巴比妥酸實驗裝置圖

A. 什麼是硫代巴比妥酸試驗

硫代巴比妥酸法(TBA test) TBA試驗自1944年由Kohn和Liversedgd提出後即應用於食品和生物材料中脂類氧化的檢測和定量，其應用程度居所有測試方法之首。TBA試驗是用2-硫代巴比妥酸與脂類氧化產物丙二醛作用生成一種粉紅色化合物，此化合物在532nm波長下有最大吸收值。通常將測試結果表示為532nm下的吸光值與丙二醛吸光系數之積，即通常所說的TBA值。 然而TBA試驗的特異性一直受到爭議，其原因有三：①丙二醛僅僅是脂類氧化的某些初級和次級產物再降解形成的低分子量終產物中的其中一種：② 只有含有三個或三個以上雙鍵的多聚不飽和脂肪酸才能進行一系列環化反應繼而生成丙二醛③丙二醛可與除TBA以外的其它分子反應。

B. 緩沖溶液的性質是什麼（實驗）

緩沖溶液是一種能夠抵抗外來少量強酸或者強鹼，從而不會引起PH值發生明顯改變的溶液。緩沖溶液的基本特性是具備相應的緩沖作用，這些特點總結來講就是抗少量水稀釋、抗少量強酸、 抗少量強鹼。

生化研究工作中，為了維持實驗體系的酸鹼度，必須要使用緩沖溶液。因為PH值通常會影響研究成果，所以不能讓PH值發生變化乃至大幅度的變動。不然就會造成酶活性下降甚至全部喪失活性。因此科研工作絕對不能馬虎，特別對於緩沖溶液的制備也是科研試驗中至關重要的環節。那麼是溶液常作為緩沖溶液呢？簡單來說就是由弱酸及其共軛酸鹽組合成的具備緩沖作用的溶液。科研工作和生物化學實驗需要謹慎並且嚴格地選擇緩沖系統，生物緩沖系統包括三羥甲基氨基甲烷、磷酸、 檸檬酸、碳酸、 醋酸、 巴比妥酸等等。這些一般是生化實驗中用的較多的，當然也可以按照實際需求優選其他的系統。
當生物緩沖溶液中的酸和鹽濃度以相同的比例進行增加或者減少時，溶液的PH值不會發生改變。另外如果有酸和鹽濃度相等的情況，此時緩沖液的緩沖效率達到最高的狀態。兩者的比例相差越大，緩沖效率就很低。

C. ph10的氨-氯化銨緩沖溶液實驗原理

ph10的氨-氯化銨緩沖溶液實驗原理：

氨－氯化銨緩沖液(pH10.0)，取氯化銨5.4g，加蒸餾水20ml溶解後，加濃氨水溶液35ml，再加水稀釋至100ml，即得。當往某些溶液中加入一定量的酸和鹼時，有阻礙溶液pH變化的作用，稱為緩沖作用，這樣的溶液叫做緩沖溶液。

生化實驗室常用的緩沖系

主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羥甲基氨基甲烷）等系統，生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因為有時影響實驗結果的因素並不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產生不需要的化學反應。

D. 緩沖比名詞解釋

CH3COOH與CH3COONa組成的緩沖溶液，緩沖比就是這兩個物質的物質的量比值。

在生化研究工作中，常常需要使用緩沖溶液來維持實驗體系的酸鹼度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果「提取酶」實驗體系的pH值變動或大幅度變動，酶活性就會下降甚至完全喪失。所以配製緩沖溶液是一個不可或缺的關鍵步驟。

緩沖溶液是無機化學及分析化學中的重要概念，緩沖溶液是指具有能夠維持PH相對穩定性能的溶液。pH值在一定的范圍內不因稀釋或外加少量的酸或鹼而發生顯著的變化，緩沖溶液依據共軛酸鹼對及其物質的量不同而具有不同的pH值和緩沖容量。

(4)巴比妥酸實驗裝置圖擴展閱讀

生化實驗室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羥甲基氨基甲烷）等系統，生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因為有時影響實驗結果的因素並不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產生不需要的化學反應。

