測rna的儀器怎麼用

Ⅰ PCR儀器的使用方法

1目的 </B>保證GeneAmp 7000型熒光定量PCR儀的正常使用。 2 該SOP變動程序 </B>本文件的變動，可由任一使用該文件的工作人員提出，報經室技術負責人，由季度組長會議決定。如通過則公布實行。 3 適用范圍 </B>GeneAmp 7000型熒光定量PCR儀。 4 使用方法 </B>⑴依次打開電腦顯示器和電腦主機電源開關，進入Windows 2000界面。 ⑵接著打開PCR儀電源開關，預熱5分鍾。 ⑶按需要在電腦上設定一個新的運行版面和程序。 ⑷推開滑門，將樣品放入樣品槽內，關上儀器滑門。 ⑸運行程序，在反應結束後按Save鍵儲存實驗結果。 ⑹關閉PCR儀電源開關。 ⑺分析實驗結果；發放臨床報告。 5 注意事項 </B>⑴儀器應放置在水平堅固的平台上，外界電源系統電壓要匹配，並要求有良好的接地線。 ⑵環境溫度保持在23℃左右，濕度保持在60％左右。 ⑶儀器應配備功率≥3000W的穩壓器。 ⑷儀器應定期清潔維護。 ⑸儀器使用時應嚴格遵守上述使用步驟。 6 維護方法 </B>6.1微軟Windows 2000操作系統的維護 </B>硬碟驅動器每月29日運行一次碎片清除程序，使用Norton Utilities或類似軟體。現以Norton為例： ①放入Norton Utilities光碟，運行安裝（Setup）文件。 ②安裝完後取出Norton Utilities光碟，重新啟動計算機 ③運行Norton Utilities軟體，並啟動其清理碎片/優化程序。 ④運行完成後，檢查以確信無嚴重錯誤記錄，退出Norton Utilities。 ⑤以後每次運行Norton Utilities軟體中的清理碎片/優化程序就行了。 6.2 7000 PCR擴增儀的維護 </B>1.樣品槽的清潔 樣品槽每月29日進行一次清潔，如出現樣品槽污染情況則隨時清潔。 操作方法： ①運行25℃HOLD程序使樣品槽溫度達到室溫。關閉儀器，等待10分鍾。 ②從樣品槽移去樣品架。 ③在樣品槽中加入少量95％乙醇，用棉簽擦洗反應孔。 ④用干棉簽吸干乙醇。 ⑤向里推動滑門，鎖住，使樣品槽升溫到50℃，以蒸發掉多餘的乙醇。 2.熱蓋的清潔 熱蓋每月29日進行一次清潔，如有需要隨時進行。 ①運行25℃HOLD程序使樣品槽溫度達到室溫。關閉儀器，等待10分鍾。 ②逆時針旋轉GeneAmp 7000光源檢測器頂部旋鈕。向後推GeneAmp 7000光源檢測器至滑軌距離的大約1/3處。 ③GeneAmp 7000光源檢測器滑軌上有缺口。從這些缺口垂直抬起GeneAmp 7000光源檢測器，小心側放於儀器頂蓋上。不要從儀器取走熱蓋。 ④用濕潤的鏡頭紙清潔加熱蓋，待干。 ⑤將GeneAmp 7000光源檢測器重新安裝回滑軌。 6.3 GeneAmp 7000光路系統的維護 </B>1.調准ROI參照條 調准ROI參照條在儀器更換鹵素燈、儀器定期校準或儀器維修後進行。不得由一般實驗人員進行該項操作。 ①推開滑門，在樣品槽中放入熒光檢測板。 ②GeneAmp 7000儀器滑門向前滑移蓋住樣品槽，並關緊。 ③從Start菜單或桌面點選運行GeneAmp 7000 SDS管理軟體。 ④積分時間從512ms開始，用位置調整點，調節ROI的高度與右邊線。 ⑤逐漸增加積分時間，直到可以看到至少四個塊（約4096ms）。 ⑥調整最左側位置調整點。 ⑦減少積分時間到1024ms，調整上方與底部的位置調整點。 ⑧減少積分時間以便最右側塊可見但未飽和（約512ms），調節最右側位置調整點。如有需要用右上角拖動點調整圖象的傾斜度（以左上角為中心旋轉）。 ⑨調節後的參照條寬度必須在ROI參照塊間有小空隙。 2.校正ROI光路 ROI光路校正每月29日進行一次，以便確信結果仍然是優化的。 ①推開滑門，在樣品槽中放入熒光檢測板。 ②GeneAmp 7000儀器滑門向前滑移蓋住樣品槽，並關緊。 ③從Start菜單或桌面點選運行GeneAmp 7000 SDS管理軟體。 ④點選Show ROI復選框。每個樣品孔周圍出現一藍色橢圓圈。 ⑤點選Show Saturation復選框。 ⑥設定積分時間為1024ms；打開鹵素燈和光閘。 ⑦點擊LIVE按鈕獲取圖象，然後在任何地方左擊停止。獲取中等程度未飽和圖象（無紅色圖象）。 ⑧從Edit菜單中選擇Calibrate ROIs每個孔都會選取合適的ROI，確定96孔都被藍色橢圓圈正確界定。 ⑨圖象太亮太暗都會出現錯誤信息，相應增加或減少積分時間，並重復上述第8步直到無錯誤信息出現。 ⑩檢查孔ROI位置，所有孔信息都應包含在96個ROI橢圓圈中。如果沒有，重復8和9步。 3.檢查樣品槽的熒光污染 檢查樣品槽的熒光污染每月29日進行一次，如有需要隨時進行。 ①開啟GeneAmp 7000型熒光定量PCR儀電源。 ②從Start菜單或桌面點選運行GeneAmp 7000 SDS管理軟體。 ③從樣品槽中移去反應板。GeneAmp 7000儀器滑門向前滑移蓋住樣品槽，並關緊。 ④單擊New Document建立一個新的GeneAmp 7000文件 ⑤點擊instrument中的catibrate顯示ROI inspector窗口 ⑥把Exposure Time調到最大，把Capture image From調到最敏感的FiterB點,單擊Snapshot獲取圖象。 ⑦減少積分時間，改變Capture image From中的A，B，C，D單擊Snapshot 觀察96孔中背景熒光。如孔有顯著熒光則表示該孔存在熒光污染。 ⑧按照樣品槽的清潔程序清洗樣品槽。 4.更換鹵素燈 儀器使用大約2000小時後應更換鹵素燈。 ①關閉儀器，冷卻15分鍾。 ②將樣品板放入儀器樣品槽，關閉滑門。在儀器的頂部向上打開燈艙門。 ③擰下固定燈罩的螺絲，將燈罩向前滑移，使其從設備上取下。 ④將舊燈泡向前滑移，使其從夾狀支架上取下，並將燈泡從燈座上拔下。 ⑤把新燈泡尾部的插桿插入燈座上的插孔，使二者連接起來。 ⑥使燈的長軸與儀器前向平行（即豎直於地面），將新燈泡滑回燈位。 ⑦在燈艙門處於打開狀態下，打開儀器，確證在儀器運行時燈也能打開。 ⑧蓋上燈罩，擰緊螺絲，關上燈艙門。 ⑨若新鹵素燈不工作，GeneAmp 7000電源保險絲可能有問題。 7 校準 </B>GeneAmp 7000型熒光定量PCR儀為復雜精密儀器，其校準工作需由專業工程師進行。除與儀器廠家達成協議定期校準以外，以實驗判斷儀器校準狀態也可為何時進行儀器校準提供信息。 ⑴通過對室內質控圖的分析，我們可以及時發現系統誤差的出現。經過分析排除了試劑和人員誤差後，應懷疑是否儀器出現了檢測偏差需要校準。此時進行儀器狀態效驗實驗確定是否需要進行儀器校準。 ⑵儀器狀態效驗試驗 ①使用標准化試劑作為效驗試劑。 ②在儀器處於校準狀態下，由固定人員用標准化試劑對102、103、104、106標准品進行擴增實驗。該實驗在兩個月內應進行20次。分別計算標准曲線的斜率、截距、相關性的控制限。 ③每年6月、12月由固定人員進行上述實驗，觀察標准曲線的三個參數是否處在控制范圍和102標准品是否檢出。 ④當102標准品未檢出、標准曲線的三個參數超出控制范圍或僅出現後者時，先排除實驗的人員、試劑因素，再重復實驗。如結果依然，聯系廠家立即進行儀器校準。 ⑤當僅有102標准品未檢出時，檢查實驗全過程。再次上機檢測102標准品 兩枚。仍未檢出聯系廠家進行儀器校準。 ⑥儀器經過校準後，重復該實驗。結果歸入儀器檔案。標本前處理標准操作程序 </B>1 目的 </B>保證標本處理標准化、規范化，使不規范操作因素對實驗結果造成的影響減至最小。 2 該SOP變動程序 </B>本文件的變動，可由任一使用該文件的工作人員提出，報經室負責人決定。如通過則公布實行。 