㈠ 【求助】有关细胞划痕法操作中不明白的
1、不需要制备基底膜了。
2、最好用无血清培养基洗涤细胞
3、可以用迁移的细胞数来说明细胞迁移能力
4、划痕以后需要洗涤细胞,然后加入条件培养基。
㈡ 细胞划痕实验 是转染之前划还是转染之后划
现在这个行业发展的不错,生物实验技术外包也会跟着发展,比如一些高内校或者企业部分实验不想容自己内部开展,或者涉及的设备比较昂贵,技术要求高,都会寻求外包。但是现在竞争也比较大,的得看单位这边整体做的怎么样。
做的比较好的,一般都是上海地区的,你可以看下基尔顿生物。
㈢ 细胞划痕实验怎么找到原拍照地方
您好,现在这个行业发展的不错,生物实验技术外包也会跟着发展,比如一些回高答校或者企业部分实验不想自己内部开展,或者涉及的设备比较昂贵,技术要求高,都会寻求外包。但是现在竞争也比较大,的得看单位这边整体做的怎么样。
其次要看下你选择单位的规模如何,上海这边的,你可以看下基尔顿生物,原代细胞培养,动物造模,整体课题外包。
㈣ 细胞划痕实验检测侵袭与迁移能力有区别吗
不一样,两者既有区别又有联系。侵袭主要是肿瘤细胞在原发部位的浸润,而迁移是肿瘤细胞随血液或淋巴转移至其他部位。迁移需要肿瘤细胞先通过它们的侵袭能力进入血管或淋巴管道系统,侵袭力越强越容易出现转移。
㈤ 求细胞迁移实验步骤(Transwell或细胞划痕法都可以)
细胞迁移实验步骤(Neuroprobe的使用方法)
1.膜预处理
将48.5ml H2O +1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾胶原置于50ml的离心管。在膜的粗糙面用铅笔做标记,放入上述溶液中4度过夜。
实验前将膜取出,放入装有PBS的培养皿中漂洗一遍,再用饥饿培养基洗一遍,吸去培养基后加入新的饥饿培养基,放入37度培养箱中。
2. 处理细胞
将细胞消化,调浓度1×105个/ml,细胞迁移装置下层加入166μl含有刺激因子的饥饿培养基。小心铺好膜(粗面朝下),装好塑料垫,固定上层装置。上层加入100μl细胞悬液,迁移4-6h。
3. 固定
小心将膜取下来,在用PBS弄湿的滤纸上挂掉光滑面的细胞,在新的滤纸上粗面朝上放置,彻底晾干。然后再甲醇里粗面朝上固定5min,彻底晾干。
4. 染色
粗面朝下置于结晶紫染液中30min,取出膜用双蒸水漂洗一遍,粗面朝上放在载玻片上,数细胞。
这个方法比transwell方便。与boyden chemper法类似。
Transwell法的步骤:
先把小室擦干净后在超净工作台照紫外过夜。如新的小室省略此步。下一步将小室倒扣并小室的底部外侧滴加0.1%(还是1%记不清了)的明胶室温放置20-30分钟。这是将细胞消化下来,调浓度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培养基。小室上还未干的明胶甩掉,加细胞放入24孔板里。放入细胞培养箱培养4-6小室。拿出小室甩掉里边的培养基。小心擦尽小室里边的细胞(不能碰外边)。将小室放入装有600ml结晶紫的24孔板染色1小时。移到空的24孔板后即可在显微镜下观察了。
㈥ 划痕试验和transwell试验在检测细胞迁移能力上的区别
两者都是分上室下室,上下室中间有聚碳酸酯膜,细胞种在上室,下室有营版养成分,唯一不同的是权细胞侵袭实验中,聚碳酸酯膜上室侧铺一层基质胶,用以模仿体内细胞外基质,细胞欲进入下室,先要分泌基质金属蛋白酶将基质胶降解,才可以通过聚碳酸酯膜。至于具体怎么做,需要注意什么,你可以问一下中洪博元,他们专门搞实验这块的
㈦ 求助:谁能告诉我细胞伤口愈合实验和细胞划痕实验是不是一个概念
两个是同一个实验的。测定迁徙来说,划痕试验即可。而要是测定侵袭的话,现在多采用MATRIGEL铺底的TRANSWELL小室实验进行。
㈧ 细胞划痕实验具体步骤
我这个货尿水尿的一般出来情况下是不好处理的,而也很严重的
㈨ 关于细胞划痕实验的分析问题,最近做细胞划痕实验,不知道怎么分析有无意义,还有看文献看别人测量的划痕
好奇怪啊,你都做细胞划痕试验了,居然不知道均数加减标准差。没有学过统计学么?内
任何容实验都不会只做1次。假如在同一个处理组你重复了8次,那就测得8个结果。加一起除以10,就是均数。标准差反映的是这8个数据与均数的偏离程度。比如10±1,这个写法表明你这8个数据的平均值是10,而1代表这8个数据总体上偏离均数10的程度。如果这8个数据都在10左右,那标准差就会很小。如果8个数据里面有些值离10比较远,比如高到20,低到5,这类的值越多,那标准差就会越大。这是我们做实验很不愿意看到的。这说明同一个组的数据太离散,实验的误差比较大,数据就不可信了,而且组跟组之间进行比较时,可能都没有差异了。
至于如何分析有无差别,还是去看看统计学吧,如何进行组和组之间的比较。还要学会使用统计软件。从现在的情况看,lz对统计几乎一无所知,要看的东西太多了。