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垂直电泳实验装置

发布时间:2021-11-14 08:45:06

『壹』 水平式电泳和垂直式电泳有什麼差别

水平式电泳和垂直式电泳区别为:方向不同、支持物不同、分离效果不同。

一、方向不同

1、水平式电泳:水平式电泳是在水平方向放置的凝胶平板中进行的电泳。

2、垂直式电泳:垂直式电泳是在垂直方向放置的凝胶平板中进行的电泳。

二、支持物不同

1、水平式电泳:水平式电泳用琼脂糖凝胶作支持物。

2、垂直式电泳:垂直式电泳用聚丙烯酰胺凝胶作支持物。

三、分离效果不同

1、水平式电泳:水平式电泳横截面积比垂直式电泳大,因此单位横截面积的电量强度更低,分离效果更差。

2、垂直式电泳:垂直式电泳横截面积比水平式电泳小,因此单位横截面积的电量强度更高,分离效果更好。

『贰』 PCR实验室主要仪器设备和耗材清单

PCR实验室可分为样品制备、核酸扩散、产物分析3大区域,每个区域所用的设备不同,下面就给大家详细介绍一下PCR实验室每个区域都需要什么设备?


样品制备区:

生物安全柜 :防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散

样本低温冰箱:零下20摄氏度,-80℃ 保存样本及DNA

高速台式冷冻离心机:收集微生物菌体、细胞碎片以及其他沉淀物。 有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境

水浴锅或者金属浴:用于DNA杂交过程中水浴控温

移液器:准确量取特定体积溶液

紫外灯或者消毒车:空间环境消毒

混匀仪:移取样本前需要混匀

超净工作台:涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成

低温摇床:用于大肠杆菌和酵母菌的振荡培养

磁力搅拌器:加速溶解固体内容物


核酸扩散区:

基因扩增仪:基因检测DNA/RNA扩增

荧光定量PCR仪:核酸定量分析

核酸提取仪:样品DNA/RNA提取

移液器:准确量取特定体积溶液

紫外灯或者消毒车:空间环境消毒

超净工作台:涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成

纯水装置:用于PCR,DNA测序需要超纯水


产物分析区:

电泳仪:水平电泳用于核酸DNA/RNA检测,垂直电泳用于蛋白检测,转印电泳用于将蛋白转移到膜上做weatern检测

凝胶成像系统/紫外检测仪:用于核酸琼脂电泳和蛋白聚丙酰胺的观察和拍照;紫外分析仪用于染色后核酸琼脂电泳胶观察,不能连接电脑

电炉:电泳琼脂凝胶加热融化

『叁』 蛋白垂直电泳槽、转移电泳槽、电泳仪电源、电子天平、匀浆器、体式显微镜、酶标仪是否属于医疗器械

都不是。
医疗器械参考下面网站
http://www.sda.gov.cn/gyx02302/flml.htm

医疗器械在网络的定义
医疗器械,是指单独或者组合使用于人体(!!!)的仪器、设备、器具、材料或者其他物品,包括所需要的软件;其用于人体体表及体内的作用不是用药理学、免疫学或者代谢的手段获得,但是可能有这些手段参与并起一定的辅助作用;其使用旨在达到下列预期目的:(一)对疾病的预防、诊断、治疗、监护、缓解;(二)对损伤或者残疾的诊断、治疗、监护、缓解、补偿;(三)对解剖或者生理过程的研究、替代、调节;(四)妊娠控制。

规定这东西,只有规定什么什么是什么,哪有规定什么什么不是什么。
你说的东西,一般分子实验室应该有。
比方说针筒,我们实验室也有,但不是医疗器械,它没扎在人身上。
比方说,生产胰岛素的设备,生产的是药物,但它不是医疗器械。注射胰岛素的那只笔才算医疗器械。

『肆』 试说明水平电泳槽与你在生化实验中所用的垂直电泳槽有何区别

水平电泳槽和垂直电泳槽的原理是一样的。垂直电泳槽具有的特点:比如要做不同层的胶(浓缩胶分离胶)可以等一个先凝了之后,再灌第二个,这种情况水平电泳槽满足不了的。分子实验,实际上核酸既可以跑琼脂糖也可以跑PAGE。

『伍』 电泳槽与电泳仪之间有什么区别吗

电泳槽是复凝胶电泳系统的核心制部分,其系统的迅猛发展主要也是体现在电泳槽上。根据电泳的原理,凝胶都是放在两个缓冲腔之间,电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之问的接触可以是直接的液体接触,也可以间接通过凝胶条或滤纸条。管状凝胶电泳和垂直板状电泳大多采取直接液体接触方式。这种方式可以有效地使用电场,但在装置设计上有一些困难,如液体泄漏,电安全和操作麻烦等问题。水平板状电泳槽大多通过间接方式,用滤纸桥搭接。 电泳槽和电泳仪合用才能进行电泳实验。电泳槽是用来制备凝胶,进行电泳的主要场所。电泳仪主要是用来提供电流,产生电场力带动分子运动的。电泳槽是装(涂料)容器,电泳的工作仪器。电泳仪是提供(电泳)电压的设备。

