偶氮自动过柱萃取装置

㈠ 如何评价固相萃取材料的柱穿透体积

洗脱率与吸附剂、洗脱溶剂、保留体积、 流速等因素都有关，一般可达90%~98%。
相关资料：
1、固相萃取柱（英文, 简称SPE column，或Solid Phase extraction Cartridges，简称SPE cartridges）是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置。
2、原理：
固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）技术基于液相色谱原理，可近似看作一个简单的色谱过程。原理是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取可分为在线萃取和离线萃取。前者萃取与色谱分析同步完成，而后者萃取与色谱分析分步完成，两者在原理上是一致的。
3、固相萃取柱的使用
最简单的固相萃取可以通过手工方式完成，即在固相萃取柱上端连接一个注射器，通过对注射器的挤压将萃取柱内的液体排挤出萃取柱。另外，也可以使用正压或负压固相萃取装置对批量样品进行固相萃取操作。随着科技的发展和样品数量的增多，越来越多的分析实验室开始使用自动固相萃取仪，特别是多通道固相萃取仪对批量样品进行处理。
4、萃取步骤
1. 柱预处理（柱活化）
用适当的溶剂淋洗SPE 柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。不同模式固相萃取小柱活化用的溶剂不同，其目的有2 个：一是除去填料中可能存在的杂质；二是使填料溶剂化，提高固相萃取的重现性。
2. 上样
将液态或溶解后的固态样品倒入预处理后的SPE 柱，然后利用抽真空、加压或离心的方法使样品通过SPE柱，在该步骤中，分析物被保留在吸附剂上。
3. 淋洗和洗脱
样品进入SPE柱、目标化合物被吸附后，视分离模式和样品性质而定，可采用适当的洗脱剂将目标化合物直接淋洗下来；也可先将干扰化合物淋洗掉，再用适当的洗脱剂将目标化合物洗脱，通常采用后一种方法更有利于样品的净化。淋洗和洗脱同上所述，可采用抽真空、加压或离心的方法使淋洗液或洗脱液流过吸附剂。
5、影响因素
1) 吸附剂
目前常用的吸附剂有正、反相吸附剂、离子交换吸附剂和抗体键合吸附剂等，试验时尽量选择与目标化合物极性相似的吸附剂，其用量大小与目标物性质（极性、挥发性）及其在水样中的浓度直接相关。
2) 洗脱溶剂
在SPE中，洗脱溶剂的选择与目标物性质及使用的吸附剂有关，楼蔓藤等给出了常见有机溶剂的极性和洗脱强度，试验过程中可根剧被测物的物理、化学性质选用。洗脱剂体积应以淋洗完全为前提，体积最小的为最佳，可通过多次洗脱法（小体积），根据回收率的变化曲线找到最佳的洗脱液体积，显然，洗脱体积越小富集倍数越高。
3) 保留体积
在加样过程中，保留体积是SPE 技术的关键因素之一，它代表了进行痕量富集时能有效处理的水样体积。根据色谱分析仪的最小检出量和水样中有机物的浓度，可以估算出欲富集的最小水样体积。另外，样液的pH 值也影响样品的吸附效率。
4) 流速
流速的控制对SPE至关重要，流速过大将引起SPE柱的穿漏，流速太小则处理速度太慢。柱预处理过程中流速适中，保证溶液充分湿润吸附剂即可，上样和洗脱过程则要求流速尽量慢些，以使分析物尽量保留在柱内或达到完全洗脱，否则会导致分析物流失，影响回收率的大小。尤其离子交换过程，进行比较缓慢，应采用较低的流速（0.5~2.0 mL/min）。

㈡ 固相萃取仪装置操作规程有哪些

您好，北京德世科技有限公司（www.cnpetjy.com）为您答疑解惑：
固相萃取仪装置︰具有免溶剂、快速、萃取简单、可现场携带采样之仪器。可应用在非常多的领域;如药物分析、食品分析、环境污染分析(VOC、PAH、PCB、有机氯、有机磷杀虫剂)等等。

一、安装程序

(A) 先将Holder下方黑色保护套管转松拆开，再将不绣钢金属盖转松拆下。

注意:不绣钢金属盖有时会已松离Holder而卡在黑色保护套管，此时请将黑色保护套管再套回Holder转紧后再松开，不绣钢金属盖会回卡在Holder外牙上，再将它拆下，离开Holder。

