『壹』 逆轉錄PCR的實驗步驟用到哪些試劑和儀器
一、實驗器具與材料:
1、移液器:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl
2、吸頭:1ml、200μl、20μl
3、勻漿管:5ml
4、吸頭台:放置1ml吸頭的一個,放置20μl吸頭的一個
5、EP管:1.5ml、0.2ml、100μl
6、試劑瓶:2個60ml的棕色試劑瓶(廣口,帶蓋);1個125ml的白色試劑瓶(放無水乙醇)
7、量筒:50ml、250ml、500ml
8、容量瓶:250ml、500ml、1000ml
9、試管架:5ml、1.5ml、20μl
10、鹽水瓶:250ml、500ml各2個備用,一個裝無水乙醇,另一個裝DEPC水
11、鋁制飯盒:4個
12、塑料小飯盒:1個
13、大瓷缸:2個
14、錫泊紙:一卷
15、卷紙:2卷
16、三角燒瓶:帶蓋,稍大
二、實驗器具的處理與准備
1、塑料製品:(包括槍頭、EP管、勻漿管等)
先將DEPC水從容量瓶中倒入瓷缸中,將塑料製品逐個浸泡其中,其中小槍頭需要吸管打入DEPC水,過夜,然後高壓,再烤乾備用,實驗前將槍頭等放入吸頭台,再高壓一次(EP管)
2、玻璃製品:泡酸過夜,沖洗干凈,蒙錫紙烤乾備用(DEPC水泡)(洗凈後先泡1‰DEPC過夜,再烤乾)
3、勻漿器:(包括剪刀、鑷子)先洗凈後,再高壓(不需要泡DEPC)
三、試劑配製:
1、DEPC水:吸出1ml放在1000ml雙蒸水中配成1‰DEPC水,放在1000ml容量瓶中靜置4小時備用。
2、75%乙醇:用無水乙醇DEPC水配,然後放-20℃保存(其中DEPC水需先高壓)
3、異丙醇:放入棕色瓶中
4、氯仿:放入棕色瓶中
5、瓊脂糖
僅供參考