硼酸鹽：硼酸鹽與許多化合物形成復鹽、如蔗糖。

檸檬酸鹽：檸檬酸鹽離子容易與鈣結合，所以存在有鈣離子的情況下不能使用。

磷酸鹽：在有些實驗，它是酶的抑止劑或甚至是一個代謝物，重金屬易以磷酸鹽的形式從溶液中沉澱出來。而且它在pH7.5以上時緩沖能力很小。

E. 華東理工大學本科生有機化學做了哪幾個實驗

基本操作：
薄層色譜 分餾 基本操作-水蒸氣蒸餾實驗 減壓蒸餾實驗 咖啡因的提取 熔點的測定
乙醯苯胺的重結晶
合成與制備：
8－羥基喹啉 巴比妥酸 苯丁醚 苯亞甲基苯已酮 苯佐卡因 從番茄醬中提取番茄紅 蛋黃卵磷脂提取
對硝基苯甲酸 二苯乙烯基甲酮 呋喃甲醇和呋喃甲酸 環己烯 己內醯胺 檸檬烯的提取 肉桂酸 三苯甲醇 微波合成苯乙胺及苯乙胺的拆分 乙酸正丁酯 乙醯苯胺

F. TE緩沖液的作用及用途

TE緩沖液的作用及用途：對DNA的鹼基有保護性，包括提取好的DNA也要放在TE緩沖液中保存。

PH緩沖系統對維持生物的正常pH值，正常生理環境起重要作用。多數細胞僅能在很窄的pH范圍內進行活動，而且需要有緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現的pH變化。在生物體中有三種主要的pH緩沖體系，它們是蛋白質、重碳酸鹽緩沖體系和磷酸鹽緩沖體系。每種緩沖體系所佔的分量在各類細胞和器官中是不同的。

TE緩沖液的成分：

生化實驗室常常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羥甲基氨基甲烷）等系統，在生化實驗或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系，因為有時影響實驗結果的因素並不是緩沖液的pH值，而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥甲基甲烷等緩沖劑都可能產生不需要的反應。

其主要缺點時溫度效應。這點往往被忽視，在室溫pH是7.8的Tris一緩沖液，在4℃時是8.4，在37℃時是7.4，因此，4℃配製的緩沖液拿到37℃測量時，其氫離子濃度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下，緩沖能力差。

以上內容參考：網路—TE緩沖液

G. 巴比妥酸法測水中吡啶空白吸光度一般為多少，標准曲線斜率范圍為多少

固相微萃取技術測定水中的吡啶與靜態頂空方法的比較

吡啶是一種重要的化工原料，可用作生產農葯，如除草劑、殺菌劑、消炎劑、驅蟲劑等，具有強烈惡臭味的雜環化合物,與水互溶，在環境中不易被生物降解，為有毒化學品，長期攝入出現頭暈、頭痛、失眠、步態不穩及消化道功能紊亂，並可發生肝腎損害。我國GB 3828—2002《地表水環境質量標准》中把吡啶納入飲用水源地特定項目，標准限值為0.2

[1][2]mg/L。推薦的檢測方法是巴比妥酸分光光度法和靜態頂空(SHS)-氣相色譜法。巴比妥酸分光光度法需要使用劇毒的氰化鉀，前處理比較繁瑣，靈敏度低;頂空氣相色譜法主要適用於廢水的分析，使用填充柱，但目前填充柱已被商品化的毛細管柱替代。現在，也有研究人員用直接固相微萃取結合氣相色譜進行吡啶的分析。

固相微萃取(SPME)技術是20世紀90年代發展起來的一種集萃取、濃縮、進樣於一體的樣品前處理新方法，操作簡單方便，分析時間短，樣品需要量小，無需萃取溶劑。與氣相色譜、高效液相色譜等儀器聯用,可快速有效地分析樣品中痕量有機物。SPME-GC聯用是

[3-5]目前較成熟的技術之一。本文擬通過測定水中的吡啶來研究固相微萃取儀的特性、影響因素及使用中的注意事項，並將這一低成本的技術與自動頂空-毛細柱法相比較，選擇最合適的分析方法

