植物色素提取实验装置

A. 植物色素的提取能用Arnon方法吗

Arnon是传统的叶绿素测定方法，是将材料在80%丙酮溶液中研磨并经过滤或离心除去残渣后,测定提取液的光密度值来计算叶绿素含量，所以是使用分光光度计测量光的吸收值继而估算出色素的含量。二甲基亚砜(DMSO)直接浸提高等植物叶绿素,同样是测定提取液的光密度值来计算叶绿素含量，但步骤较为简省，但是对实验条件的控制要求较严格。呵呵！以下是大体的步骤：叶绿素的分子结构是由四个吡咯环组成的一个卟啉环，此外还有一个叶绿醇的侧键，由于分子具有共轭结构，因此可吸收光能。叶绿素是脂类化合物，所以它可溶于丙酮、石油醚、己烷等有机溶剂，用有机溶剂提取的叶绿素可在一定波长下测定叶绿素溶液的消光值，利用Arnon公式计算叶绿素含量。

二、材料、仪器与试剂
1．材料：菠菜叶片
2．仪器：分光光度计、天平、具塞刻度试管（15ml）、研钵、漏斗、滴管、滤纸、试管架。
3．试剂：丙酮、CaCO3
三、操作步骤
样品处理及测定：准确称取洗净，擦干（去叶片中脉）的菠菜叶片1.00g，于研钵中加少许CaCO3 研磨成匀浆，用80%丙酮浸提，将上清液过滤（滤纸先用80%丙酮湿润），用滴管吸取80%丙酮分次把研钵中叶绿素浸提液和残渣洗净，然后再用丙酮逐滴把滤纸上的叶绿素溶液洗净，全部转移到具塞刻度试管，定容到15ml,于652nm波长处测定消光值，如需测定叶绿素a和b的含量，可于663nm 和645nm波长处分别测定其消光值，按分式（2）或（3）计算。
四、结果计算
OD652
A＝ ×稀释倍数×100 （1）
34.5×W
式中：A：叶绿素含量（mg/100g）；
W: 样品重（g ）
Ca——0.0127×OD663－0.00269×OD645（2）
Cb——0.0229×OD645－0.00468×OD663（3）
Ca,Cb——分别代表叶绿素a和叶绿素b的含量（mg/ml）
五、注意事项
叶绿素是一种极不稳定的化合物，它能被活细胞中的叶绿素酶水解，脱去叶醇基，转变为叶绿酸。光照和高漫都会使叶绿素发生氧化和分解，因此在分离提取叶绿素的过程中，必须注意控制这些因素，尽可能在低温和弱光下进行，并注意缩短实验时间，以防止叶绿素的破坏。

B. 高中生物教材提取植物色素的实验

滤液中含有四中色素,画的滤液线要细而直,这样可以让色素在同一个起跑线上,将虑纸放到层析液中,溶解度以及含量不同的色素,"跑"速度不同,这样就可以分离色素了.希望能解决你的问题

C. 高中生物实验 绿叶色素的提取

叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里，室温保持在25℃。

提取步骤如下：

(1) 取1000克新鲜的绿叶，在韦氏搅切器中粉碎。

(2)将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取，直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。

(3)将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中，然后轻轻地旋转，同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水溶杂质被丢弃，只剩石油醚溶液。

(4)将石油醚溶液用蒸馏水再次净化后，用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上，最后得到黄绿色悬浮液。