(B) 将Holder推杆推至下端，此时有黑色圆棒秃出来(内有牙纹) 。

(C) 取出要用之Fiber，以Fiber上头外牙纹和Holder微秃出黑色圆棒内牙纹平顺锁上后，推杆小心拉回最上端，再将

刚拆下之不绣钢金属盖及黑色保护套管依序小心套上锁紧，即完成装置。

(D) 小心试着将Holder推杆推至中端卡点处卡住，此时Coated Fiber已从保护针头内秃出来，可上下调整黑色保护套

管及查看Holder上刻度，略估保护针头加上Coated Fiber所伸出的长度，以配合实验所需。

注意: Fiber装好后，此时勿将推杆推至最下端，会压坏Fiber之弹簧。

(E) SPME要插入样品瓶(袋)之隔塞取样或插入GC注射器之隔塞热脱附时，先将保护针头插入隔塞后，再将推杆推

至中端卡住，秃出Coated Fiber。

(F) SPME从样品瓶(袋)隔塞取样或从GC注射器之隔塞取出时，则先收回Coated Fiber至保护针头，再取出保护针头。

注意:因保护针头是平头针，所以新的隔塞片先以干净细针插一下以便保护针头较容易插入。GC Injection Liner(Sleeve)请改用SPME用Liner这样Coated Fiber较不会碰断。

(G) 若要从Holder拆下Fiber，先将Holder推杆拉回最上端，让Coated Fiber收回至保护针头内，把Holder下方黑色保护套

管转松和不绣钢金属盖拆下，再将Holder推杆推至下端，让黑色圆棒秃出来，转松Fiber上头锁牙即可。

固相微萃取装置主要部分是一个手柄加一个固相微萃取头即可进行工作，是最简单的配置。最好还需要恒温，磁力搅拌的装置等。也可以使用全自动SPME进样器，方便好用，就是价格太贵。

二、组成

SPME由手柄(Holder)和萃取头(Fiber)两部分构成，

壮似一支色谱注射器，萃取头是一根涂不同色谱固定相或吸附剂的熔融石英纤维，接不锈钢丝，外套细的不锈钢针管(保护石英纤维不被折断及进样)，纤维头可在针管内伸缩，手柄用于按装萃取头，可永久使用。

三、SPME操作步骤

样品萃取

1. 将SPME针管穿透样品瓶隔垫，插入瓶中。

2. 推手柄杆使纤维头伸出针管，纤维头可以浸入水溶液中(浸入方式)或置于样品上部空间(顶空方式)，萃取时间大约2-30分钟。

3. 缩回纤维头，然后将针管退出样品瓶

GC分析

1.将SPME针管插入GC仪进样口。

2.推手柄杆，伸出纤维头，热脱附样品进色谱柱。

3.缩回纤维头，移去针管。

原理：

固相微萃取(Solid Phase Micro-Extraction,
SPME)是用一根表层涂有特异性涂层，如聚二甲基硅氧烷(Polydimethylsiloxane
)的石英纤维来吸附植物或昆虫顶空中的挥发性化合物。可以根据要提取的挥发物的性质选择不同的涂层。在提取过程中，石英纤维被手柄推出保护针套，处于择发物之中，挥发物被吸附到纤维涂层上，然后将石英纤维直接注入气相色谱的进样口，吸附在其表层的挥发物在瞬时高温条件下快速解吸附，进入色谱柱分离。SPME可以在自然或半自然状态下对活体生物进行连续取样，是目前分析鉴定少量挥发性化合物最精确的方法。此方法最大优点是只需少量的样品材料，并且不需要净化的中间步骤，因而无溶剂干扰。同时该法能基本反映昆虫在田间寻食过程中利用的信息化合物种类和浓度。缺点是收集的信息化合物量少，只能用于化学分析，不足以用来进行生物测定。

㈢ 固相萃取柱的固相萃取柱使用

固相萃取柱的使用
最简单的固相萃取可以通过手工方式完成，即在固相萃取柱上端连接一个注射器，通过对注射器的挤压将萃取柱内的液体排挤出萃取柱。另外，也可以使用正压或负压固相萃取装置对批量样品进行固相萃取操作。随着科技的发展和样品数量的增多，越来越多的分析实验室开始使用自动固相萃取仪，特别是多通道固相萃取仪对批量样品进行处理。