H. 關於抗逆性實驗中隸屬值計算問題

植物組織中的丙二醛(MDA)在酸性條件下加熱可與硫代巴比妥酸(TBA)產生顯色反應,反應產物為粉紅色的3,5,5一三甲基惡唑2,4一二酮(Trimet—nine).該物質在539nm波長下有吸收峰.由於硫代巴比妥酸也可與其它物質反應,並在該波長處有吸收,為消除硫代巴比妥酸與其它物質反應的影響,在丙二醛含量測定時,同時測定600nm下的吸光度,利用539nm與600nm下的吸光度的差值計算丙二醛的含量.植物組織丙二醛含量測定植物葉片在衰老過程中發生一系列生理生化變化,如核酸和蛋白質含量下降、葉綠素降解、光合作用降低及內源激素平衡失調等.這些指標在一定程度上反映衰老過程的變化.近來大量研究表明,植物在逆境脅迫或衰老過程中,細胞內活性氧代謝的平衡被破壞而有利於活性氧的積累.活性氧積累的危害之一是引發或加劇膜脂過氧化作用,造成細胞膜系統的損傷,嚴重時會導致植物細胞死亡.活性氧包括含氧自由基.自由基是具有未配對價電子的原子或原子團.生物體內產生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羥自由基(OH·)、過氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、過氧化氫（H2O2）、單線態氧（O21）等.植物對活性氧產生有酶促和非酶促兩類防禦系統,超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶POD和抗壞血酸過氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防禦系統的重要保護酶,抗壞血酸(ASA)和還原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防禦系統中的重要抗氧化劑.丙二醛(MDA)是細胞膜脂過氧化作用的產物之一,它的產生還能加劇膜的損傷.因此,丙二醛產生數量的多少能夠代表膜脂過氧化的程度,也可間接反映植物組織的抗氧化能力的強弱.所以在植物衰老生理和抗性生理研究中,丙二醛含量是一個常用指標.[材料、儀器、葯品]1．材料：植物抗逆性鑒定實驗中的四種菠菜樣品,即綠色和黃色葉片的高溫處理和室溫對照.2．儀器：(1)分光光度計；(2)離心機；（3）水浴鍋：(4)天平；(5)研缽；(6)剪刀；(7)5ml刻度離心管；(9)刻度試管(10ml)；(10)鑷子；(11)移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱.3．葯品：(1)0.05mol/LpH7.8磷酸鈉緩沖液；(2)石英砂；(3)5％三氯乙酸溶液：稱取5g三氯乙酸,先用少量蒸餾水溶解,然後定容到100ml；(4)0.5％硫代巴比妥酸溶液：稱取0.5g硫代巴比妥酸,用5％三氯乙酸溶解,定容至100ml,即為0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液.[方法]1．丙二醛的提取：取0.5g樣品,加入2ml預冷的0.05mol/LpH7.8的磷酸緩沖液,加入少量石英砂,在經過冰浴的研缽內研磨成勻漿,轉移到5ml刻度離心試管,將研缽用緩沖液洗凈,清洗也移入離心管中,最後用緩沖液定容至5ml.在4500轉/min離心10min.上清液即為丙二醛提取液.2．丙二醛含量測定：吸取2ml的提取液於刻度試管中,加入0.5％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml,於沸水浴上加熱10min,迅速冷卻.於4500轉/min離心10min.取上清液於532、600nm波長下,以蒸餾水為空白調透光率100%,測定吸光度.3．結果計算：(A532—A600)×V1×V1.55×10-1×W×V2丙二醛含量（nmol/g）=式中：A為吸光度；V1為反應液總量(5m1)；V為提取液總量(5ml)；V2為反應液中的提取液數量(2ml)；W為植物樣品重量(0.5g)；1.55×10-1為丙二醛的微摩爾吸光系數（在1升溶液中含有1μmol丙二醛時的吸光度）.4．注意事項：(1)0.0.5％的三氯乙酸對MDA—TBA反應較合適,若高於此濃度,其反應液的非專一性吸收偏高；(2)MDA—TBA顯色反應的加熱時間,最好控制沸水浴10~15min之間.時間太短或太長均會引起532nm下的光吸收值下降；(3)如用MDA作為植物衰老指標,首先應檢驗被測試材料提取液是否能與TBA反應形成532nm處的吸收峰.否則只測定532、600nm兩處A值,計算結果與實際情況不符,測得的高A值是一個假象；(4)在有糖類物質干擾條件下(如深度衰老時),吸光度的增大,不再是由於脂質過氧化產物MDA含量的升高,而是水溶性碳水化合物的增加,由此改變了提取液成分,不能再用532nm、600nm兩處A值計算MDA含量,可測定510、532、560nm處的A值,用A532一(A510—A560)/2的值來代表丙二醛與TBA反應液的吸光值.