(5)用无水硫酸钠对悬浮液进行干燥，并将其渗入到3cm厚的蔗糖粉末制成柱中，然后用石油醚清洗沉淀的色素去掉类胡萝卜素，使之只含有天然的叶绿素。

(6)含有天然叶绿素的蔗糖柱分两层，绿层有4-10mm的叶绿素b层，另一蓝层为2-6mm的叶绿素a层。

(7)将位于蓝层正中的部分(约占蓝层的一半) 放入醚中，对此悬浮液进行过滤、洗提，用蒸馏水清洗，用硫酸钠干燥，再用器皿进行过滤后，得到叶绿素a。

(8)将(6)中的绿层中间部分移出，迅速放入醚中过滤、洗提，制成叶绿素b醚溶液。

(3)植物色素提取实验装置扩展阅读：

叶绿素的分离

色谱法是一种很好的分离纯化、鉴定有机化合物的重要方法，尤其是在微量分析中应用的更是广泛。果蔬中色素主要包括脂溶性的胡萝卜素、叶黄素、叶绿素和水溶性的花青素。

在提取实验时，我们可以利用相似相溶的原理把水溶性的花青素滤掉，继而可以利用薄层色谱、柱色谱、高效液相色谱对胡萝卜素、叶黄素和叶绿素进行分离。

由于这三种色素的极性依次减弱，可以适当地选择单一的有机溶剂或者不同配比的混合溶剂作为展开剂和洗脱剂，确定最佳的优化分离条件。

叶绿素-网络

D. 最适合作为“提取植物叶绿体色素”实验材料的是（）A．番茄果实B．西瓜皮C．暗培养的绿豆芽D．菠菜叶

A、提取色素应选用含有叶绿体的植物组织，番茄果实不含叶绿体，回A错误；
B、西瓜皮含有色素少答，且不易提取，B错误；
C、暗培养的绿豆芽叶不含有叶绿素，不适合作为该实验的实验材料，C错误；
D、菠菜叶片含有叶绿体，且叶绿素含量高，D正确．
故选：D．

E. 在植物色素提取实验中为什么不能放入过多的干燥剂

如果放入过多干燥剂，容易造成植物细胞脱水而死，色素提取就会受到影响，谢谢，望采纳……

F. 如图是“绿叶中色素的提取和分离”实验的部分材料和用具．据图回答下列问题：（1）图中步骤①加入研钵内

（1）研磨时需要加入3种物质：10 mL的无水乙醇，作用是溶解色素；二氧化硅可以增大摩擦力，使细胞和叶绿体破碎；细胞研磨破碎后，会溢出有机酸，为防止叶绿素中的镁被氢取代，破坏叶绿素，研磨时需加入少许碳酸钙中和有机酸．
（2）过滤研磨液时，漏斗基部不能用滤纸，因为色素可吸附在滤纸上．一般用一层尼龙布过滤．
（3）剪去两角的作用是防止两边色素扩散过快．画滤液细线的要求是细、齐、直，防止色素带重叠．
（4）层析时的关键技术是不能让层析液没及滤液细线，否则，滤液细线会被层析液溶解，不能分离．4种色素溶于层析液中，因溶解度的差异，造成在滤纸条上扩散速度不同，从而达到分离的目的．由于层析液有毒，而且可以挥发，所以要加盖．色素带的宽度是由各种色素含量不同造成的，含量越多，色素带越宽，一般植物叶片中叶绿素a含量最多，所以叶绿素a带最宽．扩散速度最快的是胡萝卜素，在色素带的最上层．
（5）叶绿素不稳定，易分解，而叶黄素和胡萝卜素较稳定．
故答案为：
（1）无水乙醇二氧化硅碳酸钙
（2）尼龙布
（3）防止色素带不整齐细、齐、直
（4）层析液不要没及滤液细线防止层析液挥发叶绿素a胡萝卜素
（5）叶绿素a和叶绿素b胡萝卜素和叶黄素

G. 如何提取植物色素（包括：器材、药品）

一般考点
1、加入二氧化硅的原因：有利于充分研磨
2、加入碳酸钙的原因：防止色素破坏。研磨时会破坏溶酶体，溶酶体里面的有机酸会流出来而色素中有Mg，碳酸钙能和酸反应，防止酸和镁反应，破坏了色素。
3、加入无水乙醇的原因：光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。
4、层析液的作用：光合色素可溶于层析液中，不同的光合色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。这样，最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。

