護
1、圖譜數據遷移 默認情況下,結果圖譜保存在安裝目錄下的Default文件夾中,例如本次安裝完成,圖譜會保存在D:\Program Files\EZChrom Elite\Enterprise\Projects\Default\
2、操作日誌遷移 默認下,操作日誌保存在安裝目錄下的_Config文件夾中,其中Instrument10001.logidx和Instrument10001.logrec記錄著操作日誌。新安裝完成後,用原來的日誌文件替換新日誌文件即可在軟體中查看之前的操作日誌。