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細胞顛簸實驗裝置

發布時間:2022-07-22 05:18:22

Ⅰ 動物細胞培養所用的無菌器材與微生物實驗所用的無菌器材有什麼區別有相同點嗎詳細說明下,謝謝

區別在動物細胞培養使用的無菌器材一般是細胞培養級(cell
culture
tested),一般需要經過特殊處理(比如包被處理等),在潔凈度,表面處理(表面的平整度等)方面要比普通的微生物培養更為嚴格。用細胞培養用的器材去做微生物實驗一般沒有問題,反過來就不行了。

Ⅱ 如圖是關於探究酵母菌細胞呼吸方式的兩組實驗裝置,請據圖回答問題:(1)酵母菌應加到______瓶中;澄清

(1)A瓶中應加入質量分數為10%的NaOH溶液,用於吸收空氣中的CO2;酵母菌應加到B、D瓶中回;澄清的答石灰水應加到C、E瓶中.
(2)由於酵母菌無氧呼吸能產生酒精,所以一段時間後在D中取少量培養液,滴加酸性重鉻酸鉀溶液以檢測酒精的存在,如果有酒精存在,則溶液的顏色變化為橙色變為灰綠色.
(3)甲裝置中發生有氧呼吸,其總反應式為:C6H12O6+6O22C2H5OH+2CO2+能量

Ⅲ 細胞生物學實驗室儀器有哪些

倒置顯微鏡(觀察細胞形態,計數等),熒光顯微鏡(萊卡,奧林巴斯等)(免疫熒光反應觀察細胞內分子的相互作用,蛋白的表達情況;)co2培養箱(熱電,三洋等)(動物細胞培養專用),超凈工作台(江蘇安泰,熱電等);CO2罐,冰箱,液氮罐,離心機以及一些其他的常用儀器

Ⅳ 如圖是探究酵母菌細胞呼吸方式的實驗裝置.以下說法中正確的是()A.該實驗需設置有氧和無氧兩種條

A、該實驗需設置有氧和無氧兩種條件的對比實驗,甲、乙兩組互為對照,A錯誤;內
B、若向裝置甲乙的酵母菌培容養液中加入酸性重鉻酸鉀溶液,則只有裝置乙內的溶液會由橙色變成灰綠色,B錯誤;
C、實驗的觀測指標是溶液的顏色變化,由於有氧呼吸釋放的CO2比無氧呼吸多,所以可根據溴麝香草酚藍水溶液變黃的時間長短,來檢測CO2的產生速率,C正確;
D、若裝置甲乙中澄清石灰水均變渾濁,則能據此判斷酵母菌的呼吸方式,D錯誤.
故選:C.

Ⅳ 如圖是驗證酵母菌細胞呼吸類型的實驗裝置,兩套裝置的培養條件一致(不考慮環境中物理因素的影響),下列

A、若裝置1中的紅色液滴向左移,移動距離可表明酵母菌有氧呼吸所消耗的氧氣量,A正確;
B、若酵母菌只進行無氧呼吸,則裝置1中紅色液滴不移動,裝置2中紅色液滴向右移,B正確;
C、若酵母菌只進行有氧呼吸,則裝置1中紅色液滴左移,裝置2中紅色液滴不移動,C錯誤;
D、若酵母菌同時進行有氧呼吸和無氧呼吸,則裝置1中紅色液滴向左移,裝置2中紅色液滴向右移,D正確.
故選:C.

Ⅵ 如圖為「探究酵母菌細胞呼吸的方式」的實驗裝置圖,請據圖分析,錯誤的是:()A.C瓶和E瓶都會變渾

A、C瓶和E瓶都會變渾濁,說明酵母菌既可以進行有氧呼吸又可以進行無氧呼吸,A正確內;容
B、酵母菌適宜生存的溫度在18℃~25℃之間,B錯誤;
C、甲裝置是探究酵母菌有氧呼吸的,因此需要不停的送入新鮮空氣,C正確;
D、A瓶中加入NaOH溶液是為了吸收空氣中CO2,以排除空氣中二氧化碳的干擾,D正確.
故選:B.

Ⅶ 下圖為「探究酵母菌細胞呼吸的方式」的實驗裝置圖,下列敘述有幾項是正確的 ( )

[答案]B
[解析]酵母菌屬於兼性厭氧菌,①正確;有氧呼吸產生的二氧化碳比無氧呼吸多內,相同時間後,C的渾濁度比E大容,②錯誤;在D瓶的液面覆蓋一層油脂可確保無氧環境,會使實驗更精確,③正確;甲和乙屬於對比實驗,④正確;檢測酒精的試劑是酸性的重鉻酸鉀溶液,⑤錯誤;A瓶中的NaOH溶液可吸收空氣中原有的二氧化碳,使實驗結果更可靠,⑥正確。

Ⅷ 我們實驗室沒有專門的細胞培養間,可以做細胞培養嘛 老師說在無菌操作台上弄好,蓋上蓋子放到培養箱就行

可以做。操作在超凈工作台,培養在恆溫培養箱,但是蓋子必須蓋好。

Ⅸ 細胞培養會用到哪些重要的實驗儀器如何做到細胞培養的無菌操作(

重要的實驗儀器蒸餾器、儲品櫃、超凈工作台、水浴鍋、三氧消毒殺菌機。細胞培養的無菌操作需要在無菌台上操作。

具體設備如下:

准備室的設備:單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品櫃(放置未消毒物品)、儲品規(放置消毒過的物品)、包裝台。

配液室的設備:扭力天平和電子天平(稱量葯品)、PH計(測量培養用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)。

