柱色谱实验装置图简约

㈠ 做柱色谱时，为什么待分离物质要与吸附剂混匀

在这个实验中 硅胶是吸附剂 你若不加吸附剂硅胶 两种物质会一起流出来 不会分离
这个实验的原理是不同物质在吸附剂下的吸附脱附速率不一样 当吸附剂足够多距离长 物质会在流动相中产生速度差与距离差 会使物质分离。
举例子理解 当堵车时 ，同一路口不同的车道中的车开始位置相同 可能不同车道堵得不一样 最终两车会在下一路口会产生距离。硅胶就相当于这里面的其他车 可能不恰当 有助于你理解

另外你补充的是拌粉，这个我也不理解 我们实验室中用硅胶分离物质，一般来说，是将两种或多种物质 选择一种合适的溶剂 这两种物质在流动相中与吸附剂中的分配比例不同 最终实现分离。觉得原理类似。可能你的这个直接选择填充吸附剂跟要分离的物质吸附 直接加入流动相即可 我们的是流动相中溶解着要分离的物质 我觉得这样不拌粉也能分离

㈡ 制备色谱如何用

yun0145(站内联系TA)那位高手帮帮忙！！！whate0545(站内联系TA)制备薄层色谱使用薄层色谱板进行制备分离，从混合物中提取所需要的单体。与常用的柱色谱相比，具有简单、快速与节省溶剂与人力的优点，是实验室比较常用的制备方法之一，比较常用的是制备薄层板色谱、制备离心薄层色谱、制备干柱薄层色谱三个类别。
1、 制备薄层板色谱
制备板：一般使用200X200mm的薄层色谱板，吸附剂厚度最好为0.5~1mm，一般不超过2m，平均1mm厚需要的硅胶量为15~20g。为了得到低成本、铺层均匀的高质量制备薄层板，建议使用上海科哲公司的TD-II型全自动制备薄层铺板机。
点样：制备薄层分离的样品量大，一般采用条带点样、不使用圆点点样；一般1mm厚的硅胶最大约100mg，样品浓度不宜太稀，应在2~10%为宜。为了得到均匀而规则的点样结果，建议使用上海科哲公司的SP-3型电动薄层条带点样器。同时展开剂的用量比较大，点样位置要比较高
展开：薄层色谱层析缸要充分饱和，如制备板数量较多，请选用上海科哲公司的制备薄层板架；
显色：一般使用紫外灯或碘蒸汽等非破坏方式显色，或在板边缘进行化学试剂显色；
回收：将检测到的样品连同硅胶一齐刮下，防入砂芯漏斗，使用适当溶剂将组分洗脱，将洗脱溶剂蒸干即可。一般希望洗脱溶剂沸点较低，不与组分发生反应。
制备薄层板色谱优点是使用最为方便、便宜、节省人力，缺点是分离时间较长。
2、 制备离心薄层色谱
与普通制备板有三个不同点：
首先：色谱板是圆的，是径向色谱，分离能力优于方板；
其次：洗脱液的流动不靠毛细现象，靠离心力，减少了分离时间与脱尾，分离效能很高；
最后：洗脱液是连续流动的，可以非常容易的形成梯度，并且不需要刮下吸附层，这样可以使色谱板可以反复使用；
所以，制备离心薄层色谱的分离效能与分离速度要远高于制备薄层板色谱，建议采用上海公司科哲公司的KH-CTLC型制备离心薄层色谱仪。
3、制备干柱薄层色谱
可以看作棒状的薄层色谱，优点是简单易行，快速经济、制备量大。缺点是必须使用可透紫外的管材，而且在收集样品时要割断管材，使费用略高。上海科哲公司提供专用的薄层色谱柱。本方法与真空系统联用，构成减压真空色谱，性能会得到进一步提升。
这三种不同的方法在不同场合都拥有自己的优势，总的来讲，制备薄层板色谱适用于制备量较小、分离程度较好的场合；制备离心薄层色谱适用于制备量中等，分离程度较差的场合；制备干柱薄层色谱用于大量样品制备的场合。三种设备如果互相联用，分离效率会进一步提高。这三种设备也可与柱色谱联用yun0145(站内联系TA)非常感谢，很有用。wszyq1985(站内联系TA)样品量大的话，可以用硅胶住层析；如果样两很少，则制备色谱user53900(站内联系TA):)制备薄层色谱，说起来是相当的简单，呵呵我说说我自己的经验
我上个项目就是提纯分离，考虑到这个制备薄层，结果就用了，但是薄层的最大的缺点就是重复性太小了。我上一批能用薄层制备出来，但是，下次作的制备薄层分离的就不好，因为它的影响因素太多了，比如说温度和湿度，人为的配比，都有一定的误差，说的最直接的就是这一批下来的板子，这快分离所得到的结果，但是下一块就不行，我有过这也的经历。呵呵，日本那边用这个方法的多，但是要有心理准备

㈢ 有机柱色谱实验中，色谱柱中若留有空气或填装不均匀，对分离效果有何影响如何避免

会影响渗透速率和显色的均匀
避免
1，装柱过程中应不断敲打色谱柱。
2，过程中，柱内洗脱剂的液面高度始终不能低于吸附剂最上端。

㈣ 柱色谱实验中,微晶纤维素,乙醇和蒸馏水各起什么作用

主料、溶剂、溶剂。
1、根据查询微晶柱色谱的实验研究报告进展得知，由于纤维素钠具有较强吸湿性所以起到主料的作用。
2、而乙醇是促进微晶纤维素溶于色谱的溶剂。
3、蒸馏水是起辅助溶剂的作用。

㈤ 薄层色谱和柱色谱实验的原理，步骤和注意事项

(1)薄层色谱---自下而上,展开分离!
(2)柱色谱---自上而下,展开分离!
(3)选择适当的展开剂!

