黃酮提取與分離中試實驗裝置

『壹』 植物中如何對黃酮類進行細提取

傳統的萃取芝法有有機溶劑萃取，熱水萃取，鹼性水或鹼性稀醇萃取體系溶劑萃取法。

乙醇和甲醇是提取黃酮類化合物最常用的溶劑，糖原的提取宜採用濃度較高的酒精(如9% ~ 9%)，糖原的提取宜採用濃度約為%的乙醇或甲醇溶液，乙酸乙酯和丙酮也常用來提取黃酮類化合物，萃取過程包括冷浸、滲濾和迴流。

超聲提取是一種新的提取黃酮類化合物的方法，其原理是，超聲空化對細胞膜的損傷有利於黃酮類化合物的釋放和溶出，超聲波使萃取液不斷振盪，促進了溶質的擴同時，超聲波的熱效應使水溫基本在7℃，原料可以用於水溶，超聲波法大大縮短了提取時間，提高了有效成分的提取率和原料的利用率。

微波提取技術對黃酮類化合物的提取也取得了良好的效果，具有反應效率高、選擇性強、操作簡單、副產物少、提取率高、純化方便等優點。該植物細粉在浸出過程中不凝結、不結膠，克服了熱水法的不足。

酶解法可用於提取細胞壁包裹的黃酮類化合物原料，例如在山楂中，由於黃酮類化合物被細胞基細胞壁包圍，而這些細胞壁之間又有果膠結合，所以酶法(酶提取)的提取率比一般方法要高。

將預乾燥碾碎的山楂浸泡在蒸餾水中，加熱至℃，加入%果膠酶溶液，調節pH值~用mol/LNaH，在℃下酶解然後酶解溶液迴流純化。

該方法可使萃取率提高，提取原理是果膠酶充分破壞連接細胞壁的果膠物質，將山楂中的果膠完全解壓為小分子物質，降低了提取物質的抗性，使果肉中的黃酮類化合物充分釋放。

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我國對超臨界萃取黃酮類化合物的研究始於9世紀，1999年陳樹來等利用超臨界CO從苦參米中提取蘆丁，並以乙醚為夾帶劑直接從苦參米中提取蘆丁，結果表明，以醚作夾帶劑，從苦參米中直接提取蘆丁較為困難，提取效果好，純度高，收率高。

半仿生提取法(SBE)是由孫秀梅和張昭旺首先提出的一種新的中葯提取方法，如陳hsiao-chuan∽通過正交試驗優化半仿生提取叫摘要杜仲中綠原酸和類黃酮工藝條件，杜仲葉為原料，有一塊扭曲的檸檬酸性磷酸氫二鈉緩沖溶液提取。

m(提取)m(液體)提到=分別提取pH值和787℃浸提H，每次浸提次數，在此條件下，得到了綠原酸的產率，黃酮類化合物得率達。

『貳』 黃酮類化合物的提取方法有哪些

1、醇提取法

黃酮類化合物提取最常用一種方法，常用的有機溶劑主要有乙醇、乙醚、甲醇和乙酸乙酯等，其中乙醇是最常用的。

2、微波提取法

微波提取技術又稱微波萃取技術，其最大的優點是耗能耗材少、無污染，尤其對特定的葯材提取具有高選擇性。

3、超臨界萃取技術

超臨界萃取是一種較廣泛使用的葯物提取、分離手段，其最大的優點是無有機溶劑殘留，保證了提取成分的100%純天然。

4、酶解法

酶解法是一種較好的輔助提取方法。酶具有高度的選擇性，因此對不同提取材料，選擇合適的酶對提取率影響較大。

5、膜分離提取法

膜分離技術也是一種常用的輔助提取技術，其中超濾法作為唯一能用於分子級別的分離方法廣泛的應用於黃酮類化合物的提取分離。利用超濾技術分離純化黃酮化合物最大的優點是操作簡便、無需加熱、不破壞活性成分的結構，純化和濃縮一步完成，超濾裝置還可反復使用。

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黃酮類化合物的顏色與分子中存在的交叉共軛體系及助色團（-OH）等的類型、數目及取代位置有關。一般來說，黃酮、黃酮醇及其苷類多呈灰黃至黃色，查爾酮為黃色至橙黃色，而二氫黃酮、二氫黃酮醇、異黃酮類等因不存在共軛體系或共軛很少，故不顯色。