3 適用待處理標本范圍 臨床基因擴增實驗室現行檢測項目。 4 標准操作程序 4.1 DNA血清類（例如HBV） </B>⑴雙手戴上手套，從冰箱取出標本，將驗單和試管依次編號，收起驗單，棄去手套。 ⑵雙手換上新手套，用鑷子(夾取滅菌物品專用)取出1.5ml離心管，對應標本編號，置於離心管架上。 ⑶將移液器調到50�0�8l，先吸取50�0�8lDNA提取液加入到編好號的離心管中。然後吸取50�0�8l血清，加入離心管中混勻，注意每吸取一份血清標本應更換一次槍頭。處理全部標本，然後將離心管插到水浴板上，用鑷子放入水浴鍋，沸水浴10分鍾。 ⑷水浴完成後用鑷子將水浴板取出，轉至4℃靜置8～12小時，然後10000轉 5分鍾離心，取上清液2�0�8l點樣上機。 ⑸收拾檯面至准備狀態。 4.2 RNA血清類（例如HCV） </B>⑴雙手戴上手套，從冰箱取出標本，將驗單和試管依次編號，收起驗單，棄去手套。 ⑵雙手換上新手套，用鑷子(夾取滅菌物品專用)取出0.5ml滅菌離心管，對應標本編號，置於離心管架上。 ⑶先用5～40�0�8l的移液器，吸取10�0�8lRNA提取液A加入到編好號的離心管中，再用40～200�0�8l的移液器吸取50�0�8l 血清加入，最後用200～1000 �0�8l移液器加入200 �0�8lRNA提取液B，在震盪器上震盪混勻，冰上放置5分鍾，然後6000轉1分鍾離心。 ⑷去上清，留沉澱。加入450�0�8l 用DEPC水配製的75%的預冷乙醇洗滌沉澱，然後6000轉1分鍾離心，去上清。相同方法再洗一次，吸幹上清，65℃10分鍾烘乾。 ⑸給烘乾的沉澱中加入18 �0�8l的反應液I，混勻，再加入2 �0�8l逆轉錄酶，充分混勻，瞬時離心（3秒），放入溫箱，37℃45分鍾逆轉錄。 ⑹逆轉錄後95℃3分鍾高溫滅活，瞬時離心（3秒），取5 �0�8l上清立即點樣上機。 ⑺收拾檯面至准備狀態。 4.3 分泌物類（例如CT） </B>⑴雙手帶上手套，從冰箱取出標本，將驗單和試管依次對應編號，收起驗單，棄去手套。 ⑵雙手換上新手套，用鑷子（夾取滅菌物品專用）取出1.5ml離心管，對應標本編號後，置於離心管架上。 ⑶用鑷子擰下全部試管蓋並依次置於實驗檯面上，試管對應放置於試管架上。 ⑷向每隻試管中緩慢加入1ml無菌生理鹽水。 ⑸用左手取試管於旋渦振盪器上充分振盪。 ⑹將試管中的洗脫液全部轉至相應離心管。 ⑺將試管和離心管分別放回試管架和離心管盒中前一排對應位置，並用鑷子將管蓋對號蓋回，把試管架放回冰箱。 ⑻雙手換上新手套，用左手將離心管全部配平，按順序置於離心機中相應位置，以 12000轉離心5分鍾。去上清，沉澱再加1ml生理鹽水打勻，15000 rpm離心5分鍾。（如超過12管，則需分批進行）。 ⑼離心完畢後，左手取出離心管，傾倒上液，再瞬時離心，右手取移液器將管內殘液吸盡，只留下沉澱。如無明顯肉眼可見沉澱，則可在管內留下約50�0�8l液體。 ⑽依次向管中各加入50�0�8lDNA提取液，此時移液器應與管壁約成30度角，吸頭抵至沉澱上方靠管壁處，來回抽吸，將沉澱與DNA提取液混勻。 ⑾將加入DNA提取液的標本沸水浴10分鍾。 ⑿將沸水浴後的標本放置至室溫，並將其放入4℃冰箱中6～8小時保證充分裂解。 ⒀離心標本10000 轉5分鍾。 ⒁換上新手套，取上清液2�0�8l點樣上機。 ⒂收拾檯面至准備狀態。 4.4痰液類（例如TB） </B>⑴取晨痰加入4倍體積4％氫氧化鈉待其充分液化(30分鍾)，液化過程中，振盪2～3次，如痰液粘稠，可延長液化時間。 ⑵取1 ml消化液加入離心管，10000轉離心5分鍾 ⑶棄上清留沉澱，加入1ml生理鹽水洗滌，10000 轉 5分鍾離心。 ⑷重復⑶操作，留沉澱，加入50�0�8lDNA提取液，混勻。 ⑸沸水浴10分鍾，4℃放置8～12小時。 ⑹10000 轉5分鍾離心，取上清2�0�8l點樣上機。