㈥ 甲基橙和亚甲基蓝的柱色谱分离的实验原理是什么

实验原理：利用甲基橙和亚甲基蓝在中性氧化铝的保留时间差异，实现二者的分离。
所用色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管，下端用棉花或玻璃纤维塞住，管内装有吸附剂。色谱柱的大小，吸附剂的品种和用量，以及洗脱时的流速，均按各单体中的规定。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀，以保证良好的分离效果，除另有规定外通常多采用直径为0.07-0.15mm的颗粒。吸附剂的活性或吸附力对分离效果有影响，应予注意。
柱色谱分离
吸附剂的填装干法:将吸附剂一次加入色谱管，振动管壁使其均匀下沉，然后沿管壁缓缓加入开始层析时使用的流动相，或将色谱管下端出口加活塞，加入适量的流动相，旋开活塞使流动相缓缓滴出，然后自管顶缓缓加入吸附剂，使其均匀地润湿下沉，在管内形成松紧适度的吸附层。操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。湿法:将吸附剂与流动相混合，搅拌以除去空气泡，徐徐倾入色谱管中，然后再加入流动相，将附着于管壁的吸附剂洗下，使色谱柱表面平整。俟填装吸附剂所用流动相从色谱柱自然流下，液面将柱表面相平时，即加试样溶液。
试样的加入除另有规定外，将试样溶于层析时使用的流动相中，再沿色谱管壁缓缓加入。注意勿使吸附剂翻起。或将试样溶于适当的溶剂中。与少量吸附剂混匀，再使溶剂挥发去尽后使呈松散状;将混有试样的吸附剂加在已制备好的色谱柱上面。如试样在常用溶剂中不溶解，可将试样与适量的吸附剂在乳钵中研磨混匀后加入。
洗脱除另有规定外，通常按流动相洗脱能力大小，递增变换流动相的品种和比例，分别分部收集流出液，至流出液中所含成分显著减少或不再含有时，再改变流动相的品种和比例。操作过程中应保持有充分的流动相留在吸附层的上面。

㈦ 柱色谱法和薄层色谱法实验报告的最后问题与讨论怎么写

在实验中遇到什么问题，如何解决的？以及对实验的一些思考
比如做薄层色谱时会想
为什么要预饱和？出现峰拖尾严重该如何处理？
不同极性的样品对应的展开剂选择？
柱色谱法：柱子装好的重要性？
注意随时补充洗脱剂，防止走干。

㈧ 柱色谱的几个问题

1 没有那种东西……你确定那个塞子后面没有连着气泵或者加压球？不然隔绝了大气专压，液面上压属强减小，只能越流越慢才对。（难道是柱子下面的减压装置……那个塞子是塞在哪里的啊……）

2 （展开剂是对薄层层析和纸层析说的，柱色谱里叫流动相。）分正相色谱和反相色谱。正相色谱的流动相极性大于固定相极性，极性小的待分离物先流出。反相色谱相反。

㈨ 色谱柱的注意事项

色谱柱 的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓（如前所述）。
②应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。
③一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
④选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
⑤避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。
⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。
下面列举一些色谱柱的清洗溶剂及顺序，作为参考：硅胶柱以正已烷（或庚烷）、二氯甲烷和甲醇依次冲洗，然后再以相反顺序依次冲洗，所有溶剂都必须严格脱水。甲醇能洗去残留的强极性杂质，已烷使硅胶表面重新活化。反相柱以水、甲醇、乙腈、一氯甲烷（或氯仿）依次冲洗，再以相反顺序依次冲洗。如果下一步分析用的流动相不含缓冲液，那么可以省略最后用水冲洗这一步。一氯甲烷能洗去残留的非极性杂质，在甲醇（乙腈）冲洗时重复注射100~200μl四氢呋喃数次有助于除去强疏水性杂质。四氢呋喃与乙腈或甲醇的混合溶液能除去类脂。有时也注射二甲亚砜数次。此外，用乙腈、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脱能除去蛋白质污染。
阳离子交换柱可用稀酸缓冲液冲洗，阴离子交换柱可用稀碱缓冲液冲洗，除去交换性能强的盐，然后用水、甲醇、二氯甲烷（除去吸附在固定相表面的有机物）、甲醇、水依次冲洗。
⑦保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
⑧色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。
在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取净）再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相（与柱内相同）填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善，但是很难恢复到新柱的水平。
柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱（5~30mm），可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效，这是值得的。
通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料，只能在pH2~9范围内使用。柱子使用一段时间后，可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶，特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷，使柱效下降，这时也可补加填料使柱效恢复。
每次工作完后，最好用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素（氟、氯、溴）的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触。装在HPLC仪上柱子如不经常使用，应每隔4~5天开机冲洗15分钟。