硫酸盐还原菌实验中装置密闭性不好

A. 硫酸盐还原菌

硫酸盐还原菌是指一类能把硫酸盐、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等硫氧化以及元素硫还原形成H2S的生理特性细菌的统称。由它的定义就知道硫酸盐还原菌能对所有的亚硫酸盐还原成硫化氢！

B. 硫还原细菌和硫酸盐还原细菌是一样的吗

硫细菌（sulfur bacteria）定义
在生长过程中
硫细菌
能利用溶解的硫的化合物，从中获得能量，且能把硫化氢氧化为硫，并再将硫氧化为硫酸盐的细菌。从名称上看，它包括了硫氧化菌和硫酸盐还原菌，但通常仅指硫氧化菌(sulphur-oxidising bacteria)。
硫酸盐还原菌硫酸盐还原菌 ( Sulfate-Recing Bacteria,简称SRB) 是一种厌氧的微生物；广泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油气井等缺氧环境中。在伯杰细菌鉴定手册第九版中SRB被归纳到第7类群中，有4组14个属。早在1924年，BENGOUGH和MAY就认为SRB产生的H2S对埋在地下的铁构件的腐蚀起着重要作用，1934年，荷兰学者库尔和维卢特提出了SRB对金属腐蚀作用的机制；随后，邦克（1939）、HEDELAI（1940）、史塔克和威特（1945）也证实腐蚀的主要细菌有铁细菌（好氧）和SRB(厌氧)，土壤中钢铁的腐蚀主要是后者[2]。研究表明在无氧或极少氧情况下,它能利用金属表面的有机物作为碳源,并利用细菌生物膜内产生的氢,将硫酸盐还原成硫化氢,从氧化还原反应中获得生存的能量[3]。根据硫酸盐还原菌的生长繁殖条件、腐蚀活动机制和作用对象等因素,SRB 腐蚀的防治可以分为物理方法、化学方法、阴极保护方法、微生物保护方法和防腐材料保护方法等几种[4]。但上述一些方法不是杀菌效率降低、就是花费较为昂贵。而且像某些化学方法(杀菌剂)的使用，也给环境治理带来新的负担。随着人们环保意识日益加强，研制和开发新的高效环保型防治方法就显得尤为重要，防止SRB腐蚀已是腐蚀科学和微生物学共同关注的课题。一些防腐专家认为从环境的角度考虑，SRB的防治有必要从微生物学自身去寻找新的方法。
硫还原细菌应该是硫酸盐还原细菌的口头简称，书面上无此说法。