Ⅱ 分光光度計是怎麼使用的

分光光度計使用方法：

（1）儀器預熱。打開樣品室蓋（光門自動關閉）。開啟電源，指示燈亮，儀器預熱20 min。選擇開關置於「T」旋鈕，使數字顯示為「00.0」。

（2）旋動波長手輪，把所需波長對准刻度線。

（3）將裝有溶液的比色皿放置比色架中，令參比溶液置於光路。

（4）蓋上樣品室蓋，調節透光率「100％T」旋鈕，使數字顯示為「100.0T」。（如顯示不到100％T，則可加按一次。

（5）吸光度A的測量：儀器調T為0和100％後，將選擇開關轉換至A調零旋鈕，數字顯示應為「.000」。然後拉出拉桿，使被測溶液置入光路，數字顯示值即為試樣的吸光度A。

（6）測定完畢後，先打開樣品室蓋，再斷電源。比色杯應清洗干凈後，再貯放保存。

（7）濃度直讀 按MODE鍵，使CONC批示燈亮，交已標定濃度的溶液 移入光路，按下溶液調節鍵（↑100％T鍵的↓0％鍵），使數字顯示為標定值，將被測溶液移入光路，即讀出相應濃度值。

（8）儀器數字顯示背後，裝有接線柱，按下FUNC鍵，可輸出模擬信號

Ⅲ 如何用酶標儀測定RNA濃度

換濾光片，340、280、260、230
石英的96孔板，每個孔的體積為200ul，空白直接200ulDEPC水，實驗組196ulPEPC水+4ulRNA
如果換了濾光片了，測試步驟與MTT測試步驟差不多，主要就是設置吸光度，點擊四次吸光度，設置為340、280、260、230。
1、進板後確定板類型和板孔
2、設置吸光度，點擊四次吸光度，分別設置為340、280、260、230。
3、開始

酶標儀即酶聯免疫檢測儀是酶聯免疫吸附試驗的專用儀器又稱微孔板檢測器。可簡單地分為半自動和全自動2大類，但其工作原理基本上都是一致的，其核心都是一個比色計,即用比色法來進行分析。 測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下，用一般光電比色計無法完成測試，因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。

Ⅳ 核酸提取儀的主要步驟及方法

1. 環境溫度：5℃～40℃；環境相對濕度；電壓：50%~80%范圍：100～240Vac，50/60 Hz。
2. 將儀器放在水平實驗台上。
3. 放置儀器時應保證儀器周圍10cm內無障礙物；多台儀器同時使用時，每台儀器之間的距離應不小於50cm。
4. 儀器主機通電之前，必須先用六角扳手取下磁棒架固定螺絲，否則通電運行將會損壞儀器。
5. 96孔板和磁力棒套的安裝必須與對應的卡槽完全契合。
6. 請勿將該儀器安放在過度潮濕、高溫或陽光直射等溫度變化劇烈的區域，這可能會影響儀器的性能。
7. 請勿和其它大功率器件如離心機、空調等共用同一電源插座以免電源電壓波動影響系統運行。
8. 請將適配器連接到儀器，把適配器與電源插座相連，並打開儀器開關。
9. 請勿在有潛在有害液體或氣體的環境中操作該儀器。
10. 本儀器詳細操作步驟，請參閱以下的說明。
1.5注意事項
1. 儀器應放在濕度低、灰塵少並遠離水源的地方，室內應通風良好，儀器後方勿緊靠牆壁或堆放其他物品，以免影響散熱。
2. 實驗運行過程中禁止直接關閉電源開關。如果需要提前停止實驗，請先在觸屏軟體上點擊停止運行並確認後再關閉電源。
3. 裂解孔、洗滌孔和洗脫孔的樣本體積應在50μL-1000μL，避免體積過多，溢出孔位。
4. 機器運行及測試進行時，請勿觸摸加熱條，以免燙傷。
5. 紫外燈開啟滅菌時，請勿直視紫外光。
6. 移動儀器之前，請先切斷電源，再用螺釘固定磁棒架。
7. 儀器長期不使用時，請拔掉插頭，並用軟布或塑料袋覆蓋儀器，以防止灰塵進入。
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