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细胞迁移实验装置

发布时间:2022-04-03 20:41:03

『壹』 求细胞迁移实验步骤(Transwell或细胞划痕法都可以)

细胞迁移实验步骤(Neuroprobe的使用方法)

1.膜预处理
将48.5ml H2O +1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾胶原置于50ml的离心管。在膜的粗糙面用铅笔做标记,放入上述溶液中4度过夜。
实验前将膜取出,放入装有PBS的培养皿中漂洗一遍,再用饥饿培养基洗一遍,吸去培养基后加入新的饥饿培养基,放入37度培养箱中。
2. 处理细胞
将细胞消化,调浓度1×105个/ml,细胞迁移装置下层加入166μl含有刺激因子的饥饿培养基。小心铺好膜(粗面朝下),装好塑料垫,固定上层装置。上层加入100μl细胞悬液,迁移4-6h。
3. 固定
小心将膜取下来,在用PBS弄湿的滤纸上挂掉光滑面的细胞,在新的滤纸上粗面朝上放置,彻底晾干。然后再甲醇里粗面朝上固定5min,彻底晾干。
4. 染色
粗面朝下置于结晶紫染液中30min,取出膜用双蒸水漂洗一遍,粗面朝上放在载玻片上,数细胞。
这个方法比transwell方便。与boyden chemper法类似。

Transwell法的步骤:
先把小室擦干净后在超净工作台照紫外过夜。如新的小室省略此步。下一步将小室倒扣并小室的底部外侧滴加0.1%(还是1%记不清了)的明胶室温放置20-30分钟。这是将细胞消化下来,调浓度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培养基。小室上还未干的明胶甩掉,加细胞放入24孔板里。放入细胞培养箱培养4-6小室。拿出小室甩掉里边的培养基。小心擦尽小室里边的细胞(不能碰外边)。将小室放入装有600ml结晶紫的24孔板染色1小时。移到空的24孔板后即可在显微镜下观察了。

『贰』 transwell实验趋化实验,上下室的两种细胞培养基不一样,该怎么处理好些

摘要 关于培养基问题 需要看下 A B 细胞平时里用的什么培养基了 能统一最好统一吧 不一样的话 可以接种前换成一样的也行

『叁』 如何用transwell进行细胞迁移实验

Transwell法的步骤:
先把小室擦干净后在超净工作台照紫外过夜。如新的小室省略此步。下一步将小室倒扣并小室的底部外侧滴加0.1%(还是1%记不清了)的明胶室温放置20-30分钟。这是将细胞消化下来,调浓度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培养基。小室上还未干的明胶甩掉,加细胞放入24孔板里。放入细胞培养箱培养4-6小室。拿出小室甩掉里边的培养基。小心擦尽小室里边的细胞(不能碰外边)。将小室放入装有600ml结晶紫的24孔板染色1小时。移到空的24孔板后即可在显微镜下观察了。

细胞迁移实验步骤(Neuroprobe的使用方法)

1.膜预处理
将48.5ml H2O +1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾胶原置于50ml的离心管。在膜的粗糙面用铅笔做标记,放入上述溶液中4度过夜。
实验前将膜取出,放入装有PBS的培养皿中漂洗一遍,再用饥饿培养基洗一遍,吸去培养基后加入新的饥饿培养基,放入37度培养箱中。
2. 处理细胞
将细胞消化,调浓度1×105个/ml,细胞迁移装置下层加入166μl含有刺激因子的饥饿培养基。小心铺好膜(粗面朝下),装好塑料垫,固定上层装置。上层加入100μl细胞悬液,迁移4-6h。
3. 固定
小心将膜取下来,在用PBS弄湿的滤纸上挂掉光滑面的细胞,在新的滤纸上粗面朝上放置,彻底晾干。然后再甲醇里粗面朝上固定5min,彻底晾干。
4. 染色
粗面朝下置于结晶紫染液中30min,取出膜用双蒸水漂洗一遍,粗面朝上放在载玻片上,数细胞。
这个方法比transwell方便。与boyden chemper法类似。

『肆』 求助,A549细胞Transwell细胞迁移实验

现在这个行业发展的不错,生物实验技术外包也会跟着发展,比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展,或者涉及的设备比较昂贵,技术要求高,都会寻求外包。但是现在竞争也比较大,的得看单位这边整体做的怎么样。
做的比较好的,一般都是上海地区的,你可以看下基尔顿生物。

『伍』 细胞迁移最后的数据处理该怎么做呢、

每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离,求出均数和标准差,时间为横轴,迁移距离为纵轴(mm)作图,并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。
想了解更详细的话可以关注下中洪博元,他们这方面做的很好。

『陆』 Transwell迁移实验和细胞侵袭实验有什么不一样的地方哪些地方能做

两者都是分上室下室,上下室中间有聚碳酸酯膜,细胞种在上室,下室有营养成分,唯一不同的是细胞侵袭实验中,聚碳酸酯膜上室侧铺一层基质胶,用以模仿体内细胞外基质,细胞欲进入下室,先要分泌基质金属蛋白酶将基质胶降解,才可以通过聚碳酸酯膜。至于具体怎么做,需要注意什么,你可以问一下中洪博元,他们专门搞实验这块的

『柒』 transwell细胞成团怎么回事

染色
粗面朝下置于结晶紫染液中30min。小心铺好膜(粗面朝下)。
4。然后再甲醇里粗面朝上固定5min,彻底晾干,在新的滤纸上粗面朝上放置,彻底晾干。拿出小室甩掉里边的培养基。小心擦尽小室里边的细胞(不能碰外边)细胞迁移实验步骤(Neuroprobe的使用方法)

1.膜预处理
将48.5ml H2O +1。移到空的24孔板后即可在显微镜下观察了.5ml 醋酸+150μL 鼠尾胶原置于50ml的离心管,装好塑料垫. 固定
小心将膜取下来。这是将细胞消化下来。将小室放入装有600ml结晶紫的24孔板染色1小时,调浓度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培养基。
3,加细胞放入24孔板里。放入细胞培养箱培养4-6小室。在膜的粗糙面用铅笔做标记,放入上述溶液中4度过夜。
实验前将膜取出,放入装有PBS的培养皿中漂洗一遍,再用饥饿培养基洗一遍,吸去培养基后加入新的饥饿培养基,放入37度培养箱中。
2. 处理细胞
将细胞消化,调浓度1×105个/ml。与boyden chemper法类似。

Transwell法的步骤:
先把小室擦干净后在超净工作台照紫外过夜。如新的小室省略此步。下一步将小室倒扣并小室的底部外侧滴加0.1%(还是1%记不清了)的明胶室温放置20-30分钟,细胞迁移装置下层加入166μl含有刺激因子的饥饿培养基,粗面朝上放在载玻片上,数细胞。
这个方法比transwell方便,取出膜用双蒸水漂洗一遍,固定上层装置。上层加入100μl细胞悬液,迁移4-6h。小室上还未干的明胶甩掉,在用PBS弄湿的滤纸上挂掉光滑面的细胞

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