（1）提取光合色素
用天平称取5 g绿色叶片，剪碎，放入研钵中。向研钵中放入少量二氧化硅和碳酸钙，加入10 mL无水乙醇（也可用丙酮），迅速、充分地研磨。在玻璃漏斗基部放一块单层尼龙布，将漏斗插入试管。将研磨液倒入漏斗，及时用棉塞塞严盛有滤液的试管。
①剪碎和加二氧化硅的作用：利于研磨充分
②加入碳酸钙的原因：防止色素破坏。研磨时会破坏溶酶体，溶酶体里面的有机酸会流出来而色素中有Mg，碳酸钙能和酸反应，防止酸和镁反应，破坏了色素。
③加入无水乙醇（丙酮）的原因：光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。
④迅速研磨：防止乙醇挥发和色素的破坏。
⑤单层尼龙布的作用：过滤、去除杂质。
⑥用棉塞塞严的原因：防止乙醇（丙酮）挥发、提取液变少、变干。

（2）制备滤纸条
将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条一端剪去两角，在此端距顶端1 cm处用铅笔画一条细横线。
①滤纸条的长与宽略小于试管：既能使滤纸条轻松地放入试管内，易于取出，也能防止滤纸条太小，弯曲塌陷在试管内。
②剪去滤纸条两角的作用：1.保证滤纸能立在烧杯中2.保证滤纸上的滤液线能水平向上扩展。
③1 cm：保证滤纸条有足够的长度泡在层析液中，又能使色素带不浸在层析液（分离液）中。
④用铅笔，不能用签字笔、圆珠笔、画笔的原因：签字笔、圆珠笔、画笔的笔液色素会也能溶于乙醇和层析液，污染从绿叶中提取的色素。

（3）画滤液细线
用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画细线（也可用玻片较短那一端的边缘沾取滤液后，印在滤纸条上）。待滤液线干后，重复画线一两次。
①滤液线要细，要均匀：保证滤液色素在同一起始点上。
②待滤液线干后再重复画线的原因：既保证了滤液线的色素量，也防止滤液线过宽。画的次数越多，色素量越多，越好跑，色素带也就分得越开，越清楚。

（4）分离光合色素
将适量的层析液（分离液）倒入试管，将滤纸条画线一端朝下，轻轻插入层析液中，迅速塞紧试管口。
①适量的层析液：保证足量用于色素的分离，防止层析液浸没滤液线，也防止空气污染（层析液易挥发、有毒），避免试剂的浪费。
②层析液的作用：色素可溶于层析液中，不同的色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的色素随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的色素在滤纸上扩散得慢。这样，最终不同的色素会在扩散过程中分离开来。
③注意不要让层析液触及滤液线。接触后会使大量滤液溶于层析液中，导致实验失败。
④塞紧试管口的原因：层析液易挥发，且具一定的毒性。

（5）观察、记录
待层析液上缘扩散至接近滤纸条顶端时，将滤纸条取出，风干。观察滤纸条上所出现的色素带及其颜色，并做好记录。
最后滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。

H. 请回答以下与实验操作相关的问题．（1）提取和分离该植物绿叶中色素时，绘制了四种色素在滤纸条上的分离

（1）色素在层析液中溶解度越大的，在滤纸条上扩散的速度会越快，则溶版解度最高的是丁．
（2）染权色体（质）是细胞中容易被碱性染料染成深色的物质，龙胆紫溶液（“醋酸洋红液“、“改良苯酚品红染液“、“苏木精“等都是碱性染料）．有丝分裂中期染色形态数目最清晰．
（3）在分解纤维素的微生物的分离中，纤维素分解菌的接种可用平板划线法和稀释涂布平板法．
（4）甲乙丙是一组对照实验，甲装置中的①是指米汤+唾液（或米汤和唾液），②是指热水．检测因变量的方法是在3支试管中各滴入1滴碘液，摇匀，观察试管内溶液颜色的变化．
故答案为：
（1）丁
（2）中龙胆紫溶液
（3）稀释涂布平板（4）米汤+唾液（或米汤和唾液）热水在3支试管中各滴入1滴碘液，摇匀，观察试管内溶液颜色的变化．