I. 小白鼠試驗

小白鼠進行游泳訓練建立過度訓練模型。實驗結果：經過不同強度的游泳訓練後，過度訓練組血漿ET(內皮素)的含量(204.76±26.12pg/ml)顯著高於對照組(172.89±40.03pg/ml)；血漿CGRP(降鈣素相關肽)含量(84.06±28.69pg/ml)顯著低於對照組(142.30±40.40pg/ml)和一般訓練組(151.41±81.79pg/ml)；ET/CGRP(2.71±0.96)顯著高於對照組(1.65±1.10)和一般訓練組(1.76±0.96)。
一般訓練組血漿ET、CGRP和ET/CGRP與對照組相比，雖然有所上升，但無顯著性差異。結果表明：過度訓練可使機體分泌ET增多，而分泌CGRP減少；過度訓練導致ET和CGRP的分泌失調,可能是過度訓練引起運動性高血壓的病理生理機制，動態觀察血漿ET和CGRP對過度訓練的診斷與預防有一定的指導意義。

一、實驗對象

實驗用昆明種雄性小白鼠38隻，體重為17～20 G，由河北醫科大學實驗動物室提供，將動物隨機分為三組，分別是:維生素E組(n＝12)，中葯組(n＝15)和生理鹽水對照組(n＝11)， 三組同時灌胃喂服20天，維生素E(上海第九制葯廠產品) 日給量100 mg/kg*d，中葯為復方刺五加液(河北省人民醫院配製)日用量為刺五加300 mg/kg*d以及五味子700 mg/kg*d；每隻動物用生理鹽水為0.5 ml/d， 實驗期間所有運動的喂養如常不變。

二、實驗方法

在灌服20天後(小鼠體重增至30～32 g，三組間無差別)，三組動物同池游泳，水溫22℃，水深約為小鼠體長2倍，室溫18℃，小鼠游泳至力竭取出斷頭處死，留腦，心、肝、腎和股四頭肌組織，放入4 ℃預冷的生理鹽水內洗凈血液，用濾紙吸干， 分別稱重，並用4℃預冷的生理鹽水在組織研磨器中分別製成10%腦勻漿，5%心、肝、腎勻漿和20% 肌肉組織勻漿備測丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)之用。

小鼠游泳至衰竭的標准規定為:動物不能在水中保持上浮， 開始下沉，取出後尾部受刺激逃避呈踉蹌步態，身體不能保持平衡。但呼吸心跳存在。

三、主要試劑與儀器(從略)

四、檢測方法

1.脂質過氧化物的測定:以硫代巴比妥酸比色法〔4〕分別測定各樣本內MDA的含量。

2.超氧化物歧化酶測定(SOD):採用鄰苯三酚自氧化法〔5〕。

五、統計方法

兩實驗組分別與對照組各指標均數間相互比較，應用t檢驗。所有數據應用CASIO—3600P計算器程序處理。

結 果

一、實驗組與對照組運動耐力比較

見表1。以最大運動時間作為衡量耐力的指標，在相同游泳條件下，二實驗組分別與對照組相比較，動物游泳至力竭的平均時間均無顯著差別。

表1 實驗組與對照組運動耐力比較

組 別
平均最大游泳時間(分*秒)
對 照 組 50.45(50.27)
維生素E組 49.08(49.05)*
中 葯 組 48.93(48.55)*

注 與對照組比較 * P＜0.05

J. 含氰廢水如何處理

含氰廢水是廢水組成中含有各種氰化物的一類廢水的統稱。

氰基與金屬的絡合能力很強，因此氰根（CN-）作為強絡合劑被廣泛應用於氰化提金、氰化金屬電鍍等工藝；同時氰化物作為一種重要的化工原料廣泛用於合成纖維、染料製造、合成橡膠、煉焦及有機玻璃等工業。

氰化物毒性極強，如果不對含氰廢水進行處理，將廢水直接排放，將會對人類、牲畜、植物造成極大危害。因此，從生物安全和環境工程角度考慮必須對含氰廢水進行處理。

將含氰廢水由中、高濃度降到低濃度，處理難度小，工藝比較成熟，一般採用酸化揮發-鹼吸收法、膜法、鐵鹽絡合沉澱法等回收氰化物的方法便可將廢水中的含氰量降至20mg/L 以下。

含氰廢水治理的難點在於處理低濃度含氰廢水使之達到排放要求。本課題所處理的廢水中氰含量為150mg/L，屬於中低濃度含氰廢水，針對活性炭催化氧化法與臭氧法各自的缺點，本課題在上述2 種方法基礎上取長補短，提出使用活性炭催化臭氧化技術來處理含氰廢水。

