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細胞遷移實驗裝置

發布時間:2022-04-03 20:41:03

『壹』 求細胞遷移實驗步驟(Transwell或細胞劃痕法都可以)

細胞遷移實驗步驟(Neuroprobe的使用方法)

1.膜預處理
將48.5ml H2O +1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾膠原置於50ml的離心管。在膜的粗糙面用鉛筆做標記,放入上述溶液中4度過夜。
實驗前將膜取出,放入裝有PBS的培養皿中漂洗一遍,再用飢餓培養基洗一遍,吸去培養基後加入新的飢餓培養基,放入37度培養箱中。
2. 處理細胞
將細胞消化,調濃度1×105個/ml,細胞遷移裝置下層加入166μl含有刺激因子的飢餓培養基。小心鋪好膜(粗面朝下),裝好塑料墊,固定上層裝置。上層加入100μl細胞懸液,遷移4-6h。
3. 固定
小心將膜取下來,在用PBS弄濕的濾紙上掛掉光滑面的細胞,在新的濾紙上粗面朝上放置,徹底晾乾。然後再甲醇里粗面朝上固定5min,徹底晾乾。
4. 染色
粗面朝下置於結晶紫染液中30min,取出膜用雙蒸水漂洗一遍,粗面朝上放在載玻片上,數細胞。
這個方法比transwell方便。與boyden chemper法類似。

Transwell法的步驟:
先把小室擦乾凈後在超凈工作台照紫外過夜。如新的小室省略此步。下一步將小室倒扣並小室的底部外側滴加0.1%(還是1%記不清了)的明膠室溫放置20-30分鍾。這是將細胞消化下來,調濃度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培養基。小室上還未乾的明膠甩掉,加細胞放入24孔板里。放入細胞培養箱培養4-6小室。拿出小室甩掉里邊的培養基。小心擦盡小室里邊的細胞(不能碰外邊)。將小室放入裝有600ml結晶紫的24孔板染色1小時。移到空的24孔板後即可在顯微鏡下觀察了。

『貳』 transwell實驗趨化實驗,上下室的兩種細胞培養基不一樣,該怎麼處理好些

摘要 關於培養基問題 需要看下 A B 細胞平時里用的什麼培養基了 能統一最好統一吧 不一樣的話 可以接種前換成一樣的也行

『叄』 如何用transwell進行細胞遷移實驗

Transwell法的步驟:
先把小室擦乾凈後在超凈工作台照紫外過夜。如新的小室省略此步。下一步將小室倒扣並小室的底部外側滴加0.1%(還是1%記不清了)的明膠室溫放置20-30分鍾。這是將細胞消化下來,調濃度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培養基。小室上還未乾的明膠甩掉,加細胞放入24孔板里。放入細胞培養箱培養4-6小室。拿出小室甩掉里邊的培養基。小心擦盡小室里邊的細胞(不能碰外邊)。將小室放入裝有600ml結晶紫的24孔板染色1小時。移到空的24孔板後即可在顯微鏡下觀察了。

細胞遷移實驗步驟(Neuroprobe的使用方法)

1.膜預處理
將48.5ml H2O +1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾膠原置於50ml的離心管。在膜的粗糙面用鉛筆做標記,放入上述溶液中4度過夜。
實驗前將膜取出,放入裝有PBS的培養皿中漂洗一遍,再用飢餓培養基洗一遍,吸去培養基後加入新的飢餓培養基,放入37度培養箱中。
2. 處理細胞
將細胞消化,調濃度1×105個/ml,細胞遷移裝置下層加入166μl含有刺激因子的飢餓培養基。小心鋪好膜(粗面朝下),裝好塑料墊,固定上層裝置。上層加入100μl細胞懸液,遷移4-6h。
3. 固定
小心將膜取下來,在用PBS弄濕的濾紙上掛掉光滑面的細胞,在新的濾紙上粗面朝上放置,徹底晾乾。然後再甲醇里粗面朝上固定5min,徹底晾乾。
4. 染色
粗面朝下置於結晶紫染液中30min,取出膜用雙蒸水漂洗一遍,粗面朝上放在載玻片上,數細胞。
這個方法比transwell方便。與boyden chemper法類似。

『肆』 求助,A549細胞Transwell細胞遷移實驗

現在這個行業發展的不錯,生物實驗技術外包也會跟著發展,比如一些高校或者企業部分實驗不想自己內部開展,或者涉及的設備比較昂貴,技術要求高,都會尋求外包。但是現在競爭也比較大,的得看單位這邊整體做的怎麼樣。
做的比較好的,一般都是上海地區的,你可以看下基爾頓生物。

『伍』 細胞遷移最後的數據處理該怎麼做呢、

每個時間點的距離長度-0h距離=每個時間長度細胞整體遷移的距離,求出均數和標准差,時間為橫軸,遷移距離為縱軸(mm)作圖,並比較初始0h與實驗結束時試驗組與對照組的照片。
想了解更詳細的話可以關注下中洪博元,他們這方面做的很好。

『陸』 Transwell遷移實驗和細胞侵襲實驗有什麼不一樣的地方哪些地方能做

兩者都是分上室下室,上下室中間有聚碳酸酯膜,細胞種在上室,下室有營養成分,唯一不同的是細胞侵襲實驗中,聚碳酸酯膜上室側鋪一層基質膠,用以模仿體內細胞外基質,細胞欲進入下室,先要分泌基質金屬蛋白酶將基質膠降解,才可以通過聚碳酸酯膜。至於具體怎麼做,需要注意什麼,你可以問一下中洪博元,他們專門搞實驗這塊的

『柒』 transwell細胞成團怎麼回事

染色
粗面朝下置於結晶紫染液中30min。小心鋪好膜(粗面朝下)。
4。然後再甲醇里粗面朝上固定5min,徹底晾乾,在新的濾紙上粗面朝上放置,徹底晾乾。拿出小室甩掉里邊的培養基。小心擦盡小室里邊的細胞(不能碰外邊)細胞遷移實驗步驟(Neuroprobe的使用方法)

1.膜預處理
將48.5ml H2O +1。移到空的24孔板後即可在顯微鏡下觀察了.5ml 醋酸+150μL 鼠尾膠原置於50ml的離心管,裝好塑料墊. 固定
小心將膜取下來。這是將細胞消化下來。將小室放入裝有600ml結晶紫的24孔板染色1小時,調濃度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培養基。
3,加細胞放入24孔板里。放入細胞培養箱培養4-6小室。在膜的粗糙面用鉛筆做標記,放入上述溶液中4度過夜。
實驗前將膜取出,放入裝有PBS的培養皿中漂洗一遍,再用飢餓培養基洗一遍,吸去培養基後加入新的飢餓培養基,放入37度培養箱中。
2. 處理細胞
將細胞消化,調濃度1×105個/ml。與boyden chemper法類似。

Transwell法的步驟:
先把小室擦乾凈後在超凈工作台照紫外過夜。如新的小室省略此步。下一步將小室倒扣並小室的底部外側滴加0.1%(還是1%記不清了)的明膠室溫放置20-30分鍾,細胞遷移裝置下層加入166μl含有刺激因子的飢餓培養基,粗面朝上放在載玻片上,數細胞。
這個方法比transwell方便,取出膜用雙蒸水漂洗一遍,固定上層裝置。上層加入100μl細胞懸液,遷移4-6h。小室上還未乾的明膠甩掉,在用PBS弄濕的濾紙上掛掉光滑面的細胞

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