㈣ 固相萃取柱的使用方法图示

大家千万别买simon aldrich的固相萃取柱，根本没这公司，国内小作坊冒充进口品牌的，质量很差。

㈤ 请问大神们，自动过柱机过柱子，比起人工过柱会有差别吗

没有什么问题，比人工的好太多了。只不过就是如果经常过不同物质的话，还是人工的装柱更方便一些

㈥ 镉柱还原法

方法提要

水样通过镉还原柱，将硝酸盐定量地还原为亚硝酸盐，然后按重氮-偶氮光度法测定亚硝酸盐氮的总量，扣除原有亚硝酸盐氮，得硝酸盐氮的含量。

水样可用有机玻璃或塑料采水器采集，用0.45μm滤膜过滤，贮存于聚乙烯瓶中。分析工作不能延迟3h以上，如果样品采集后不能立即分析，应快速冷冻至-20℃。样品熔化后应立即分析。

仪器和装置

分光光度计。

还原柱(图78.4)。

图78.4 还原柱

试剂和材料

镉屑直径为1mm的镉屑、镉粒或海绵镉。

盐酸(2mol/L)量取83.5mLHCl，加水稀释至500mL。

硫酸铜溶液(10g/L)称取10g硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)溶于水并稀释至1000mL，混匀。盛于试剂瓶中。

硝酸盐标准储备溶液ρ(N)=0.10mg/mL称取0.7218g硝酸钾(KNO₃，预先在110℃下烘1h，置于干燥器中冷却)溶于少量水中，用水稀释至1000mL，混匀。加1mL三氯甲烷，混合。贮存于1000mL棕色试剂瓶中，于冰箱内保存。此溶液有效期为半年。

硝酸盐标准使用溶液ρ(N)=0.01mg/mL量取10.0mL硝酸钾标准储备溶液于100mL容量瓶中，加水稀释至标线，混匀。临用前配制。

氯化铵缓冲溶液称取10g氯化铵(NH₄Cl，优级纯)溶于1000mL水中，用约1.5mLNH₄OH调节pH至8.5(用精密pH试纸检验)。此溶液用量较大，可一次配制5000mL。

磺胺溶液称取5.0g磺胺溶于350mL(1+6)HCl，用水稀释至500mL，混匀。盛于棕色试剂瓶中，有效期为2个月。

盐酸萘乙二胺溶液称取0.50g盐酸萘乙二胺溶于500mL水中，混匀。盛于棕色试剂瓶中，于冰箱内保存，有效期为1个月。

活化溶液量取14mL硝酸盐标准储备溶液于1000mL容量瓶中，加NH₄Cl溶液至刻度，混匀，贮存于试剂瓶中。

镉还原柱的制备:

镉屑镀铜称取40g镉屑(或镉粒)于150mL锥形分液漏斗中，用HCl洗涤，除去表面氧化层，弃去酸液，用水洗至中性，加入100mL10g/LCuSO₄溶液振摇约3min，弃去废液，用水洗至不含有胶体铜时为止。

装柱将少许玻璃纤维塞入还原柱(图78.4)底部并注满水，然后将镀铜的镉屑装入还原柱中，在还原柱的上部也塞入少许玻璃纤维，已镀铜的镉屑要保持在水面之下以防接触空气，为此，柱中溶液即液面，在任何操作步骤中不得低于镉屑。

还原柱的活化用250mL活化溶液，以7～10mL/min的流速通过还原柱使之活化，然后再用NH₄Cl缓冲溶液过柱洗涤3次，还原柱即可使用。

还原柱的保存还原柱每次用完后，需用NH₄Cl缓冲溶液洗涤2次，尔后注入NH₄Cl溶液保存。如长期不用，可注满NH₄Cl溶液后密封保存。

镉柱还原率的测定配制浓度为100μg/L的硝酸盐氮和亚硝酸盐氮溶液，硝酸盐氮参照绘制校准曲线步骤测量其吸光度，其双份平均吸光度记为A(NO₃^-)。同时测量分析空白，其双份平均吸光度记为A_b(NO₂^-)。亚硝酸盐氮的测定除了不通过还原柱外，其余各步骤均按硝酸盐氮的测定步骤进行，其双份平均吸光度记为A(NO₂^-)。同时测定空白吸光度，其双份平均值记为A_b(NO₂^-)。按下式计算硝酸盐还原率R。

岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术

当R<95%时，还原柱须按上述步骤重新进行活化或重新装柱。

校准曲线

取6个100mL容量瓶，分别加入0mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL硝酸盐标准溶液，加水至标线，混匀。标准系列溶液的硝酸盐氮浓度分别为0mg/L、0.025mg/L、0.050mg/L、0.100mg/L、0.150mg/L、0.200mg/L。

分别量取50.0mL上述各浓度溶液，于相应的125mL具塞锥形瓶中，再各加50.0mLNH₄Cl缓冲溶液，混匀。

将混合后的溶液逐个倒入还原柱中约30mL，以6～8mL/min的流速通过还原柱直至溶液接近镉屑上部界面，弃去流出液。然后重复上述操作，接取25.0mL流出液于50mL带刻度的具塞比色管中，用水稀释至50.0mL，混匀。

各加入1.0mL磺胺溶液，混匀，放置20min。各加入1.0mL盐酸萘乙二胺溶液，混匀，放置20min。于波长543nm下(在光电比色计上，使用绿色滤波片)用5cm比色皿，以二次去离子水作参比，测其吸光度A_i和A₀(标准空白)。

以吸光度(A_i-A₀)为纵坐标，浓度(mg/L)为横坐标，绘制校准曲线。

分析步骤

量取50.0mL已过滤的水样于125mL具塞锥形瓶中，加入50.0mLNH₄Cl缓冲溶液，混匀。

照上述绘制校准曲线步骤测量水样的吸光度A_w。

量取50.0mL二次去离子水，于125mL的具塞锥形瓶中，加入50.0mLNH₄Cl缓冲溶液，混匀。参照上述步骤测量分析空白吸光度A_b。

由A_w-A_b，查校准曲线得硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总浓度ρ(N_总)。

按下式计算水样中硝酸盐氮浓度(mg/L):

岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术

式中:ρ(NO₃-N)为水样中硝酸盐氮质量浓度，mg/L;ρ(NO₂-N)为水样中原有亚硝酸盐氮质量浓度，mg/L;ρ(N_总)为硝酸盐氮和亚硝酸盐氮总质量浓度，mg/L。

注意事项

1)还原柱可用蝴蝶夹固定在滴定台上，并配备可插比色管的塑料底座。在船上工作时可用自由夹固定比色管。

2)水样通过还原柱时，液面不能低于镉屑;否则会引进气泡，影响水样流速。如流速达不到要求，可在还原柱的流出处用乳胶管连接一段细玻璃管，即可加快流速。

3)水样加盐酸萘乙二胺溶液后，须在2h内测量完毕，并避免阳光照射。

4)校准曲线每隔一周须重制一次，但须每天测定一份标准溶液以核对曲线。当测定样品的实验条件与制定校准曲线的条件相差较大时(如更换光源或光电管、温度变化较大时)，须及时重制校准曲线。

5)水样中的悬浮物会影响水样的流速，如吸附在镉屑上能降低硝酸盐的还原率，水样要预先通过0.45μm滤膜过滤。

6)铁、铜或其他金属浓度过高时会降低还原效率，向水样中加入EDTA即可消除此干扰。油和脂会覆盖镉屑的表面，用有机溶剂预先萃取水样可排除此干扰。

7)船用分光光度计的比色皿与参比池两者之间的吸光度(A_c)可能有显著差异，应在A_w及A_i中扣除。

8)海绵镉还原柱的处理过程及其他要求，可按产品特性说明书作相应调整。

9)锌镉法可与本法等效使用。

㈦ 固相萃取柱的洗脱率一般在什么范围

固相萃取柱的洗脱率看具体情况而定。

固相萃取柱（英文, 简称SPE column，或Solid Phase extraction Cartridges，简称SPE cartridges）是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置。主要应用于各种食品、农畜产品、环境样品以及生物样品中目标化合物的样品前处理。固相萃取技术已经被广泛地使用在许多国标（GB/T）以及行业分析标准中。
原理：
SPE技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、净化，是一种包括液相和固相物理萃取过程；也可以将其近似地看作一种简单的色谱过程。SPE是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。较常用的方法是使液体样品溶液通过吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，然后用少量溶剂迅速洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。也可选择性吸附干扰杂质，而让被测物质流出；或同时吸附杂质和被测物质，再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。