『陆』 凝胶电泳的实验原理

凝胶电泳(英语:Gel electrophoresis)或称胶体电泳 是一大类技术,被科学工作者用于分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。凝胶电泳通常用于分析用途,但也可以作为制备技术,在采用某些方法(如质谱(MS)、聚合酶链式反应(PCR)、克隆技术、DNA测序或者免疫印迹)检测之前部分提纯分子。 该技术操作简便快速,可以分辨用其它方法(如密度梯度离心法)所无法分离的DNA片段。当用低浓度的荧光嵌入染料溴化乙啶(Ethidium bromide, EB)染色,在紫外光下至少可以检出1-10ng的DNA条带,从而可以确定DNA片段在凝胶中的位置。此外,还可以从电泳后的凝胶中回收特定的DNA条带,用于以后的克隆技术操作。
凝胶电泳被广泛用于分子生物学、遗传学和生物化学:
1.大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)分离,也可以使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。
2.蛋白质的凝胶电泳通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行(SDS-PAGE),或者非变性凝胶电泳,或二维电泳。
3.毛细管电泳
4.酶谱法(zymography)
5.变性梯度胶凝电泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,DGGE)
琼脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各种形状、大小和孔隙度。琼脂糖凝胶分离DNA片度大小范围较广,不同浓度琼脂糖凝胶可分离长度从200bp至近50kb的DNA片段。琼脂糖通常用水平装置在强度和方向恒定的电场下电泳。聚丙烯酰胺分离小片段DNA(5-500bp)效果较好,其分辩力极高,甚至相差1bp的DNA片段就能分开。聚丙烯酰胺凝胶电泳很快,可容纳相对大量的DNA,但制备和操作比琼脂糖凝胶困难。聚丙烯酰胺凝胶采用垂直装置进行电泳。目前,一般实验室多用琼脂糖水平平板凝胶电泳装置进行DNA电泳。
琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定:
1、 DNA的分子大小:
线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中蠕行,因而迁移得越慢。
2、 琼脂糖浓度
一个给定大小的线状DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率的对数与凝胶浓度成线性关系。凝胶浓度的选择取决于DNA分子的大小。分离小于0.5kb的DNA片段所需胶浓度是1.2-1.5%,分离大于10kb的DNA分子所需胶浓度为0.3-0.7%, DNA片段大小间于两者之间则所需胶浓度为0.8-1.0%。
3、 DNA分子的构象
DNA分子处于不同构象时,它在电场中移动距离不仅和分子量有关,还和它本身构象有关。相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而开环双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。
4、 电源电压
在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加,不同分子量的DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,片段越大,因场强升高引起的迁移率升高幅度也越大,因此电压增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段姆直媛蚀锏阶畲?所加电压不得超过5V/cm。
5、嵌入染料的存在
荧光染料溴化乙啶用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料会嵌入到堆积的碱基对之间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状DNA迁移率降低15%。
6、 离子强度影响
电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA的电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶),电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化或DNA变性。
对于天然的双链DNA,常用的几种电泳缓冲液有TAE[含EDTA (pH8.0)和Tris-乙酸],TBE(Tris-硼酸和EDTA),TPE(Tris-磷酸和EDTA),一般配制成浓缩母液,储于室温。

『柒』 如何做好聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳,那些是关键步骤

我做实验的时候,最主要是把凝胶制备好。需要注意的有:1、密封条要封好,不能漏水;2、灌胶时用移液管,可以慢一点,并水平移动,防止凝胶不均匀,凝胶不会很快凝固,所以不用担心;3、灌胶时不能有气泡产生,否则会影响后面凝胶的效果。

『捌』 电泳槽和电泳仪的区别

电泳槽是凝胶电泳系统的核心部分,其系统的迅猛发展主要也是体现在电泳槽上。根据电泳的原理,凝胶都是放在两个缓冲腔之间,电场通过凝胶连接两个缓冲腔。缓冲液和凝胶之问的接触可以是直接的液体接触,也可以间接通过凝胶条或滤纸条。管状凝胶电泳和垂直板状电泳大多采取直接液体接触方式。这种方式可以有效地使用电场,但在装置设计上有一些困难,如液体泄漏,电安全和操作麻烦等问题。水平板状电泳槽大多通过间接方式,用滤纸桥搭接。
电泳槽和电泳仪合用才能进行电泳实验。电泳槽是用来制备凝胶,进行电泳的主要场所。电泳仪主要是用来提供电流,产生电场力带动分子运动的。电泳槽是装(涂料)容器,电泳的工作仪器。电泳仪是提供(电泳)电压的设备。