花色素及其苷元的顏色，因pH的不同而變，一般呈紅（pH<7）、紫（7<8.5）、藍（PH>8.5）等顏色。

黃酮苷元一般難溶或不溶於水，易溶於甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等有機溶劑，易溶於稀鹼液。黃酮類化合物的羥基糖苷化後，水溶性相應加大，而在有機溶劑中的溶解度相應減少。黃酮苷一般易溶於水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶劑，難溶於乙醚、三氯甲烷、苯等有機溶劑。

黃酮類化合物因分子中多有酚羥基而呈酸性，故可溶於鹼性水溶液、吡啶、甲醯胺及二甲基甲醯胺中。有些黃酮類化合物在紫外光（254nm或365nm）下呈不同顏色的熒光，氨蒸汽或碳酸鈉溶液處理後熒光更為明顯。多數黃酮類化合物可與鋁鹽、鎂鹽、鉛鹽或鋯鹽生成有色的絡合物

『叄』 黃酮提取

我原來做過一個大豆異黃酮的提取實驗，是用乙醇法索氏提取器提取的

『肆』 某中葯中含三萜皂苷，游離三萜，黃酮，黃酮醇，多糖成分，設計合理提取分離實驗

皂苷部分極性較大，首先應該附集皂苷部位，通常可用正丁醇萃取或是大孔樹脂得到總皂苷部位。對於具體皂苷的分離，若使用硅膠柱層析，一般以氯仿：甲醇：水進行洗脫，氯仿：甲醇：水一般為9：1：0.1，8：2：0.3，7：3：0.5。黃酮類化合物在硅膠上的吸附較多，可以採取減壓硅膠柱或者中壓硅膠柱，上樣量稍大一些（這樣可以減小吸附量），將樣品分段，然後採用sephadex LH－20進行細分。多糖提取方法既有熱水浸提法、酸鹼浸提法、酶解提取法、微波輔助提取法、超聲輔助提取法和超高壓提取法等單一方法,也有超聲微波輔助法、微波輔助酶法、超聲波輔助酶法等聯用方法。多糖分離純化過程一般是先除雜,再對多糖組分進行分級純化。分級純化的常用方法有沉澱法、凝膠色譜法、陰離子交換色譜法、大孔樹脂柱色譜法、超濾法等。

