1. 簡述動植物細胞培養裝置各自的特點
植物細胞--光照恆溫培養箱,瓊脂糖培養基(植物激素)
動物細胞--二氧化碳培養箱,動物細胞培養基(常見如DMEN,1640等,多為液體)
2. 細胞培養的設備及環境要求包括哪些
細胞培養專家——齊氏生物認為,你可以從以下幾個方面進行參考:
實驗室
細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受 其它有害因素的影響.細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔,空氣清新,乾燥和無煙塵.細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封閉培養於一室,而洗刷消毒在另一室.
2.常用設施及設備
⑴超凈工作台:也稱凈化工作台,分為側流式,直流式和外流式三大類.
⑵無菌操作間:一般由更衣間,緩沖間和操作間三部分組成.操作間放置凈化工作台及二氧化碳培養箱,離心機,倒置顯微鏡等.緩沖間可放置電冰箱,冷藏器及消毒好的無菌物品等.
⑶操作間:普通培養箱,離心機,水浴鍋,定時鍾,普通天平及日常分析處理物
⑷洗刷消毒間:烤箱,消毒鍋,蒸餾水處理器及酸缸等.
⑸分析間:顯微鏡,計算機及列印機等.
3.培養器皿
常用細胞培養器皿有培養瓶,培養板,培養皿等.常准備量是使用量的三倍.器皿應選擇透明度好,無毒,利於細胞粘附和生長的材料,常用一次性聚苯乙烯材料製品或中性硬度玻璃製品.常用的器皿有下面幾種.
⑴液體儲存瓶:用於儲存各種配製好的培養液,血清等液體,常用規格有500ml,250ml,100ml等幾種.
⑵培養瓶:根據培養細胞種類要求不同培養瓶的形態各異,用於細胞傳代培養的細胞要求瓶壁厚簿均勻,便於細胞貼壁生長和觀察,瓶口要大小一致,口徑一般不小於1cm,允許吸管伸入瓶內任何部位,規格有200ml,100ml,50ml,25ml,10ml等幾種.
⑶培養皿:用於開放式培養及其它用途.分直徑30mm,60mm,120mm等幾種.
⑷吸管:常用的有長吸管和短吸管兩類,長吸管也稱刻度吸管.其改良後管上部有球型刻度稱改良吸管,刻度吸管用於移動液體.常用1ml和10ml兩種.短吸管也叫滴管,分彎頭和直頭兩種.
⑸離心管:離心管是細胞培養中使用最廣泛的器皿,根據用途不同形態各樣,常用於細胞培養的離心管有大腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩類.前者分別為50ml,30ml,15ml;後者則多為10ml和5ml.
⑹其它:如三角燒瓶,燒杯,量筒,漏斗,注射器等.
4.細胞培養溫度
維持培養細胞旺盛生長,必須有恆定而適宜的溫度.不同種類的細胞對培養溫度要求也不同.人體細胞培養的標准溫度為36.5℃±0.5℃,偏離這一溫度范圍,細胞的正常代謝會受到影響,甚至死亡.培養細胞對低溫的耐受力較對高溫強,溫度上升不超過39℃時,細胞代謝與溫度成正比;人體細胞在39-40℃1小時,即能受到一定損傷,但仍有可能恢復;在40-41℃1小時,細胞會普遍受到損傷,僅小半數有可能恢復;41-42℃1小時,細胞受到嚴重損傷,大部分細胞死亡,個別細胞仍有恢復可能;當溫度在43℃以上1小時,細胞全部死亡.相反,溫度不低於0℃時,對細胞代謝雖有影響,但並無傷害作用;把細胞放入25-35℃時,細胞仍能生存和生長,但速度減慢;放在4℃數小時後,再回到37℃培養,細胞仍能繼續生長.細胞代謝隨溫度降低而減慢.當溫度降至冰點以下時,細胞可因胞質結冰受損而死亡.但是,如果向培養液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞碸或甘油),可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存.
5.合適的氣體環境
氣體是哺乳動物細胞培養生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳.氧氣參與三羧酸循環,產生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分.開放培養時一般把細胞置於95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環境中.二氧化碳既是細胞代謝產物,也是細胞生長繁殖所需成分,它在細胞培養中的主要作用在於維持培養基的pH值.大多數細胞的適宜pH為7.2-7.4,偏離這一范圍對細胞培養將產生有害的影響.但細胞耐酸性比耐鹼性大一些,在偏酸環境中更利於細胞生長.但有一些細胞也喜歡偏鹼環境中生長,如成纖維細胞最適合pH是7.4-7.6.每種細胞都有其最適pH值.
