① 發酵染菌的原因
一.發酵罐
發酵罐在使用之前, 需要進行認真檢查, 以消除染菌隱患, 如攪拌系統轉動有無異常機械密封是否嚴密罐內的螺絲是否松動罐內的管道有無堵塞夾層
或罐內盤管是否泄漏罐體連接閥門嚴密度等等。機械密封目前在發酵罐上得到廣泛應用, 取代了以前攪拌軸採用的填料密封形式, 但是由於安裝
精度不高或選用的機械密封不合適, 仍然會由於軸封泄露造成染菌, 因此在安裝攪拌軸時要注意對中, 筆者所在發酵車間採用拉桿固定可調的中間軸
承, 通過調整中間軸承位置來減少攪拌軸的擺動
二.發酵罐附屬設備
發酵罐附屬設備有空氣凈化系統, 溫度、壓力
流量等控制系統及相應的管道閥門。哪一個環節出
問題都會造成發酵失敗。
1.空氣凈化系統
傳統的空氣凈化使用活性炭、棉花、超細玻璃
纖維紙做過濾器, 過濾效果差, 操作復雜。目前
國內的膜過濾技術比較成熟, 用偏二氟乙烯
製成的折疊微孔濾膜濾芯, 過濾精度高, 流量大。
使用時只要注意過濾器前壓縮空氣除濕脫油, 並按
規范對過濾器滅菌, 空氣保證無菌還是沒有問題
的。而且膜對壓縮空氣中的水分不敏感, 膜本
身的疏水性強, 使用中注意過濾器排水, 解決了以
前當空氣濕度過大導致棉花過濾器不能使用的問
題。
2.溫度、壓力流量等控制系統
發酵罐實消是對發酵培養基進行徹底的滅菌處
理, 利用高溫過飽和蒸汽的強穿透能力使各種細
菌、真菌蛋白質凝固而死亡。表是各種微生物生
長最適溫度、及致死溫度、致死時間范圍, 在工
業滅菌中, 對預熱時間、蒸汽閥門的開度、滅菌溫
度、滅菌壓力和泡沫控制等, 都有嚴格要求, 一個環節
出現問題,就容易導致染菌。一般工業上滅菌溫度在
℃ , 滅菌壓力以上, 而保證滅菌溫度和壓
力准確的就是各種溫度探頭、壓力感測器。因此定
期對這類探頭、感測器、電極的檢定十分重要。
3.閥門
閥門對介質的密封性可分為級, 公稱級、低
漏級、蒸汽級和原子級。公稱級與低漏級密封適用
於關閉要求不嚴密的閥門, 例如用於控制流量的閥
門。蒸汽級密封適用於蒸汽和大部分其他工業用閥「的閥座、閥桿和閥體連接部的密封。原子級密封適用於介質密封性要求極高的場合, 如宇宙飛船和原子能動力設備等。
發酵工業中由於使用高溫蒸汽對發酵設備進行滅菌, 因此閥門要求是蒸汽級密封。閥門在發酵設備中使用最多, 用的閥門也有各種型號, 考慮到閥「使用范圍和易於維護, 發酵工業上使用最多的是截止閥。近年來國內己開發發酵專用閥門, 效果較為理想, 如條件許可, 也可選用。
總之, 設備是生產的基礎, 設備運行狀態的好壞直接影響到生產的正常進行, 發酵本身的技術性強, 對設備的要求更高, 我們要樹立預防為主的思想, 從設備上杜絕發酵染菌的隱患。
希望能對你有用
② 實驗室5L通氣機械攪拌發酵罐的實罐滅菌流程
你的發酵罐是用什麼樣的滅菌方法？蒸汽原位滅菌（有蒸汽發生器）？不是的話，直接把罐放到滅菌鍋里去滅！
下面是蒸汽原位滅菌的流程：
滅菌要進行空消和實消兩步。空消是在投料前，對氣路、料路、種子罐、發酵罐用蒸汽進行滅菌，消除所有死角的雜菌，保證系統處於無菌狀態。實消是當罐內加入培養基後，用蒸汽對培養基進行滅菌的過程，種子罐和發酵罐實消的操作過程相同。
空消過程中，維持蒸汽溫度121℃左右，先開排污水閥和進氣閥，排空夾套水，在對管路、濾器和種子罐發酵罐滅菌，空消時間大約為30到40分鍾，當設備初次使用或者長期不用的情況下，最好採用間歇滅菌的方法，間歇滅菌指第一次空消結束後，間隔3到5個小時再空消一次，以便殺死芽孢。除菌過濾器的濾芯不能承受高溫高壓，因此，蒸汽減壓閥必須調整在0.13Mpa，不得超過0.15MPa。空消時，應將罐上的接種口、排氣閥及料路閥門微微打開，使蒸汽通過這些閥門排出，同時保持罐壓為0.13～0.15Mpa。空消結束後，應將罐內冷凝水排掉，並將排空閥門打開，防止冷卻後罐內產生負壓、損壞設備。空消時，溶氧、PH 電極取出，可以延長其使用壽命。
