薄层色谱实验装置示意图

① 薄层色谱法工作原理

薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。

薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。

物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。

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一、薄层色谱的特点：

灵敏度及分辨率高、分离快速、操作方便、同时分离多个样品、样品预处理简单、设备简单。

由于这些特点，薄层色谱在实际工作中的应用十分广泛。由于通常用薄层色谱分析法进行定量分析的过程中，薄层扫描仪是最为重要的，因此对它进行略详的介绍。

薄层扫描仪的基本结构及主要功能基本是相同的，每台仪器都包括光源、分光器、检测器、数据处理及信号输出几个部分。

二、优点

它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点，同时展开速率快，一般仅需15～20分钟；混合物易分离，分辨力一般比以往的纸层析高10～100倍。

它既适用于只有0．01μg的样品分离，又能分离大于500mg的样品作制备用，而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。

② 薄层色谱实验为什么要在密闭容器中进行

在密来闭容器中进行为了自防止溶剂挥发，使溶剂的蒸汽压在密闭容器中迅速达到平衡，防止溶液跑样不均匀。

薄层色谱法（TLC），系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层，待点样、展开后，根据比移值（Rf）与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值（Rf）作对比；

用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法，薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，也用于跟踪反应进程。

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薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析、薄层分配层析、薄层离子交换层析、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。

在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。

③ 薄层色谱法的主要显色定位方法有哪些

1、在日光下观察，划出有色物质的斑点位置。

2、在紫外灯（254nm或365nm）下观察有无专暗斑或荧光斑属点并记录其颜色、位置及强弱。能发荧光的物质或少数有紫外吸收的物质可用此法检出。

3、荧光薄层板检测，荧光薄层板是在硅胶中掺入了少量荧光物质制成的板。在254nm紫外灯下，整个薄层板呈黄绿色荧光，被测物质由于荧光猝灭作用而呈现暗斑。

4、既无色又无紫外吸收的物质，可采用显色剂显色。

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薄层色谱方法要求硅胶粉末的粒度分布窄、平均粒径约15微米，薄层厚度为250微米左右，支持物一般为玻璃板，也可采用其他适用的物质。

将欲分析的样品溶液以点状或线状加至薄层板上。然后将它插到 一个动相的液体(展开剂)中，使动相向上移动达到色谱分离的目的。

通常把流动相极性小而固定相极性大的体系称为正相薄层色谱法；反之，则把流动相极性大而固定相极性小的体系称为反相薄层色谱法。

与其它色谱方法相比具备如下优点：

①展开时间短，一般只需十至几十分钟。

②操作简单，所用仪器设备也简单，分离效果好。

③显色剂多样化，选择性鉴定能力强。

④ 薄层色谱法，怎么调展开剂使两个靠的很近方的点分开

一般体系都是 氨水 甲醇 二氯甲烷，乙酸乙酯，正己烷（或石油醚）回，如果混合物对酸不稳定就答加一点点氨水，对碱不稳定就加一点点醋酸。

主要看极性吧，需要分离的物质极性大，就多用极性大的试一试，极性小就多用极性小的。一般都是从极性小的开始试。首先你得对你的产物极性有个初步的认识，如果实在判断不出来，就从正己烷：乙酸乙酯=50：1开始慢慢调吧。。。

⑤ 薄层色谱法实验步骤

薄层色谱法的实验步骤包括薄层板的制备、点样、样品的展开和斑点定位.

⑥ 做薄层色谱法实验时，在展开操作中应注意哪些事项

1、展开室应预先用展开剂饱和

2、点样后，应待溶剂挥发完，再放入展开室中展开
3、展开剂不可浸过样点。

⑦ 薄层色谱的实验步骤

薄层板的制备
点样
展开
检视

⑧ 柱色谱法和薄层色谱法实验报告的最后问题与讨论怎么写

在实验中复遇到什么问题，如制何解决的？以及对实验的一些思考
比如做薄层色谱时会想 为什么要预饱和？出现峰拖尾严重该如何处理？ 不同极性的样品对应的展开剂选择？
柱色谱法：柱子装好的重要性？ 注意随时补充洗脱剂，防止走干。

⑨ 薄层色谱法具体操作包括什么步骤

网络答案：http://ke..com/link?url=-ipyhYFViz7e3vy___covtb-7QdWbfWMoIM_W_