① 几种常用的缺氧动物模型的复制及中枢神经系统功能抑制和低温对缺氧的影响的实验报告
几种常见的缺氧动物模型及中枢神经系统功能和低温对缺氧的影响
目的 缺氧是多种疾病共有的病理过程。许多原因都能使机体发生缺氧。不同类型的缺氧，其机体的代偿适应性反应和症状表现有所不同。本实验学习复制乏氧性缺氧和血液性缺氧的动物模型方法，观察缺氧过程中呼吸的反应及血液色泽和全身一般情况的变化，并了解温度和中枢神经系统机能状态对缺氧耐受的影响以及对照实验和控制实验条件重要性；初步掌握计量资料的常用统计指标的应用。
材料 小白鼠；100、500ml广口瓶和测耗氧装置；1、2、10ml注射器；50g/L(5g/dl)亚硝酸钠溶液、10g/L(1g/dl)美兰溶液、2.5g/L(0.25g/dl)氯丙嗪溶液(新鲜配制)、生理盐水；CO气体（甲酸加浓硫酸制取）；冰浴、钠石灰、弹簧夹、剪刀、镊子。
方法和步骤
(一)中枢神经系统功能状态和温度对动物耐受缺氧的影响
用氯丙嗪和冰浴处理使动物中枢神经系统功能处于抑制，代谢率降低，为实验组；以生理盐水，室温下处理为对照组。按以下操作步骤进行：
1.取性别相同，体重相近的小白鼠2只，并准确称取体重。按随机分配的原则，将其中1只鼠作为实验组，另一只作为对照组。向实验组鼠按0.1ml/10g体重，腹腔内注射2.5g/L(0.25g/dl)氯丙嗪，(参见常用注射方法腹腔注射法节)安放在冰浴的沙布上10~15分钟，使呼吸频率降为70~80次/分；向对照组鼠腹腔注射生理盐水(0.1ml/10g体重)，放置室温10~15分钟。
2.将2只鼠分别放入100ml的广口瓶内，按图10-11-1和附录连接测耗氧装置。
3.待鼠死亡后，记录存活时间，按附录用测耗氧装置测定总耗氧量。根据总耗氧量A（ml），存活时间T(min)，鼠体量W(g)三项指标，求出总耗氧率R(ml/g/min)。
公式：R(ml/g/min)=A(ml)÷W(g)÷T(min)
4.数据统计处理。在老师指导下，收集各组各项指标的原始数据，列表并进行统计处理：求出各项指标的均数(`x)及标准差(S)，并对实验组和对照组的存活时间(T)和总耗氧率(R)的均数差异作显著性测验(t测验)（参见统计分析简介）。
(二)不同原因造成不同的缺氧类型
1.密闭瓶中呼吸
（1）取小鼠一只，数正常呼吸频率(次/10秒)，并注意深度。观察活动一般情况及耳、尾、口唇的颜色。
图10-11-1 缺氧瓶和测耗氧装置
（2）将鼠放入含钠石灰(约5g)的100ml广口瓶内，待安静后塞紧瓶塞，开始记录时间，以每隔5分钟间隔数呼吸频率(次/10秒)一次，并观察行为（如挣扎、痉挛等）和耳、尾、口唇的颜色变化，直至动物死亡，尸体留待打开腹腔观察。
2.吸入CO
（1）取小鼠一只，数正常呼吸频率(次/10秒)，并注意深度。观察活动一般情况及耳、尾、口唇的颜色。
（2）将鼠放入500ml广口瓶内，塞紧瓶塞，用10ml针筒抽取CO气体10ml，注入刚密闭的广口瓶内，形成2%CO之空间环境，开始记录时间，观察方法与指标同1之（2）项。
3.输入亚硝酸盐
（1）取体重相近的鼠2只，数呼吸频率和观察皮肤粘膜色泽。向腹腔内各注射50g/L(5g/dl)亚硝酸钠0.2ml后，立即向其中一只腹腔内再注射10g/L(1g/dl)美兰溶液0.2ml，另一只注射生理盐水0.2ml。
（2）观察方法与指标同1之(2)项，并观察两鼠表现及死亡时间有无差异。
将以上4只死鼠的腹腔打开，取下小块肝组织置滤纸片上一起进行血液或肝脏颜色比较。