C. 硫酸盐还原菌的培养条件

虽然从理论上讲，SRB为严格的厌氧菌，但随着研究的深入，已有研究结果表明SRB并非严格意义上的绝对厌氧，而是兼性厌氧。
但总体上来说，SRB对氧还是极其敏感的，因此对其培养与分离关键要采用严格的厌氧技术培养SRB不仅仅要求周围生长的环境是无氧的，还有培养基中氧化还原电位必须在-100mV以下。
所以通常在培养基中加入一些强还原剂，如巯基乙醇、抗坏血酸、L2半胱氨酸盐酸盐，这些物质受热容易分解，所以要采用过滤除菌的方法单独灭菌 ⑴中温型：30-40 ℃ 之 间
⑵高温型：55-60 ℃ 之 间 ⑴稀释摇管法
稀释摇管法是稀释倒平板法的一种变通形式，先将一系列盛有无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化并保持在50℃左右，将已稀释成不同梯度的菌液加入到这些已熔化好的琼脂试管中，迅速充分混匀。待凝后,在琼脂柱表面倒一层灭菌的液体石蜡和固体石蜡的混合物，使培养基尽量隔绝空气。培养后，菌落形成在琼脂柱的中间。
困难之处在于菌落的挑取，首先需用一只灭菌针将覆盖的石蜡盖取出，然后再用一只毛细管插入琼脂和管壁之间，吹入无菌无氧气体，将琼脂柱吸出，放在培养皿中，最后用无菌刀将琼脂柱切成薄片进行观察并转移菌落。
该法的不足之处是观察与挑取菌落比较困难，但在缺乏专业设备的条件下，此法仍是一种方便有效地进行厌氧微生物分离、纯化和培养的低成该方法
⑵叠皿夹层法
叠皿夹层法实质是将菌夹在上下两层培养基之间，使其造成一个相对无氧的环境，从而使SRB能在夹缝中生长。
具体做法是将已经富集好的菌液采用无菌操作技术稀释成不同浓度。将含有质量分数为2%琼脂的固体培养基熔化并保持在50℃左右，在无菌条件下，向培养皿（90mm×15mm）的皿盖中倒入约1/3高度的固体培养基，待其刚刚冷凝后，将不同浓度的稀释液吸取适量，快速涂布平板上，使稀释液渗透约30s后，在培养皿的中间位置倒入同种营养型固体培养基，直到将溢未溢的突起状态，随后迅速盖上皿盖并往下压，最终皿内不能有气泡。
去掉培养皿内外两层侧壁间多余的琼脂，并在其中灌入适量熔化的石蜡，使培养皿侧壁缝隙被石蜡密封，尽量不要留有气泡。培养一周后，在加有二价铁离子的平板中会长出黑色的SRB菌落，在酒精灯旁加热使固体石蜡熔化，由于上下两层培养基凝固时间不同，所以当移去内皿后，用镊子很容易将上层培养基揭起，从而露出下层培养基的菌落。当需要进行菌落挑取时,可以对其进行切块转移，放入液体培养基时捣碎即可。
该方法的优点是培养物均采用涂布或划线生长于营养琼脂夹层中，取菌落时可很方便地做到定点取菌，同时该方法不需要另外创建一个无氧环境，故省时、省力，具备了所有好氧、厌氧分离方法的优点。
⑶Hungate滚管技术
Hungate滚管技术是培养厌氧菌最佳的方法。滚管技术是美国微生物学家亨盖特于1950年首次提出并应用于瘤胃厌氧微生物研究的一种厌氧培养技术。这项技术又经历了几十年的不断改进，从而使亨盖特厌氧技术日趋完善，并逐渐发展成为研究厌氧微生物的一套完整技术。目前国内外很多专门做厌氧培养的实验室大都采用此技术。
Hungate滚管技术是指将适当稀释度的菌液，在无菌无氧条件下接入含有琼脂培养基的厌氧试管中，然后将其在滚管机或冰盘上均匀滚动，使含菌培养基均匀地凝固在试管内壁上。当琼脂绕管壁完全凝固后，琼脂试管即可垂直放置贮存，并可使少量的水分集中在底部，经过几天的培养后，就可见到厌氧管内固体培养基内部和表面有菌落出现。挑取菌落时也很方便，可以在酒精灯旁用自制的玻璃细管接种针挑取生长状态良好的菌落，快速接到液体培养基中富集培养。
Hungate滚管技术的优点在于，培养基可以在厌氧管内壁上形成一层均匀透明的薄层，同时菌落可以埋藏在培养基内部或生长在表面，同平板涂布法相比，与氧气接触的机会大大减少。

D. 影响硫酸盐还原菌生长的主要因素有哪些

影响硫酸盐还原菌生长的主要因素有：温度、湿度、pH值、氧气浓度、营养物质等。

细菌是指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作拟核区（或拟核）的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌和古生菌两大类群。人们通常所说的即为狭义的细菌，狭义的细菌为原核微生物的一类，是一类形状细短，结构简单，多以二分裂方式进行繁殖的原核生物，是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。

细菌的繁殖生长：
细菌可以以无性或者遗传重组两种方式繁殖，最主要的方式是以二分裂法这种无性繁殖的方式：一个细菌细胞细胞壁横向分裂，形成两个子代细胞。并且单个细胞也会通过如下几种方式发生遗传变异：突变（细胞自身的遗传密码发生随机改变），转化（无修饰的DNA从一个细菌转移到溶液中另一个细菌中），转染（病毒的或细菌的DNA，或者两者的DNA，通过噬菌体转移到另一个细菌中），细菌接合（一个细菌的DNA通过两细菌间形成的特殊的蛋白质结构，接合菌毛，转移到另一个细菌）。细菌可以通过这些方式获得DNA，然后进行分裂，将重组的基因组传给后代。许多细菌都含有包含染色体外DNA的质粒。
处于有利环境中时，细菌可以形成肉眼可见的集合体，例如菌簇。

