⑴ 用紫外可見分光光度法測定苯甲酸
目的與要求1、掌握吸收曲線的測定與繪制方法 2、掌握直接比較法定量的方法 3、熟悉紫外分光光度計的使用方法 原理樣品中的苯甲酸在酸性條件下可用水蒸氣蒸餾法提取,在鹼性條件下形成苯甲酸鹽。苯甲酸及其鹽對紫外光有選擇性吸收,其吸收光譜的最大吸收波長在225nm左右。 用紫外可見分光光度計可測定物質在紫外光區、可見光區的吸收光譜,並可定量測定。 儀器與試劑1、儀器 751型分光光度計;1cm石英吸收池一套;50ml容量瓶二隻;刻度吸管5ml、10ml各一隻;滴管一隻。 2、試劑 苯甲酸標准儲備液(1ml相當於0.1mg苯甲酸);0.1mol/L、0.01mol/L氫氧化鈉溶液。 操作步驟操作步驟1、苯甲酸吸收曲線的繪制 取苯甲酸儲備液4.00ml,置於50ml容量瓶中,用0.01mol/L氫氧化鈉溶液定容,搖勻。此液1ml相當於8μg苯甲酸。 測定條件:氫燈,1cm石英比色皿,0.01mol/L氫氧化鈉為參比測定波長:從210nm-240nm每隔一定波長(2nm-5nm)測定一次吸光度,在225nm左右隔1nm測定一次吸光度。繪制苯甲酸的紫外吸收曲線,得最大吸收波長為測定波長。2、直接比較法測定樣品溶液中苯甲酸的含量取10.00ml樣品溶液,置於50ml容量瓶中,用0.01mol/L氫氧化鈉溶液定容,搖勻後備用。 以0.01mol/L氫氧化鈉溶液為參比溶液,在完全相同的條件下測定苯甲酸標准溶液和稀釋好的樣品溶液的吸光度值。3、結果處理 按下式計算樣品溶液中苯甲酸的濃度: Cx (μg/ml) = 8×50×Ax /(10As) Cx:待測樣品液的濃度;Ax是待測樣品溶液的吸收值;As是苯甲酸標准液的吸收值。