空消結束後，應盡快將配好的培養基從加料口加入罐內，此時夾套內應無冷卻水。培養基在進罐之前，應先糊化，一般培養基的配方量以罐體全容積的70%左右計算(泡沫多的培養基為65% 左右，泡沫少的培養基可達75%～80%)，考慮到冷凝水和接種量因素，加水量為罐體全容積的50% 左右，加水量的多少與培養基溫度和蒸汽壓力等因素有關，需在實踐中摸索。先開啟機械攪拌裝置，使罐內物料均勻混合，轉速50～100rpm。打開夾套蒸汽閥、排汽閥，對罐內培養基預熱，當罐內溫度升到90℃時，關閉夾套進汽閥，打開罐內所有進汽閥，通入蒸汽。當罐溫上升到105℃時，緩緩打開排汽閥，將罐頂冷空氣排掉，持續五分鍾後，關閉排汽閥。當罐壓升至0.12Mpa，溫度升到121～123℃時，控制蒸汽閥門開度，保持罐壓不變，30 分鍾後停止供汽。打開冷卻水的進排閥門，在夾套內通水冷卻，當罐內壓力降至0.05Mpa 時，微微開啟排氣閥和進氣閥，進行通氣攪拌，加速冷卻速度，並保持罐壓為0.05Mpa，直到罐溫降至接種溫度。
③ 求助：發酵種子罐染菌
你好：根據你的描述「菌型都為畸桿」大致可以推斷出染菌原因是底料未滅透內，雜菌為桿菌。
同一個發容酵罐總是染菌，檢查一下罐體是否存在滅菌死角：比如蒸煮蒸汽壓力和溫度不足，無法滿足滅菌需要；滅菌時與罐體相連的管道和閥門是否都能保證有足夠的汽封蒸汽向罐內吹掃；空氣過濾器是否完好，能否滿足發酵需求，最好用多米尼克的，最小可以過濾掉0.2um的雜菌；最大的問題是否是這個新上的種子罐在設計上是否有重大失誤？
如果染菌發生在發酵前期，有可能是底料未滅透或操作失誤。
如果染菌發生在發酵中後期，那麼極有可能是發酵罐或者公用工程有問題。
染菌原因主要分2大方面：人為操作失誤和設備問題！
如果連續出現染菌，極有可能是設備問題，包括發酵罐，公用工程。
還得引用那句老話：具體問題具體分析。每一次染菌的原因都不盡相同。我干發酵滅菌操作都11年了，每次操作還是一樣仔細認真的。說一個數據你可能不會相信：我們車間已經連續4年共2000批主罐未發生染菌！諾維信天津生物技術有限公司發酵車間！
④ 發酵罐的培養基滅菌應注意那幾個方面，與搖瓶培養基滅菌有什麼不同
在培養基滅菌之前，通常應先將與罐相連的分空氣過濾器用蒸汽滅菌並用空氣吹乾。實罐滅菌時，先將輸料管路內的污水放掉沖凈，然後將配製好的培養基泵送至發酵罐（種子罐或料罐）內，同時開動攪拌器進行滅菌。滅菌前先將各排氣閥打開，將蒸汽引入夾套或蛇管進行預熱，待罐溫升至80~90℃，將排氣閥逐漸關小。接著將蒸汽從進氣口、排料口、取樣口直接通入罐中（如有沖視罐也同時進汽），使罐溫上升到118~120℃，罐壓維持在0.09~0.1Mpa（表壓），並保持30min左右。各路進氣要暢通，防止短路逆流，罐內液體翻動要激烈；各路排汽也要暢通，但排汽量不宜過大，以節約用氣量。在保溫階段，凡進口在培養基液面以下的各管道及沖視鏡管都應進汽；凡開口在液面之上者均應排汽。無論與罐連通的管路如何配製，在實消時均應遵循「不進則出」的原則。這樣才能保證滅菌徹底，不留死角。保溫結束後，依次關閉各排汽、進汽閥門，待罐內壓力低於空氣壓力後，向罐內通入無菌空氣，在夾套或蛇管中通冷卻水降溫，使培養基的溫度降到所需的溫度，進行下一步的發酵和培養。在引入無菌空氣前，應注意罐壓必須低於過濾器壓力，否則物料將倒流入過濾器內，後果嚴重！滅菌時，總蒸汽管道壓力要求不低於0.3~0.35Mpa，使用壓力不低於0.2Mpa。
⑤ 發酵罐。管路的消毒工藝及操作流程
