差速離心用什麼儀器

㈠ 【離心課堂】差速離心方法

在實驗過程中，由於樣品的各種性質差異，只有選擇了正確的離心方法，才能獲得預期的分離純化結果。常用的離心方法主要有差速離心法、密度梯度離心法。其中密度梯度離心法又可細分為速率區帶離心和等密度梯度離心法。本期向大傢具體介紹離心方法之差速離心。

離心方法之差速離心

差速離心法(differentialvelocity centrifugation method)又稱離心力差分離法。

差速離心法原理

利用樣品中各組分沉降系數的差異，對不同的微粒施以不同的離心力，經過多次離心，離心速度逐步加大，將不同的微粒依次沉降，從而實現離心分離。

差速離心原理可用離心力表達式說明：F=ma， 其中 a=ω²R。

由於小粒徑的微粒質量小，分離時所需離心力大。為滿足大離心力的需要，必需提高其旋轉速度，方可分離。以不同的離心力分離不同粒徑的微粒是動力學的分離方法，特別是沉降速度差別較大的微粒多採用此種分離方法。

如果分離樣品中有大中小三種不同粒徑的微粒，對它們施以不同的離心力，大粒徑的微粒，其質量較大，將會首先沉降；分離上清液，以更大轉速對上清液進行第二次離心，中顆粒被分離出來；再取上清以更大離心力，更高的轉速，最後沉降小顆粒，以達到不同顆粒的分離，如圖1所示。

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㈡ 離心機的使用注意事項以及風險預防

實驗室離心機廣泛應用於醫院、科研機構、食品葯品檢驗和食品衛生等領域。選擇離心機及離心管，注意操作安全和風險防範是關鍵。離心機分為台式、立式、過濾、沉降、低速、高速、超高速、微量、小、大、超大容量以及冷凍與常溫機型。

選擇離心機需考慮分離需求：結晶產品時，需低速離心機分離，轉速在4000轉/分鍾至7000轉/分鍾，適用於台式或落地式低速大容量機型；直徑1-50微米的物質分離，推薦低速離心機，轉速為4000-7000轉/分鍾，相對離心力約為2000g-9420g；病毒等直徑0.1-1微米的物質，高速冷凍離心機適合，轉速在10000轉/分鍾至20000轉/分鍾，離心力約為10000g-100000g；蛋白質、DNA、RNA等直徑0.002-0.1微米的組分分離，需要超速離心機，轉速40000轉/分鍾以上，離心力要求達到100000g-400000g以上。

易燃易爆物品分離時，應選擇防爆離心機；有機活性物質分離過程中保持恆溫時，使用冷凍離心機。

計算離心力使用相對離心力（RCF），RCF = (g * R * N) / (1000 * 1000)，其中g為重力加速度，R為離心半徑，N為轉速。水平、角、垂直轉子的轉子離心半徑R示意圖需參考相關資料。

離心機安裝應放在穩固、水平、避免陽光直射的地面或檯面，確保周圍至少30cm無雜物，遠離易燃易爆品，並使用穩定電壓，最好單獨插座，外殼可靠接地。

離心管選擇：玻璃離心管僅適用於低速離心機；PA和PP管化學性能穩定，半透明，能耐高溫消毒；PC管透明度好、硬度大，耐高溫消毒，但不耐強酸強鹼及某些有機溶劑；CN管質地較軟，透明，不耐強酸強鹼及某些有機溶劑，適合蔗糖、甘油等密度梯度離心；鋼制離心管強度大、耐熱、抗凍、抗化學腐蝕，廣泛用於多種離心。

離心管安裝需先在天平上精確平衡，確保重量偏差不超過說明書范圍。操作時注意密度配平，避免奇數個離心管的不平衡，且在使用無蓋離心管時，液體不宜過滿，以免離心時甩出；使用蓋密封離心管要求抽真空時，液體需滿裝，以防止離心時塑料離心管上部因真空變形。

常用的離心方法包括差速離心、速率區帶離心和等密度區帶離心。差速離心法適用於生化樣品提取，通過增加離心力逐級分離；速率區帶離心法適用於大小不同而密度相同物質的分離，形成區帶；等密度區帶離心法適用於存在密度差的顆粒分離，直至達到等密度點。

離心機使用注意事項和風險預防包括離心管平衡、裝載溶液的合理性、密封情況、離心方法的選擇等，避免常見事故如離心管破裂、轉子不平衡、轉子損壞等。加強安全意識、定期維護設備、嚴格操作流程是關鍵。