注意点
1.缺氧瓶和测耗氧量装置必须完全密闭不漏气。
2.小鼠腹腔注射部位应稍靠左下腹，勿损及肝脏。还应避免将药液注入肠腔或膀胱。
3.实验组鼠应在氯丙嗪注射后稍平静时放在冰浴的纱布上，放留时间的长短，以呼吸频率降为70－80次/分为宜。随时观察鼠，以防溺水死亡。
结果 记录各项实验结果的数据，原始数据列表，进行统计处理，主观指标用文字记录。分析和探讨各处理因素的作用及机制。
思考题
1.密闭瓶内鼠，一氧化碳中毒鼠及亚硝酸钠中毒鼠各属何种类型缺氧？其发生机制有何不同？
2.不同类型缺氧对呼吸和血液颜色的改变是否相同？为什么？
3.低温和抑制中枢神经系统功能为何能增强对缺氧的耐受？
4.为什么要在缺氧瓶内放入钠石灰？这对缺氧机制的分析有何意义？
5.为什么不能只凭实验组和对照组的T、R均数差异来得出缺氧耐受改变的结论？应作何统计处理？
附录 测定小白鼠总耗氧量的测耗氧装置
原理 小白鼠在密闭的缺氧瓶中，不断消耗氧气，而产生的CO2 又被钠石灰吸收，瓶内氧分压逐渐降低而产生负压，当缺氧瓶与测耗氧装置相连时，装置的移液管内液面因瓶内负压而上升，量筒内液面下降的毫升数即为消耗氧的总量。
方法与步骤
1.向量筒内充水至刻度，然后将玻璃管接头与缺氧瓶塞上的一个橡皮管相连。
2.待鼠死后从量筒上读出液面下降的毫升数，即为小白鼠的总耗氧量(A)。
② 小白鼠缺氧实验报告
乏氧性缺氧
又称低张性缺氧，是指以动脉血氧分压降低为基本特征的缺氧。低张性缺氧时，动脉血和静脉血中氧合血红蛋白含量降低，而脱氧血红蛋白增多，而当毛细血管血液中脱氧血红蛋白的平均浓度超过5g/dl时，皮肤和黏膜呈青紫色，即发绀。本组小鼠存活时间为90min，而各组记录数据均有差别，与小鼠个体差异、缺氧瓶的密闭性、钠石灰等有关。较小的小白鼠因个体发育不完全而大脑对呼吸中枢更不敏感，故其缺氧能力常大于较大的小白鼠，即存活时间更长;缺氧瓶的密闭性越好，进入其中的氧就越少，小白鼠存活时间就越短，反之亦然。钠石灰用于吸于甁中CO2以排除CO2的干扰，影响呼吸作用的因素有CO2浓度、H+、低氧，高浓度CO2（PCO2>80mmHg）可抑制呼吸,而低浓度CO2（PCO2<80mmHg）可促进呼吸。由于钠石灰不能有效地吸收CO2而使甁中存有低浓度CO2，即可促进呼吸，故本班各组乏氧性缺氧的小白鼠的存活时间均比前几个班各组的更长。低张性缺氧时小白鼠先发生代偿性反应，PaO2于60—100mmHg时，肺通气量无变化。PaO2低于60mmHg可刺激劲动脉体和主动脉体的外周化学感受器，冲动经窦神经和迷走神经传入延髓，反射性地引起呼吸加深加快。肺通气量增加是急性低张性缺氧的最重要代偿反应。随着缺氧的时间增加，小白鼠即出现呼吸逐渐减弱直至停止死亡。
3.2
CO中毒性缺氧
属血液性缺氧（等张性缺氧），即由于血红蛋白数量减少或性质改变，以致血液携带氧的能力降低或血红蛋白结合的氧不易释出所引起的缺氧。CO是含碳物质未完全燃烧而产生的一种窒息性气体，可与血红蛋白结合成为碳氧血红蛋白而使血红蛋白失去携带氧的能力，抑制红细胞的糖酵解，增加与氧的亲和力，致使小白鼠皮肤黏膜呈现樱桃红色。CO中毒性缺氧属等张性缺氧，呼吸系统的代偿不明显，故观察到小白鼠的呼吸逐渐减弱直至停止死亡。CO为有毒性气体，在实验过程中注意通风，须注意浓硫酸与HCOOH小心吸取以防伤及自己及其它物品，加热时不能过猛，以免CO产生过多、过快，使小白鼠迅速死亡，来不及观察。本组小白鼠没有抢救及时以致小白鼠最后死亡。
3.3
亚硝酸钠中毒性缺氧