培養室的設備:液氮罐、儲品櫃(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統、低溫冰箱(-80℃)、空調、二氧化碳缸瓶、邊台(書寫實驗記錄)。

必須放在無菌間的設備:離心機(收集細胞)、超凈工作台、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機、4℃冰箱(放置serum和培養用液)。

無菌操作

1、凡是帶入超凈工作台內的酒精、PBS、培養基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面。

2、靠近酒精燈火焰操作。

3、器皿使用前必須過火滅菌。

4、繼續使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,使用時仍要過火。

5、各種操作要靠近酒精燈,動作要輕、准確,不能亂碰。

如吸管不能碰到廢液缸。

6、吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管,防止交叉污染。

Ⅹ 有哪位高手能詳細指導一下用transwell板做細胞趨化實驗的具體方法和步驟嗎

1
材料與方法
1.
1
Matrigel:Becton
Dickinson
Compary,
-
20
℃保存;
Tanswell
plate:Costar
,USA
,
#
3422
,聚碳酯膜微孔直徑為8μm;
蘇木素染液,梯度乙醇,二甲苯溶液。
1.
2
趨化因子的制備
取傳代第二天長勢良好的NIH3T3細胞,無血清培養基輕柔漂洗兩次;
加入無血清培養基,37℃,5
%CO2
培養24
h~48h,收集細胞培養上清;4
℃,12
000rpm
離心,10
min
,取上清;0.22
μm
濾膜過濾除菌;分裝,在-
20
℃保存。
1.
3
transwell
培養板准備
所有操作均需無菌操作。-20℃保存的Matrigel
在冰上保2℃~8℃過夜融化。在冰上用預冷的槍頭吸取100μl
Matrigel
加入冰預冷的300μl
無血清培養基中,充分混均。取上述稀釋的Matrigel
25
μl
加入transwell
板上室,覆蓋整個聚碳酯膜,37
℃,30
min
,使Matrigel
聚合成膠。已鋪好Matrigel的transwell
培養板置於37℃可保存2
周。
1.
4
Matrigel
侵襲實驗(Matrigel
Invasion
Assay)刺激後的各組細胞用PBS
漂洗3
次。以常規方法用無血清培養基制備單細胞懸液,5
×105個細胞/
ml
,每組細胞各分為兩部分。胎盤蘭拒染實驗,細胞活力需大於95
%。Transwell
培養板上室加入100μl
細胞懸液(
5
×104
個)
並加入無血清培養基200
ul
。Transwell
培養板下室加入500μl
趨化因子,37℃,5
%CO2
培養24
h。用濕棉簽輕輕擦去Matrigel
凝膠和聚碳酯膜上表面的細胞。小心取出上室,用線拴住,並做好標記,用冰預冷的甲醇固定30
min。蘇木素染色1
min。梯度乙醇脫水(80
%
,95
%
,100
%)
,二甲苯透明。小心將聚碳酯膜自上室基底切取下來,置載玻片上中性樹脂封片。附著於聚碳酯膜下表面的細胞在高倍鏡下(
×400)
隨機取6
個視野[1
]
計數,取平均數。重復實驗兩次。
注意
2.
1
NIH3T3
細胞制備的趨化因子與胎牛血清
趨化因子是能使細胞產生趨化運動的一類細胞因子[2
]
。目前利用NIH3T3
細胞制備趨化因子做細胞體外侵襲實驗的實驗室比較多,時間較長且實驗步驟繁瑣。眾所周知,胎牛血清中有趨化因子,我們在不同濃度TNFα刺激下的HCCC29810
膽囊癌細胞體外侵襲能力的強弱實驗中發現用胎牛血清和用NIH3T3
細胞制備的趨化因子做細胞體外侵襲實驗效果是一樣的,兩組遷移的細胞數很接近。在實驗時間上,用NIH3
T3細胞制備趨化因子做細胞體外侵襲實驗周期為1
周,而用胎牛血清作趨化因子做細胞體外侵襲實驗周期為2
d
,實驗時間節省了很多。因此認為可以用胎牛血清來代替NIH3T3
細胞制備的趨化因子。
2.
2
細胞的准備
所需細胞應處在對數生長期,細胞活力需大於95
%。如果細胞活力小,就會造成細胞穿透能力下降,影響實驗結果。
2.
3
擦去Matrigel
凝膠和聚碳酯膜上表面的細胞
先用干棉簽將上室內液體吸去,再用蒸餾水浸濕的棉簽輕輕擦去Mat
rigel
凝膠和聚碳酯膜上表面的細胞,如果沒有擦凈聚碳酯膜上表面的細胞,在細胞計數時就會將沒擦掉的細胞也計進來。尤其是細胞為圓形的時候,就會分辨不出是穿過去的細胞還是沒穿過去的細胞,對於長梭形細胞來說,穿過去的細胞為長梭形,沒穿過去的細胞多為圓形。
2.
4
蘇木素染色
上室浸泡在新蘇木素中的時間為1
min
,用過多次的蘇木素為2
min。在研究粉防己鹼對HUVEC
人類臍靜脈內皮細胞遷移能力的抑製作用沒有將多餘蘇木素洗去,直接脫水、透明,造成細胞圖片背景模糊,細胞不清楚(見圖1)
。在作不同濃度TNFα刺激下的HCCC29810
膽囊癌細胞體外侵襲能力的強弱實驗時我們將其置於盛有自來水的燒杯中,反復漂洗幾次,將多餘蘇木素洗去再行脫水、透明;這樣做出的細胞圖片背景干凈,細胞清楚(見圖2)

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