E. 硫酸盐还原菌的研究历程

早在1924年，BENGOUGH和MAY就认为SRB产生的H2S对埋在地下的铁构件的腐蚀起着重要作用，1934年，荷兰学者库尔和维卢特提出了SRB对金属腐蚀作用的机制；随后，邦克（1939）、HEDELAI（1940）、史塔克和威特（1945）也证实腐蚀的主要细菌有铁细菌（好氧）和SRB(厌氧)，土壤中钢铁的腐蚀主要是后者。
研究表明在无氧或极少氧情况下，它能利用金属表面的有机物作为碳源，并利用细菌生物膜内产生的氢，将硫酸盐还原成硫化氢，从氧化还原反应中获得生存的能量。
根据硫酸盐还原菌的生长繁殖条件、腐蚀活动机制和作用对象等因素，SRB 腐蚀的防治可以分为物理方法、化学方法、阴极保护方法、微生物保护方法和防腐材料保护方法等几种。
但上述一些方法不是杀菌效率降低、就是花费较为昂贵。而且像某些化学方法（杀菌剂）的使用，也给环境治理带来新的负担。随着人们环保意识日益加强，研制和开发新的高效环保型防治方法就显得尤为重要，防止SRB腐蚀已是腐蚀科学和微生物学共同关注的课题。一些防腐专家认为从环境的角度考虑，SRB的防治有必要从微生物学自身去寻找新的方法。

F. 硫酸盐还原菌、铁细菌、腐生菌的危害

前两种利用它们的还原性氧化设备，后一种由于腐蚀动植物尸体有残体会将管道堵塞。

G. 硫酸盐还原菌的硫酸盐还原速率与钢铁腐蚀具有相关性么

硫酸盐还原菌的硫酸盐还原速率与钢铁腐蚀具有相关性
硫酸盐还原菌 (Sulfate-Recing Bacteria，简称SRB) 是一种厌氧的微生物。广泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油气井等缺氧环境中。
据不完全统计，S R B 目前已有1 2 个属4 0 多个种 ，S R B 的分类学研究进展比较缓慢。目前已知的S R B 从生理学上分为两大亚类
Ⅰ类
如脱硫弧菌属、脱硫单胞菌属、脱硫叶菌属和脱硫肠状菌属，其特点是可利用乳酸、丙酮酸、乙醇或某些脂肪酸为碳源及能源，将硫酸盐还原为硫化氢；
Ⅱ类
如脱硫菌属、脱硫球菌属、脱硫八叠球菌属和脱硫线菌属，它们的特别之处是可以氧化脂肪酸，并将硫酸盐还原为硫。现在，随着研究的进展，陆续又有一些新的种属被命名。

H. 硫酸盐还原菌怎么应用于污水处理中

硫酸盐还原菌在缺氧条件下会把硫酸盐、亚硫酸盐转化为有毒的硫化氢，所以一般情况下污水处理中不是应用硫酸盐还原菌，而是避免硫酸盐还原菌的还原作用（通过曝气等方法增加污水中的溶解氧，以避免出现缺氧环境）

I. 硫酸盐还原细菌的特性

SRB不仅具有广泛的基质谱，生长速度快，还含有不受氧毒害的酶系，因此可以在各种各样的环境中生存，保证了SRB有较强生存能力。SRB的另一生理特性是硫酸盐的存在能促进其生长，但不是其生存和生长的必要条件。在缺乏硫酸盐的环境下，SRB通过进行无硫酸盐参与的代谢方式生存和生长；当环境中出现了足量的硫酸盐后SRB则以硫酸根离子为电子受体氧化有机物，通过对有机物的异化作用，获得生存所需的能量，维持生命活动。