生化儀器測白蛋白是用的什麼方法

❶ 尿微量白蛋白檢測試劑盒怎樣使用

尿微量白蛋白指高於正常，但常規方法無法檢出的白蛋白尿，他的檢測作為早期腎損害診斷的重要指標已受到廣泛重視，測定方法包括放射免疫法、ELASA法等。應用較多的是免疫透射比濁法，但報告方式不一，有的以每升尿中白蛋白量表示，有的以24小時排泄量表示，常用的報告方式是以白蛋白/肌酐比值報告。我們以不同表示方法對正常人尿白蛋白的正常值進行了統計分析，並對部分高血壓、糖尿病患者進行測定，現報告如下。 1.儀器與方法：尿微量白蛋白測定試劑盒，肌酐測定試劑盒均購於凱創公司。儀器應用瑞士產Cobas MIRA plus全自動生化分析儀。尿白蛋白測定，取標本10 ml，1 500×g離心10分鍾，取上清10 μl，加緩沖液250 μl，抗血清50 μl，測定波長340 nm，反應溫度37℃，測定時限300秒，5點定標，范圍5～200 mg/L。肌酐採用Jaffe′s法，尿標本預先用生理鹽水30倍稀釋測定。
2.對象：對照組，健康人70例(男43例，女27例)，平均年齡41.2歲(21～54歲)，均排除高血壓、糖尿病及其他和腎病有關病史。糖尿病組，42例(男28例，女14例)，平均年齡51.2歲(34～72歲)，病程2～20年。高血壓組，62例(男39例，女23例)，平均年齡44.5歲(31～71歲)，血壓范圍160～190/95～120 mmHg，病程2～27年。臨床診斷Ⅰ期21例，Ⅱ期41例，其中Ⅱ期患者以眼底動脈硬化或心臟改變為診斷依據，尿常規分析蛋白定性均為陰性。
3.標本：對照組均分別留取24小時尿和隨機尿，測定24小時白蛋白和每升白蛋白及白蛋白/肌酐比值，並以不同方法計算正常值，患者組均取隨機尿測定白蛋白及肌酐，以白蛋白/肌酐比值報告，以上標本均當日測定。 1.不同計算方法尿白蛋白正常值：以mg/L計算，范圍2.2～41.7，均值12.7；以mg/gCr計算，范圍2.7～26.1，均值8.1；以mg/24 h計算，范圍2.4～34.3，均值11.4。因尿白蛋白值呈非正態分布，低值無臨床意義，在建立參考范圍時以百分位數法按單側值95%上限確定。從以上結果可見，不同計算方法的結果正常值范圍有明顯差異，尤以每升結果報告時，由於受尿量影響較大，正常范圍較寬，這樣易使部分異常標本落入正常范圍而延誤診斷。
2.高血壓組：診斷Ⅰ期、Ⅱ期高血壓的標準是以是否累及血管、臟器為依據，我們測定的41例Ⅱ期患者中，常規尿蛋白定性均未發現腎臟損害，診斷是以眼底改變和心電圖改變為主。我們將測定結果依據高血壓病期、病程、舒張壓水平分組進行統計，結果。Ⅰ期21例，范圍4.6～38.2 mg/gCr，均值17.8 mg/gCr；Ⅱ期41例，范圍5.1～62 mg/gCr，均值29.7 mg/gCr；舒張壓95～105 mmHg 34例，范圍4.6～43.4 mg/gCr，均值16.4 mg/gCr；舒張壓106～120 mmHg 28例，范圍5.0～62 mg/gCr，均值31.2 mg/gCr；病程2～10年19例，4.6～40.2 mg/gCr，均值13.1 mg/gCr；病程11～15年，28例，范圍4.6～54.2 mg/gCr，均值19.3 mg/gCr；病程16～27年，15例，范圍5.1～62 mg/gCr，均值37.2 mg/gCr。上述結果中以正常值? mg/gCr為界，Ⅰ期高血壓中有4例超過正常值，Ⅱ期高血壓中有14例超過正常值，說明這些患者已有輕度腎損害。尤其1期高血壓中有五分之一患者出現尿白蛋白異常，尿白蛋白的值與病程及血壓水平相關。
3.糖尿病組：42例糖尿病患者按病程分組，2～10年28例，尿白蛋白為5.2～39.6 mg/gCr，均值21.2 mg/gCr，大於25 mg/gCr 13例；11年以上組14例，結果為10.4～68.
1 mg/gCr，均值29.4 mg/gCr，大於25 mg/gCr 8例。通過了解病史並分析結果，堅持長期口服葯物或注射胰島素治療者與不經常治療兩者結果間有明顯差異(P?.01)。
測定尿微量白蛋白最理想的方法是留取24小時標本，但因留取困難，在實際應用上受到限制。隨機尿測定是目前最常用，最易行的方法。但應同時測定肌酐，因每日肌酐排除量相對恆定，可避免尿量變化對結果的影響。
尿微量白蛋白測定是一種靈敏、簡便、快速的測定方法，易於在常規實驗室中廣泛應用，對早期腎損害的診斷遠遠優於常規定性或半定量試驗。

❷ 血清白蛋白的測定方法

血清清蛋白測定一般採用溴甲酚綠比色法，目前首選推薦的清蛋白定量方法

❸ 全自動生化分析儀檢測方法

全自動生化分析儀檢測方法：

1、終點法（endessay）完全被轉化成產物，不再進行反應達到終點，取反應終點的吸光度來計算被測物質的濃度。生化檢驗中除酶和BUN、CRE外幾乎都用終點法來進行檢測。

2、一點終點法：取反應達終點時的一個點的吸光度來計算結果。

3、二點終點法：取反應尚未開始時讀取一個點的吸光度，待反應達終點時再取第二點的吸光度。用第二點吸光度減去第一點吸光度的差值來計算結果。主要用於扣除試劑和樣品空白。保證結果的准確性。一般雙試劑用。

4、固定時間法（兩點法）：是取尚在反應中的兩點間的差值來計算結果。此兩點既不是反應起始點也不是終點。主要用於檢測一些非特異性的項目，如肌酐。

5、連續監測法（動力學法、速率法）：是在測定酶的活性或酶代謝產物時，連續取反應曲線中呈線性變化吸光度值（△；A/min）來計算結果。因在反應線性時間內各點間的吸光度差值為零故又稱謂零級反應。

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全自動生化分析儀的原理：

自動化分析儀就是將原始手工操作過程中的取樣、混勻、溫浴（37℃）檢測、結果計算、判斷、顯示和列印結果及清洗等步驟全部或者部分自動運行。

如今，生化檢驗基本上都實現了自動化分析，還有專為大型或超大型臨床實驗室和商業實驗室設計的全自動生化分析系統，可根據實驗室的檢測量任意配置。

無論是當今運行速度最快（9600Test/h）的模塊式全自生化分析儀，還是原始手工操作用於比色的光電比色計，其原理都是運用了光譜技術中吸收光譜法。是生化儀最基本核心。