『玖』 垂直式蛋白质电泳的操作步骤

实验试剂和器材
1.材料: 低分子量标准蛋白试剂盒: 低分子量标准蛋白: 兔磷酸化酶B
MW=97,400

牛血清白蛋白
MW=66,200

兔肌动蛋白
MW=43,000

牛碳酸酐酶
MW=31,000

胰蛋白酶抑制剂
MW=20,100

鸡蛋清溶菌酶
MW=14,400
开封后溶于200µl蒸馏水,置-20℃保存,使用前室温融化,沸水浴中加热3-5分钟后上样。 样品1:称3mg样品1,加2 ml蒸馏水溶解。

2.实验试剂
(1) 30%丙烯酰胺(Acr):称Acr30g,甲叉双丙烯酰胺
(Bis)0.8g,加蒸馏水至100ml,过滤后置棕色瓶中,
4℃贮存可用1-2月。
(2)10%SDS(十二烷基磺酸钠)
(3)1.5mol/L pH8.8 Tris-HCl缓冲液:称取Tris18.2g,
加入50ml水,用1mol/L盐酸调pH8.8, 最后用蒸馏水定容至100ml。
(4)1.0mol/LpH6.8Tris-HCl缓冲液:称取Tris12.1g,加

入50ml水,用1mol/L盐酸调pH6.8, 最后用蒸馏水定容至100ml。
(5)0.05mol/LpH8.0Tris-HCl缓冲液:称取Tris0.6g,加 入50ml水,用1mol/L盐酸调pH8.0,最后用蒸馏水定容至100ml。
(7)10%过硫酸铵(AP)
(8)TEMED(四甲基乙二胺)
(9)样品溶解液:SDS(100mg)+巯基乙醇(0.1ml)+

溴酚蓝(2mg)+甘油(2g) +0.05mol/L pH8.0Tris-HCl(2ml),最后定容至10ml。
(10)固定液:取50%甲醇454ml,冰乙酸46ml混匀。
(11)染色液:称取考马斯亮蓝R250 0.125g,加上述固定液 250ml,过滤后备用。
(12)脱色液:冰乙酸75ml,甲醇50ml,加蒸馏水定容至1000ml。
(13)电极缓冲液(内含0.1%SDS,0.05mol/LTris- 0.384mol/L甘氨酸缓冲液pH8.3):称Tris6.0g,甘 氨酸28.8g,加入SDS1g,加蒸馏水使其溶解后定容至1000ml。

实验过程
1.将玻璃板用蒸馏水洗净晾干, 准备2个干净的锥形瓶.
2.把玻璃板在灌胶支架上固定好.※固定玻璃板时,两边用力一定要均匀,防止夹坏玻璃板.
3.按比例配好分离胶,用移液管快速加入,大约5厘米左右,之后加少许蒸馏水,静置40分钟.※凝胶配制过程要迅速, 催化剂TEMED要在注胶前再加入,否则凝结无法注胶.注胶过程最好一次性完成,避免产生气泡.

※水封的目的是为了使分离胶上延平直,并排除气泡 ※凝胶聚合好的标志是胶与水层之间形成清晰的界面.
4.倒出水并用滤纸把剩余的水分吸干,按比例配好浓缩胶,连续平稳加入浓缩胶至离边缘5mm处,迅速插入样梳,静置40分钟. ※样梳需一次平稳插入,梳口处不得有气泡,梳底需水平.

5.拔出样梳后,在上槽内加入缓冲液,没过锯齿时可拆去 底端的琼脂糖. ※要使锯齿孔内的气泡全部排出,否则会影响加样效果.
6、加样三个。 (1)取10µl标准蛋白溶解液于EP管内,再加入10µl 2倍样品缓冲液,上样量为20µl。
(2)取10µl样品1溶液,再加入10µl 2倍样品缓冲液,上样量分别为5µl
和10µl。
7.用微量注射器距槽底三分之一处进样,加样前,样品在沸水中加热3分钟,去掉亚稳态聚合。※注射器不可过低,以防刺破胶体,也不可过高,在样下沉时会发生扩散.※为避免边缘效应,最好选用中部的孔注样.

8.电泳槽中加入缓冲液,接通电源,进行电泳,开始电流恒定在10mA,当进入分离胶后改为20mA,溴酚蓝距凝胶边缘约5mm时,停止电泳。
9.凝胶板剥离与染色:电泳结束后,撬开玻璃板,将凝胶板做好标记后放在大培养皿内,加入染色液,染色1小时左右。10.脱色:染色后的凝胶板用蒸馏水漂洗数次,再用脱色液脱色,直到蛋白质区带清晰。※剥胶时要小心,保持胶完好无损,染色要充分.

以上是我实验课件,希望有所帮助!

『拾』 电泳实验怎么做

若是生物方面的:
1、实验样品的准备
2、电泳仪器及相关实验试剂准备
3、根据实验目的,设计实验方案
4、具体实验
可联系北京德元国际科技有限公司,他们做生物方面的电泳实验,应该比较清楚

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