也属血液性缺氧（等张性缺氧）。亚硝酸盐可使大量血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，而高铁血红蛋白呈棕褐色，故甲鼠的皮肤黏膜呈咖啡色;乙鼠注入美兰，美兰是一种还原剂，可将Fe3+还原为Fe2+，具有解毒作用，可使亚硝酸钠中毒的小白鼠解救且皮肤黏膜颜色逐渐接近正常，而本组乙鼠30min后死亡，可能因为给药不及时抢救速度过慢，且注入的美兰流出小鼠体外而不能起到解毒作用导致小鼠死亡。亚硝酸钠中毒性缺氧属等张性缺氧，但本组可能合并了PaO2降低而观察到小白鼠呼吸系统的代偿性反应，即先出现呼吸加深加快。本实验过程中腹腔内注射应稍靠左下腹，勿伤及肝脏，也应避免将药液注入肠腔或膀胱。一氧化碳、亚硝酸钠中毒事故每年都有发生，夺去了多少人的生命。加强预防和改进临床治疗办法是造福于社会的大事，应当高度重视。通过本次实验我们了解了上述几种常见缺氧疾病的基本致病机理和应对办法，这对于我们今后从事这方面疾病的研究和治疗有着重要的意义。
③ 小鼠实验性缺氧实验的分析怎么写
如下：
小鼠跳台实验：跳台实验属一次性刺激回避反应实验.跳台法的实验装置一般为一长方形反射箱,其长径被黑色塑料板隔为若干区间,底部铺以间距为5mm的铜栅,可通适当的电流.每个小的区间有一个高和直径均为4.5cm的小平台.实验时,首先将小鼠放在铜栅上,当铜栅通电时,跳在铜栅上的小鼠受到电击,其正常反应是躲避电击跳上平台,大多鼠有可能再次或多次跳下平台受到电击,受到电击时又会迅速跳回平台.如此训练5min,并记录每只鼠受到电击的次数（错误次数）,以此为学习成绩.24h后重新测验,此次测验时,首先将鼠放在跳台上,记录第一次跳下的时间（潜伏期）、受电击的动物数和3min内的错误次数,以此反映记忆保持情况.
该方法的优点为：操作简便易行,一次可同时观察多只动物,能较客观地反映动物经过一次刺激后记忆获得的情况,尤其适用于药物筛选实验.因为不同的药物引起记忆障碍的机制不同,因而通过观察益智药物对这些模型的药效可分析益智药物的作用机制.缺点：动物的躲避性反应的个体差异较大.
④ 甲醛中毒小鼠呼吸频率
病理生理学实验;【实验目的】; 1．实验动物及器材 小鼠、缺氧瓶(250 ml带塞锥形瓶或广口瓶)、一氧化碳发生装置一套、胶头滴管，1ml注射器、酒精灯、手术剪、眼科镊 2．试剂和药品 甲酸、浓硫酸、1％亚硝酸钠溶液、40%甲醛; 1．动物一般状态、活动情况等 2．呼吸频率(次/10s)、深度。 3．皮肤(口唇)和血液、肝颜色 4．存活时间。;小鼠的捉持;腹腔注射 ;【实验步骤】;乏氧性缺氧
（1）取小鼠一只放入缺氧瓶内。观察动物的一般情况、呼吸、皮肤（口唇）颜色???然后塞紧瓶塞，记录时间。以后每3min重复观察上述指标一次（如有其它变化则随时记录）
（2）待动物死亡后，打开胸腹腔，观察其肝脏颜色并与其他类型的缺氧小鼠比较。;血液性缺氧
一氧化碳中毒性缺氧; 亚硝酸盐中毒性缺氧
（1）取小鼠1只，观察动物的一般情况、呼吸、皮肤与口唇颜色
（2）由腹腔注入2％亚硝酸钠溶液0.8ml, 观察上述指标。观察其颜色。待动物死亡后，打开胸腹腔，观察其肝脏颜色，并与其他类型的缺氧小鼠比较。; 甲醛中毒性缺氧
（1）取小鼠1只，观察动物的一般情况、呼吸、皮肤与口唇颜色。
（2）由腹腔注入40％甲醛溶液0.5ml,后开始计时，并观察上述指标 。待动物死亡后，打开胸腹腔，观察其内脏颜色，并与其他类型的缺氧小鼠比较。;正常对照组;【实验结果】;【注意事项】;实验报告要求