⑴ 柱色譜干法,分離亞甲基藍和甲基橙
後面那個甲基橙為什麼比亞甲基藍長是因為甲基橙極性大,吸附能力強,洗脫劑對其脫附能力小,所以很難洗下來,收集更多體積才能收集大部分甲基橙。
⑵ 柱色譜分離1:1的熒光黃和鹼性湖藍BB混合物,結果分離出的熒光黃遠多於湖藍BB,這是什麼原因造成的
理論上是通的,但在應用上存在區別。薄層法一般使用揮發性非極性較強的展開液而柱色譜法通常使用極性溶劑作流動相,在固定相上也有區別,薄層法使用極性較強的固定相而柱色譜法使用極性較弱的固定相。這是根本的區別。所以柱色譜法也叫反相色譜法。現在使用正相色譜法是越來越少了。
⑶ 甲基橙和亞甲基藍的柱色譜分離的實驗原理是什麼
實驗原理:利用甲基橙和亞甲基藍在中性氧化鋁的保留時間差異,實現二者的分離。
所用色譜管為內徑均勻、下端縮口的硬質玻璃管,下端用棉花或玻璃纖維塞住,管內裝有吸附劑。色譜柱的大小,吸附劑的品種和用量,以及洗脫時的流速,均按各單體中的規定。吸附劑的顆粒應盡可能保持大小均勻,以保證良好的分離效果,除另有規定外通常多採用直徑為0.07-0.15mm的顆粒。吸附劑的活性或吸附力對分離效果有影響,應予注意。
柱色譜分離
吸附劑的填裝干法:將吸附劑一次加入色譜管,振動管壁使其均勻下沉,然後沿管壁緩緩加入開始層析時使用的流動相,或將色譜管下端出口加活塞,加入適量的流動相,旋開活塞使流動相緩緩滴出,然後自管頂緩緩加入吸附劑,使其均勻地潤濕下沉,在管內形成松緊適度的吸附層。操作過程中應保持有充分的流動相留在吸附層的上面。濕法:將吸附劑與流動相混合,攪拌以除去空氣泡,徐徐傾入色譜管中,然後再加入流動相,將附著於管壁的吸附劑洗下,使色譜柱表面平整。俟填裝吸附劑所用流動相從色譜柱自然流下,液面將柱表面相平時,即加試樣溶液。
試樣的加入除另有規定外,將試樣溶於層析時使用的流動相中,再沿色譜管壁緩緩加入。注意勿使吸附劑翻起。或將試樣溶於適當的溶劑中。與少量吸附劑混勻,再使溶劑揮發去盡後使呈鬆散狀;將混有試樣的吸附劑加在已制備好的色譜柱上面。如試樣在常用溶劑中不溶解,可將試樣與適量的吸附劑在乳缽中研磨混勻後加入。
洗脫除另有規定外,通常按流動相洗脫能力大小,遞增變換流動相的品種和比例,分別分部收集流出液,至流出液中所含成分顯著減少或不再含有時,再改變流動相的品種和比例。操作過程中應保持有充分的流動相留在吸附層的上面。
⑷ 柱色譜法分離熒光黃和亞甲基藍的試驗中,在分離亞甲基藍後,為什麼再溶解熒光黃時要在水中加入少量的鹽酸
鹽酸可以增大極性,使熒光黃快速分離,縮短時間
⑸ 柱色譜法分離甲基橙和亞甲基藍實驗裝柱不均勻或有氣泡裂縫有什麼後果
1、裝柱不均勻會造成待分離組分在柱子中走過的路徑不一樣,峰展寬,不能快速干凈的洗脫出來,容易混雜其他組分;
2、氣泡:裝柱時一定要把氣泡趕盡,因為柱子中的組分會由於洗脫液的洗脫隨壓力和吸附能力被洗脫流出,要產生氣泡則產生負壓,組分無法流出;
3、裂縫:柱子出現裂縫則無法施加外壓
4、洗脫劑的選擇是依據相似相溶的原理,所以極性大的組分容易被極性大的洗脫劑洗脫下來.
⑹ 柱色譜法分離甲基橙和亞甲基藍的問題
1、裝柱不均勻會造成待分離組分在柱子中走過的路徑不一樣,峰展寬,不能快速干凈的洗脫出來,容易混雜其他組分;
2、氣泡:裝柱時一定要把氣泡趕盡,因為柱子中的組分會由於洗脫液的洗脫隨壓力和吸附能力被洗脫流出,要產生氣泡則產生負壓,組分無法流出;
3、裂縫:柱子出現裂縫則無法施加外壓
4、洗脫劑的選擇是依據相似相溶的原理,所以極性大的組分容易被極性大的洗脫劑洗脫下來。
⑺ 柱色譜實驗中甲基橙和亞甲基藍哪個先洗脫下來為什麼
用極性小的溶劑(如乙醇)洗脫時,亞甲基藍流出最快,先洗脫下來,而甲基橙的流動緩慢。
用極性大的溶劑(如氨水或者水)洗脫時,甲基橙流出最快,先洗脫下來,而亞甲基藍的流動緩慢。
物質與吸附劑之間的吸附能力大小既與吸附劑的活性有關,又與物質的分子極性有關。分子極性越強,吸附能力越大,分子中所含極性基團越多,極性基團越大,其吸附能力也就越強。
(7)柱色譜熒光黃和亞甲基藍的分離實驗裝置圖擴展閱讀
在進行吸附柱色譜分離時,應根據樣品的性質、吸附劑的性能、流動相的極性三方面的影響因素加於選擇。
一般的選擇規律是:樣品極性較大,在極性吸附劑柱上進行分離,則應選用吸附性較弱(即活性較低)的吸附劑,用極性較大的溶劑進行洗脫。組分的極性較弱,就應選用吸附性較強(即活性較高)的吸附劑,用極性較小的溶劑進行洗脫。
化合物極性與其結構有關,按結構的特徵,各種有機物的極性大小順序為:烷烴 <烯烴 <醚類 <硝基化合物 <酯類 <酮類 <醛類 <胺類 <醇類 <酚類 <酸類。
常用溶劑的極性大小順序為:石油醚 < 環己烷 < 四氯化碳 < 苯 < 乙醚 < 乙酸乙酯 < 丙酮 < 乙醇 < 水。
⑻ 柱色譜分離亞甲基藍與熒光黃的原理是什麼
相似相容,就是流速不同,就分開了 ...
⑼ 柱層析分離甲基橙和亞甲藍時,黃色色帶是亞甲藍
後面那個甲基橙為什麼比亞甲基藍長是因為甲基橙極性大,吸附能力強,洗脫劑對其脫附能力小,所以很難洗下來,收集更多體積才能收集大部分甲基橙.