『伍』 活性成分總黃酮的提取方法有哪些

總黃酮的提取方法
1、 熔劑法
熱水提取法、鹼性水或鹼性稀醇提取法、有機溶劑提取法 2、
2、微波提取法
微波提取是利用不同結構的物質在微波場中吸收微波能力的差異，使基體物質中的某些區域或提取體系中的某些組分被選擇性加熱，從而使被提取物質從基體或體系中分離，進入介電常數較小，微波吸收能力相對差的提取劑[1]。這種方法的優點是對提取物具有較高的選擇性、提取率高、提取速度快、溶劑用量少、安全、節能、設備簡單[2]。 2.2 超聲波提取法
用超聲波提取法提取黃酮類物質，是目前比較新的方法。原理是利用超聲波在液體中的空化作用加速植物有效成分的浸出提取，另外，還利用其次效應，如機械振動、擴散、擊碎等，使其加速被提取成分的擴散、釋放。超聲波提取法具有設備簡單，操作方便，提取時間短，產率高，無需加熱，同時有利於保護熱不穩定成分，省時，節能，提取率高的優點。
3、 超臨界流體萃取法
超臨界流體萃取技術是利用超臨界流體處於臨界溫度和臨界壓力以上，兼有氣體和液體的雙重特點，對物質具有良好的溶解能力，從而作溶劑進行萃取分離。可做超臨界流體的物質很多，一般為低分子量的化合物，如CO2、C2H6、NH3、N2O 等。目前多採用CO2 做萃取劑，因為它具有密度大、溶解能力強、臨界壓力適中、臨界溫度接近常溫、不影響萃取物的生理活性、無毒無味、化學性質穩定、生產過程中容易回收、無環境污染、價格便宜等一系列優點。但單一的CO2作萃取劑只對低極性、親脂性化合物有較強的溶解能力，對大多數極性較強的組分則不起作用，因此，在其中加入夾帶劑，通過影響溶劑的密度和溶質與夾帶劑分子間的作用力來影響溶質在二氧化碳流體中的溶解度和選擇性[15]。超臨界流體萃取技術有許多傳統分離技術不可比擬的優點：過程容易控制、達到平衡的時間短、萃取效率高、無有機溶劑殘留、對熱敏性物質不易破壞等[16]。但它所需要的設備規模較大，技術要求高，投資大，安全操作要求高，難以用於較大 規模的生產。
4、 酶法提取
酶解法適用於被細胞壁包圍的黃酮類物質，利用酶反應的高度專一性，破壞細胞壁，使其中的黃酮類化合物釋放出來。黃劍波等[22]採用纖維素酶輔助法從甜茶中提取黃酮類化合物，黃酮類物質的提取率為91%，提取純度為54%。王悅等[23]對桔皮細胞進行游離酶、固定化酶和常規法提取，黃酮得率分別是1.43%，0.94% 和0.79%，和傳統的方法相比，游離酶法的總黃酮得率提高了81%。
5、雙水相提取法
雙水相提取技術是瑞典Per Albersson首先發現並研究 的一種技術，雙水相萃取法屬於液- 液萃取，當物質進入雙 水相體系後，由於表面性質、電荷作用和各種力的作用，溶 液環境的影響，其在上、下相中的濃度不同，即各成分在兩 相間選擇性分配，從而達到萃取的目的。由於雙水相體系分 相快、使用溫度低、容易操作、無污染、提取率高，因此成 為黃酮化合物富集分離的一種有效方法。張春秀等[24]取一 定量的銀杏葉浸提液，加到PEG1500/ 磷酸鹽體系雙水相 系統中，則黃酮類化合物進入上相PEG，從而將黃酮類化合 物分離，提取率可達98.2%。
6、 半仿生提取法
半仿生提取法是將整體葯物研究法與分子葯物研究法相結合，模擬口服給葯後葯物經胃腸道轉運的環境，為經消化道給葯的中葯制劑設計的一種新的提取工藝。這種提取方法的特點是可以提取和保留更多的有效成分，能縮短生產周期、降低成本。
7、膜分離法
膜分離法主要有超濾、微濾、納濾和反滲透等，其中超濾法是膜分離的代表，它是唯一能用於分子分離的過濾方法，是以多孔性半透膜為分離介質，依靠薄膜兩側壓力差作為推動力來分離溶液中不同分子量的物質。由於大多數黃酮類化合物的分子量在1000 以下，而非有效成分如大多數的多糖、蛋白質等分子量多在50000 以上，因而使用超濾能有效去除蛋白質、多肽、大分子色素、澱粉等，達到除菌、除熱原、提高葯液澄明度以及提高有效成分含量等目的。這種方法操作簡便、不需要加熱、不損壞黃酮類化合物，提取效果好、超濾裝置可反復使用。於濤等[26]研究了銀杏葉中黃酮類化合物的提取過程及工藝，使用超濾技術對粗提的產品進行精製，對影響超濾的工藝條件進行了考察，超濾後產品中黃酮質量分數達到33.99%。
8、 熱壓流體萃取法
熱壓流體萃取法是一種快速、環保、便宜、有效地萃取生物活性物質的方法。Chaorui Chen等[27]採用熱壓流體萃取法從巴西蜂膠中提取了7種黃酮類化合物，結果表明，通過熱壓水萃取的樣品中當存在表面活性劑時萃取物的固體含量更高，當使用熱壓脂溶萃取時，7種黃酮類化合物的含量在脂溶萃取中超過了水溶萃取。KairHartonen等[28]用熱壓水萃取法從白楊中萃取了黃酮類化合物，考察了萃取時間、溫度和壓力等因素的影響，並與超聲波萃取、高速逆流色譜做了比較，結果表明用熱壓水萃取法在150℃萃取35min效 果最好。
2.9 高壓液相提取法
Ying Zhang等[29]通過高壓液相萃取法從魚腥草中萃取了黃酮類化合物，研究了乙醇濃度、流速、溫度和壓強等因素的影響，並與熱浸法和超聲波輔助萃取法進行對比，發現高壓液相萃取法提取效果較好，當使用50% 乙醇，溶劑流速為1.8mL/min，溫度為70℃，壓強為8MPa 時，黃酮類化合物的得率和濃度可以達到3.152% 和23.962%