1、實驗部分

1.1 活性炭預處理

活性炭在使用前先用大量的蒸餾水浸泡4 h，然後將洗凈的活性炭置於真空乾燥箱中，於105℃下烘乾後至恆重，過篩，挑選不同粒徑的活性炭作為試驗用活性炭。

1.2 實驗裝置

實驗裝置主要由臭氧發生器、氣液固三相催化臭氧化反應器和臭氧尾氣吸收裝置3部分組成。三相發生器為內徑50 mm、高450 mm的圓柱形玻璃反應器，頂部設置臭氧吸收裝置；外層設置有冷凝水的夾層，以實現控溫效果；底部設置氣體分布器。

1.3 實驗過程

稱取一定量的處理過的活性炭放入裝有1 L模擬含氰廢水的反應器中，臭氧從反應器底部的多孔布氣板通入，分散出氣泡，帶動反應器中的液體循環流動，使催化劑處於流動化狀態。在一定時間間隔內取樣分析。

1.4 檢測方法

液相中臭氧濃度測定使用靛蘭二磺酸鈉(IDS)分光光度法[10]；CN-含量的檢測採用吡啶-巴比妥酸比色法，pH值使用上海雷磁儀器生產的pHSJ-3F酸度計測定。

2、結果與分析

2.1 反應溫度的影響

研究了不同溫度對反應體系的影響，結果如圖1 所示。

圖1 溫度對CN-去除率的影響
由圖1 可知，溫度較低（10~30 ℃）時，隨著溫度的升高，CN-去除速率呈小幅度上升趨勢，說明在較低溫度時，活化能對反應的影響為主導作用。溫度較高（30~55 ℃）時，隨著溫度的升高，CN-去除率有了較大幅度的下降，說明在較高溫度時，活性炭的吸附作用和臭氧的氣液傳質作用要強於活化能對反應的貢獻。反應不適於在高溫下進行，因此，活性炭催化臭氧化降解含氰廢水的適宜溫度為30 ℃。

2.2 活性炭粒徑

考察了活性炭粒徑的大小對處理效率的影響，結果如圖2 所示。

圖2 活性炭粒徑對CN-去除率的影響
由圖2 可知，在實驗顆粒范圍內，活性炭的粒徑大小對處理效果的影響並不明顯。實驗所使用的3 種不同粒徑的活性炭是同類型活性炭，擁有相同的比表面積，只是由於粒徑不同，而具有不同的外表面積。粒徑對CN-處理效果影響不大說明活性炭的外表面積對活性炭的吸附、催化作用影響很小。

2.3 臭氧投加量

通過改變臭氧發生器出口氣體流量，考察了不同臭氧投加量對CN-的去除情況，結果如圖3 所示。

圖3 臭氧投加量對CN-去除率的影響
由圖3 可知，隨著臭氧投加量的增加，CN-去除率有較大程度的增長。隨著臭氧流量的增加，使參與反應的臭氧增加；此外，隨著臭氧流量的增加，氣液界面的面積增大，從而增強了傳質過程，及體系的流化狀態，減小了氣液傳質過程的阻力，提高了CN-的去除率。但隨著臭氧投加量的增大，CN-去除率增長變緩。這說明當臭氧流量較大時，體系的流態化效果與臭氧投加量較小時相比已經得到了極大改善，液相中反應消耗的臭氧可以得到迅速補充，這時氣液傳質已經不是反應的控制因素，因此，再增大臭氧流量，去除效果也不能得到很大提高。因此，臭氧適宜投加濃度為30mg/min。

2.4 活性炭投加量

活性炭加入量對CN-去除率的影響如圖4 所示。

圖4 活性炭加入量對CN-去除率的影響
由圖4 可知，隨著活性炭投加量的增加，CN-去除率逐漸增大。當活性炭投加量為2～10 g 時，其增長的程度最為明顯；當活性炭投加量為14 g/L 時，CN-去除率為96.5%，是單獨臭氧氧化的1.5 倍；當活性炭投加量繼續增大時，增加的程度不明顯，因此，適宜的活性炭投加量為14 g/L。

2.5 pH值

在活性炭催化臭氧化去除CN-過程中，pH 值對活性炭的吸附有一定影響，因此，考察了pH 值對活性炭催化臭氧化去除CN-的影響，結果如圖5 所示。

圖5 pH值對CN-去除率的影響
由圖5 可知，pH 在4～10 范圍時，CN-去除率增長程度最快；當pH=10 時，經過30 min 處理，CN-去除率為99.8%，水體中殘余CN-濃度為0.3mg/L，滿足了氯鹼工業對水質的要求；當pH 值＞10 時，CN-去除率升高不明顯，因此，選擇pH=10。