你問的問題太寬泛，要想得到滿意的答復最好能具體點，比如你用的e.coli菌株、表達蛋白的一專些情況、發屬酵規模、你想採用的工藝等等。
具體來說以下幾個步驟是共有的：
1.種子（具體幾級要看你的實際情況）最後一級一般接種量10%-15%
2.前期培養，根據工藝可以採用fbc或bc工藝方法，營養原則是不多不少。
3,.誘導階段，此時以蛋白表達為主，碳源除了乳糖最好不要有其他的，氮源還是需要適當補加，另外誘導時間也是一個重要參數，這要結合你的工藝產品來確定。
4.放罐，最重要的考慮因素就是不要讓菌種變衰老而自溶。
以上是我的淺見，有什麼具體問題可以再探討。
⑥ 發酵罐出現雜菌是否會對產物引入雜質
輕度染菌會影響到本批發酵產品的單位和收率，還可能會為下批生產埋下繼續染專菌的禍根，嚴屬重的染菌除嚴重影響產品產量和質量外，極可能造成生產不能有序進行或無法進行不銹鋼發酵罐染菌的原因有物料、設備、蒸汽(空氣)和人為等因素。
發酵罐染菌的物料原因：物料在存放中會受到擠壓結塊，不能全面消毒。
發酵罐染菌的設備原因：罐體消毒不徹底的影響，罐內部件因素造成染菌，罐內管路因素造成染茵。發酵罐內管道走向、分布是否合理，會影響消毒質量，罐體外設備因素造成染菌：閥門及管路。
發酵罐染菌的蒸汽(空氣)原因：蒸汽一直不穩定，時有過熱和不飽和情況產生，會造成消毒工作不能正常進行，滅菌效果不佳，染菌機會倍增。 空氣管路的清潔鑄鐵管道帶銹會損害了各級過濾器膜芯，發酵水平受限，染菌幾率增加。
發酵罐染菌的人為原因：人為因素在染菌上佔有一定的比重，消毒不當反而會增加了染菌幾率或檢修罐閥時不精心造成泄露而染菌，所以消毒工作要求員工精心細致地操作，才能盡量的避免罐體染菌的可能。
⑦ 發酵罐如何滅菌徹底
發酵罐的結構比較復雜，對於內部的邊邊角角不容易消毒，一般的發酵罐有自動清洗裝置，清洗完之後徹底滅菌
1.
在培養基滅菌之前，通常應先將與罐相連的分空氣過濾器用蒸汽滅菌並用空氣吹乾。實罐滅菌時，先將輸料管路內的污水放掉沖凈，然後將配製好的培養基泵送至發酵罐（種子罐或料罐）內，同時開動攪拌器進行滅菌。滅菌前先將各排氣閥打開，將蒸汽引入夾套或蛇管進行預熱，待罐溫升至80~90℃，將排氣閥逐漸關小。接著將蒸汽從進氣口、排料口、取樣口直接通入罐中（如有沖視罐也同時進汽），使罐溫上升到118~120℃，罐壓維持在0.09~0.1Mpa（表壓），並保持30min左右。各路進氣要暢通，防止短路逆流，罐內液體翻動要激烈；各路排汽也要暢通，但排汽量不宜過大，以節約用氣量。在保溫階段，凡進口在培養基液面以下的各管道及沖視鏡管都應進汽；凡開口在液面之上者均應排汽。無論與罐連通的管路如何配製，在實消時均應遵循「不進則出」的原則。這樣才能保證滅菌徹底，不留死角。保溫結束後，依次關閉各排汽、進汽閥門，待罐內壓力低於空氣壓力後，向罐內通入無菌空氣，在夾套或蛇管中通冷卻水降溫，使培養基的溫度降到所需的溫度，進行下一步的發酵和培養。在引入無菌空氣前，應注意罐壓必須低於過濾器壓力，否則物料將倒流入過濾器內，後果嚴重！滅菌時，總蒸汽管道壓力要求不低於0.3~0.35Mpa，使用壓力不低於0.2Mpa。
2.
空罐滅菌（空消）即發酵罐罐體的滅菌。空消時一般維持罐壓0.15~0.2Mpa，罐溫125~130℃，保持30~45min；要求總蒸汽壓力不低於0.3~0.35Mpa，使用汽壓不低於0.25~0.3MPa。
⑧ 發酵罐在位滅菌和離位滅菌的區別
發酵過程的術語就是原位滅菌原位滅菌指的是在不改變罐體在生產中的結構進行滅菌,一般採用在線通蒸汽滅菌. 與它相對的是離線滅菌離線滅菌可以理解為把罐子拆下來滅菌,小的罐可以搬到滅菌箱滅菌
⑨ 發酵罐進行滅菌的進排氣原則是
先大後小，主進汽暢通，壓縮排氣，排氣全部小開