3. 大家推薦一下細胞培養需要的一些儀器設備
這些個東西啊,國產的除了離心機——湖南湘儀和上海安亭的還湊合,其他的基本都不行。進口的又死貴,所以做細胞培養就是很燒錢的。
4. 細胞培養自動機什麼部分比較關鍵
當然是機械臂啊,一定要足夠靈敏精確。RORZEREMED的因為是中日合資,其機械臂技術就可以做到。
5. 動物細胞懸浮培養的小型設備有哪些
三角瓶、試劑瓶…
只要保證無菌以及氣體交換就可以。
6. 乏氧細胞培養的裝置怎麼做
選擇DY-H型厭氧培養箱中一個培養罐,以75%酒精消毒。將細胞培養皿放入其中並密封。密閉容器緩慢抽成真空,然後充入95%N%和5 % CO%的混合氣體;再次抽成真空,充入上述混合氣體。在這種條件下氧的濃度約在1-2小時內平衡為1%左右。(僅供參考)
7. 細胞培養常用器材有哪些
1. 超凈工作台
目前絕大部分細胞實驗室使用超凈工作台實現無菌操作,具有操作簡單、安裝方便、佔用空間小且凈化效果很好。安徽人和凈化為您介紹兩種主要超凈工作台-側流式(垂直式)和外流式(水平層流式)。工作原理一般是將室內空氣經粗過濾器初濾,由離心風機壓入靜壓箱,再經高效空氣過濾器精濾,由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區,從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環境。
(1) 側流式工作台:空氣凈化後的氣流由左或右側通過工作檯面流向對側,也有從上向下或從下向上流向對側,形成氣流屏障保持工作區無菌,工作台結構為封閉式;
(2) 外流式工作台:凈化後的空氣面向操作者流動,因而外方氣流不致混入操作,工作台結構為開放式,但進行有害物質實驗操作對操作者不利。超凈工作台應需要定期請有關部門檢查潔凈度,符合要求的超凈工作台其潔凈度應達到100級,用塵埃粒子計數儀檢測粒徑≤5μm的塵埃粒子數量不應超過3.5個/L;空氣流量應控制在0.75-1.0m3/s;細菌菌落數平均<1個,根據無菌狀況必要時需要置換過濾器。
2. 顯微鏡
倒置式顯微鏡是細胞培養實驗室日常工作常規必備設備,主要用於日常了解細胞的生長情況並觀察有無污染發生。如資金允許,建議選用配置有照相系統的高品質相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統或縮時電影拍攝裝置等,可隨時拍攝並記錄細胞生長情況。
3. 培養箱
體外培養的細胞和體內細胞一樣,需要在恆定的溫度下生存,一般最適生長溫度為37℃,溫差變化不應超過±0.5℃。溫度升高2℃時,變不利於細胞生存,溫度達到40℃以上細胞將很快死亡。因此,可精確控溫的恆溫培養箱、CO2培養箱是最佳選擇。
(1) 恆溫培養箱:應選隔水式或晶體管式自控溫培養箱,此類培養箱靈敏度高,溫度控制較穩定。一般的恆溫培養箱價格較便宜,其缺點是只宜於作密閉式培養。
(2) CO2培養箱:目前多數的細胞培養室已廣泛使用。CO2培養箱的優點是能夠提供進行細胞培養時所需要的一定量的CO2(常用濃度為5%),易於穩定培養液pH,適用於開放或半開放培養。使用培養瓶時,為使培養瓶內與外界保持通氣狀態,可將瓶蓋略微旋松,為避免細胞被污染,使用這種培養方式時,培養箱內空氣必須保持清潔,需定期用紫外線照射或酒精消毒,同時培養箱內應放置盛有無菌蒸餾水的水槽,防止培養液蒸發,保持箱內相對濕度在100%。
(3) 細胞培養耗材:培養細胞的器皿可用培養皿、培養板或培養瓶。
4. 烘箱(乾燥箱)
用於細胞培養的一些器械、器皿必須烘乾後才能使用,玻璃器皿等須乾熱消毒。乾熱消毒時,烘箱內溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫後鼓風而應鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒後不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下後可開門。
