❶ 薄层色谱法分离偶氮苯和苏丹三的实验现象有哪些
有顺(Z)-反(E)-异构体。反式为橙红色棱形晶体,蒸气为深红色,溶于乙醇、乙醚和醋酸,不溶于水。顺式为橙红色片状晶体,不稳定,在常温下慢慢变成反式。偶氮苯有毒,易燃;在碱性条件下还原成氢化偶氮苯,在锌和醋酸中还原成苯胺
❷ 薄层色谱法工作原理
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。
薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。
吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面,吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上,都可能发生吸附现象。
物质分子之所以能在固体表面停留,这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。在固体内部,分子之间相互作用的力是对称的,其力场互相抵消。
(2)薄层色谱分离实验装置扩展阅读:
一、薄层色谱的特点:
灵敏度及分辨率高、分离快速、操作方便、同时分离多个样品、样品预处理简单、设备简单。
由于这些特点,薄层色谱在实际工作中的应用十分广泛。由于通常用薄层色谱分析法进行定量分析的过程中,薄层扫描仪是最为重要的,因此对它进行略详的介绍。
薄层扫描仪的基本结构及主要功能基本是相同的,每台仪器都包括光源、分光器、检测器、数据处理及信号输出几个部分。
二、优点
它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点,同时展开速率快,一般仅需15~20分钟;混合物易分离,分辨力一般比以往的纸层析高10~100倍。
它既适用于只有0.01μg的样品分离,又能分离大于500mg的样品作制备用,而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。
❸ 薄层色谱法实验过程中,点样点过大会有什么结果
薄层板点样点后,经展开剂展开,在原点的样品随展开剂展开的过程斑点会逐渐变大,如果点样的斑点过大,经展开剂展开后斑点将变得更大,斑点变大后极性相近的物质无法达到完全分离,导致薄层层析失败。
在进行薄层实验时,点板的环节很重要,关乎到实验的成败,所以点板时一定有耐心,用力要轻,少量多次,待前面点的样品溶剂挥干后再点第二次,斑点的直径最好控制在3mm内。
❹ 什么叫薄层色谱法原理是什么!!急!!
一、薄层色谱法
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。
二、薄层色谱法的基本原理
例如用硅胶和氧化铝作支持剂,其主要原理是吸附力与分配系数的不同,使混合物得以分离。当溶剂沿着吸附剂移动时,带着样品中的各组分一起移动,同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。
由于各组分在溶剂中的溶解度不同,以及吸附剂对它们的吸附能力的差异,最终将混合物分离成一系列斑点。如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开,则可以根据这些已知化合物的Rf值(后面介绍Rf值)对各斑点的组分进行鉴定,同时也可以进一步采用某些方法加以定量。
(4)薄层色谱分离实验装置扩展阅读:
薄层色谱法(TLC)薄层色谱具有选用范围广,重现性好等优点,常用于中药各种成分的鉴别。
用固定波长对薄层展开的各斑点作薄层扫描图谱比目测的层析图谱更为客观准确,因而具有更好的指纹鉴别意义。但由于受薄层板的质量和开放式层析系统等外界因素的影响,易引起一定的实验误差。
薄层色谱法与纸层析和纸层析比较TLC快速、分离效率高、灵敏度高、显色方法多样、图像易保存。
❺ 做薄层色谱法实验时,在展开操作中应注意哪些事项
1、展开室应预先用展开剂饱和
2、点样后,应待溶剂挥发完,再放入展开室中展开
3、展开剂不可浸过样点。
❻ 薄层色谱实验为什么要在密闭容器中进行
在密来闭容器中进行为了自防止溶剂挥发,使溶剂的蒸汽压在密闭容器中迅速达到平衡,防止溶液跑样不均匀。
薄层色谱法(TLC),系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层,待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比;
用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法,薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。
薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析、薄层分配层析、薄层离子交换层析、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。
吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面,吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。
在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上,都可能发生吸附现象。
❼ 关于用薄层层析法分离叶绿体色素 为什么我做了3次实验,都得到6条线
你是想知道步骤吗?
一、提取绿叶中的色素
1、称取5克绿叶,剪碎,放入研钵中
2、向研钵中加二氧化硅和碳酸钙,再加10ML无水乙醇,迅速研磨.
3、将研磨液倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一块单层尼龙布)中进行过滤.将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管塞严.
二、制备滤纸条
将滤纸条的一端剪去两角,并在距这一端1CM处用铅笔画一条细的横线.
三、画滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画出一条细线.待滤液干后,再画一两次.
四、分离绿叶中的色素
将3ML层析液倒入试管中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)轻轻插入层析液中,随后用棉塞塞紧试管口.注意:不能让滤液细线触及层析液.
五、观察与记录
观察试管内滤纸条上出现了几条色素带,以及每条色素带的颜色.
❽ 薄层色谱分析实验
不是长期处于接触状态不会有特别影响的,苏丹Ⅲ苯溶液是比较常用的实验室试剂,一般实验室都有通风设备,不必担心,如果觉得对皮肤啊什么不好的话,通风橱内带手套操作!
❾ 制备薄层色谱法的优缺点是什么 简述制备薄层分离的过程,找出每一步骤的关键操作。
转载:《分析测试网络网》
PTLC的应用体会
PTLC也就是我们通常所说的制备薄层板,对于一些在TLC小板上分离度比较好的化合物,我们可以考虑用制备薄层来进行分离,进而得到单品。这个也算是实验室一种很常规的一种分离方法,大家应该有所体会。
下面就是我做PTLC的过程:
第一,铺板:称取30克的薄层硅胶,加入3倍量的千分之五的CMC-Na沿着一个方向搅匀,搅拌的时间大概在25分钟左右,当然个体存在差异,力气大的可能15分钟也可以搅的很匀。放在窗台晾干24小时也就可以使用了。
第二,洗板:在点样之前,先用纯甲醇把板洗一下,因为硅胶板中有一些杂质本身会影响我们的样品,一般会看到友一层淡黄色的带被推到最前沿,那就是杂质了,这样洗板的目的也就达到了,将洗好的板拿出来放在通风橱吹干待用。
第三,点样:这是关键的一步,若是点样点的不好,会非常影响我们制备薄层板的效果,严重的甚至达不到分离的目的。一般我是将样品溶液10-50mg(点样量不可过多,超载的话在展开的板上出现锯齿状,点也不可砸坏,会大大的影响效果)线性滴加于硅胶板上,尽量不要用水来溶解样品,否则会扩散的很严重,效果不好。
第四,饱和:先把展开剂(展开剂最好不要用水,甲醇等极性打的展开剂,可能会使硅胶,CMC-Na等一起洗下来)(20ml)左右放在展开槽一侧,把PTLC板放在另一侧30分钟进行预饱和,之后将展开剂倾斜倒入另一侧进行展开,这样可以避免边缘效应,目的还是一个,为了使我们的分离效更好。
第五,刮板:将上面展开后的板拿出吹干以后,确定自己要刮的范围,用铅笔画上即可,接着用刀片将所画的范围刮下来即可。将挂下的硅胶用小柱装上,用展开溶剂将其洗出即可,充的话尽量充干净,不然浪费的都是自己的样品啊。
我在制备TLC的时候就是上面的步骤了,这其中可能有一些我想的还不周到的地方,希望大家海涵!
优缺点要有对比才好说吧,
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