『陸』 如果採用乙醇浸漬法提取某植物材料中的總黃酮，需要使用到迴流裝置嗎還是直接設置好水浴溫度浸漬就可以

冷凝管就好了，總不能讓乙醇跑了吧。哪種加熱方法都行，但是要讓乙醇沸騰，保持恆溫。料液比1:5--1:10都行。最後乙醇與黃酮分離肯定要分流的。

『柒』 乙醇迴流提取黃酮所需器材及過程

索氏提取器。

過程：用濾紙包住要提取的東西，放在提取管中，乙醇放在燒瓶里。通冷凝水，加熱迴流。

『捌』 黃酮類化合物的分離

較常用的分離方法有：\x0d（一）柱層析法\x0d分離黃酮類化合物常用的吸附劑或載體有硅膠、聚醯胺及纖維素粉等.此外,也有用氧化鋁、氧化鎂及硅藻土等.\x0d1.硅膠柱層析：\x0d此法應用范圍最廣,主要適於分離異黃酮、二氫黃酮、二氫黃酮醇及高度甲基化（或乙醯化）的黃酮及黃酮醇類.少數情況下,在加水去活化後也可用於分離極性較大的化合物,如多羥基黃酮醇及其苷類等.\x0d2. 聚醯胺柱層析：\x0d對分離黃酮類化合物來說,聚醯胺是較為理想的吸附劑.其吸附強度主要取決於黃酮類化合物分子中羥基的數目與位置及溶劑與黃酮類化合物或與聚醯胺之間形成氫鍵締合能力的大小.\x0d聚醯胺柱層析可用於分離各種類型的黃酮類化合物,包括苷及苷元、查耳酮與二氫黃酮等\x0d3.葡聚糖凝膠(Sephadex gel)柱層析：\x0d對於,主要用兩種型號的凝膠：Sephadex-G型及Sephadex-LH-20型.\x0d葡聚糖凝膠分離黃酮類化合物的機理是：\x0d分離游離黃酮時,主要靠吸附作用.凝膠對黃酮類化合物的吸附程度取決於游離酚羥基的數目.但分離黃酮苷時,則分子篩的屬性起主導作用.在洗脫時,黃酮苷類大體上是按分子量由大到小的順序流出柱體.\x0d分離游離黃酮主要是吸附作用,極性小到大順序洗脫.\x0d分離黃酮苷類,主要是分子篩作用,分子大到小順序洗脫.\x0d總的洗脫順序：糖多的苷到糖少的苷到游離苷元（極性小到大）\x0d葡聚糖凝膠柱層析中常用的洗脫劑有：\x0d鹼性水溶液（如0.1mol/L NH4OH）,含鹽水溶液(0.5mol/L NaCl等).\x0d醇及含水醇,如甲醇,甲醇-水（不同比例）、t-丁醇-甲醇(3:1)、乙醇等.\x0d其它溶劑：如含水丙酮、甲醇-氯仿等.\x0d二）梯度pH萃取法\x0d梯度pH萃取法適合於酸性強弱不同的黃酮苷元的分離.根據黃酮類苷元酚羥基數目及位置不同其酸性強弱也不同的性質,可以將混合物溶於有機溶劑（如乙醚）後,依次用5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2% NaOH及4%NaOH水溶液萃取,來達到分離的目的.\x0d酸性:7,4-二OH溶於5%NaHCO3液 ) 7-或4-OH （5%Na2CO3液） 一般OH（0.2%NaOH） 5-OH （4% NaOH液）\x0d具黃酮類化合物與鉛鹽生成的沉澱,濾集後按常法懸浮在乙醇中,通入H2S進行復分解,濾除硫化鉛沉澱,濾液中可得到黃酮類化合物.但初生態的PbS沉澱具有較高的吸附性,因此現多不主張用H2S脫鉛,而用硫酸鹽或磷酸鹽,或用陽離子交換樹脂脫鉛.\x0d有鄰二酚羥基的黃酮可與硼酸絡合,生成物易溶於水,可與不具上述結構的黃酮類化合物相互分離.