5. 水純化裝置
細胞培養對水的質量要求較高,細胞培養、細胞培養相關液體的配製用水以及清洗細胞培養器皿用水都必須事先經過嚴格的純化處理。目前有多種純化方法相結合,可使普通水純化為純水和超純水的純水裝置使用非常靈活方便,可掛壁式、台式、可配儲水箱、也可直接用分液槍、還可根據各類實驗用水要求選擇配置殺菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉熱源、內毒素的超濾型純水裝置。
6. 冰箱
細胞培養實驗室必備設備,應專用,不得存放易揮發、易燃燒等對細胞有害的物質,且應保持清潔。一般包括普通冰箱、低溫冰箱和超低溫冰箱。
普通冰箱:儲存培養液、生理鹽水、Hanks液試劑等培養用的物品,可短期保存組織樣本。
-20℃低溫冰箱、超低溫冰箱:用於儲存需要冷凍以保持生物活性以及需長時期存放的制劑,如酶、血清等。
7. 細胞冷凍儲存器
儲存器常用的液氮容器,根據使用需要分為不同類型和規格。選擇液氮容器時需要考慮三個因素:容積大小、取放使用方便、液氮揮發量。液氮容器的大小一般在25-500L,可以儲存1ml的凍存管250-15000個左右。液氮溫度最低文帝可達-196℃,使用時應注意避免凍傷。由於液氮易揮發,需注意觀察剩餘液氮量,及時補充,避免液氮不足使細胞受損或死亡。目前有許多智能型細胞冷凍儲存器可供選擇,可配置有電子控制器的液氮儲存器,實現凍存自動化;並可監測液氮水平和樣品溫度,確保樣品溫度始終處於設定溫度點;可配置報警系統,設置液氮液面、溫度、電池、電壓、電源等失常情況下報警;同時具備熱氣體旁路系統,防止高於-130℃的暖空氣進入液氮罐,從而更有效地保護樣品,防止容器內升溫。另外,可選擇液氮供應罐通過連接管給儲存罐補充液氮,保證樣品安全。
8. 離心機
細胞培養時,通常使用離心機制備細胞懸液、調整細胞密度、洗滌和收集細胞。一般常規配置4000rpm台式離心機;若要做細胞沉降,需要使用80-100G離心力,因為離心力過大會損傷細胞。根據不同要求,有大容量、可調溫度離心機、高速離心機和低溫冷凍離心機等更多功能離心機可選擇。
9. 天平
常用的有精密天平和分析天平。分析天平的精確度一般為0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根據取樣量量和精度要求選擇合適的天平:取樣量大於100mg宜選用精確度0.1mg的天平;取樣量100-10mg,選用精確度0.01mg的天平;取樣量10mg宜選用精確度0.001mg的天平。天平需要定期校準,可選擇有自動校準功能的天平,方便維護。天平使用需要注意清潔,避免腐蝕性粉末、液體直接接觸稱量台。答案來自
8. 動物細胞培養的設備及儀器有哪些
動物細胞培養的設備及儀器有哪些
⑴超凈工作台:也稱凈化工作台,分為側流式,直流式和外流式三大類.
⑵無菌操作間:一般由更衣間,緩沖間和操作間三部分組成.操作間放置凈化工作台及二氧化碳培養箱,離心機,倒置顯微鏡等.緩沖間可放置電冰箱,冷藏器及消毒好的無菌物品等.
⑶操作間:普通培養箱,離心機,水浴鍋,定時鍾,普通天平及日常分析處理物
⑷洗刷消毒間:烤箱,消毒鍋,蒸餾水處理器及酸缸等.
⑸分析間:顯微鏡,計算機及列印機等.
9. 細胞培養用到的儀器
玻璃瓶(裝細胞懸浮液) 玻璃棒(攪拌細胞濃液 使其分布均勻)剪刀(剪碎細胞組織) 液體培養基(裝細胞) 就這些了
10. 游戲王外星人卡組的「A」細胞培養裝置的問題
「A」細胞培養裝置
效果:每次從場上A指示物被取除,給這張卡放置1個A指示物。這張卡被破壞時,這張卡放置的全部A指示物給場上表側表示存在的怪獸放置。
沒說可以自行破壞,所以不行