免疫斑點法需要什麼儀器

❶ 膠體金試紙條的測試原理是什麼

膠體金快速檢測卡是採用膠體金免疫層析技術研製而成的，此技術是90年代初在免疫滲透技術的基礎上建立的一種快捷簡單的免疫學檢測技術，市場上一般用到的有雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、小分子競爭法等等。 膠體金是氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，金離子還原後聚合成的一定大...小的金顆粒，它由一個基礎的晶核（11個金原子形成的二十面體）和包圍在外的雙離子層構成（內層為負離子層AuCl2－，外層是帶正電荷的H＋）。由於靜電作用，金顆粒之間相互排斥而懸浮成為一種穩定的膠體狀態，形成帶負電的疏水膠溶液，故稱膠體金。 。質量差的溶液燒制後，液面有漂浮物，大小不一，形狀各異。膠體金顆粒大小，決定了我們用肉眼觀察到的膠體金溶液顏色，由紅到紫色。 膠體金一般在弱鹼環境下帶負電荷，會與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合，一般稱這種結合叫靜電結合，所以不影響蛋白質的生物特性。除了與蛋白質結合以外，它還可以與許多其它生物大分子結合，如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀，如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應，加上結合物的免疫和生物學特性，從而使膠體金廣泛地應用於免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。 膠體金標記技術，實質上是蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。用於膠體金標記的蛋白必須要經過前處理，其目的在於 1、去除高濃度的鹽分，高濃度的鹽分往往干擾蛋白與膠體金的吸附結合，或導致膠體金粒子的凝聚，這一步往往採用低濃度緩沖液來進行。 2、使蛋白分子盡量分散為單體，凍干蛋白或高濃度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚為多聚體大分子，可同時與多個膠體金粒子結合，影響標記的靈敏度和定量分析。 3、使蛋白具有適當的分子量。蛋白分子量過小（30 kD），形成的蛋白復合體往往是不穩定，可短時間內失活。而分子量過大時，被認為影響探針的靈敏度，特別是已知蛋白的結構與活性中心的情況下，去除對活性影響的結構部分是提高標記靈敏度，延長探針壽命（防止凝集）的有效辦法。把分子量過小的蛋白與其它蛋白（如牛血清蛋白等）結合後，能制備出穩定性更強的探針。 當蛋白前處理完成後，接著要確定膠體金與蛋白結合的最佳pH值。對於理化性質不確定的蛋白這一步尤為重要。過量的蛋白與不同pH值的膠體金結合後，只有某一特定pH值能夠形成結合最穩定的探針。在高濃度電解質（如NaCl）作用下不會凝聚。不同蛋白的適宜pH范圍的寬窄大不相同。一般選擇最小適宜pH值為最佳pH值。但有些探針的實際情況並不完全如此，最穩定的探針並不完全代表活性最好，這要靠實驗驗證。 在確定最佳pH值後，最後要確定最小蛋白量，即能夠形成穩定探針的蛋白的最小量。如果在制備探針時加入太多的蛋白，不僅造成浪費，而且更為嚴重的是容易造成探針凝聚，並嚴重影響標記活性。因為探針溶液中的游離蛋白容易搶先與標記位點結合，起到「封閉」（Blocking）作用，而膠體金探針標記不上。在標記位點希少、被標記物含量較少的情況下要特別注意。 膠體金具有很高的動力學穩定性，在穩定因素不受破壞時自身凝聚極慢，可放置數年不發生凝聚。影響穩定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。金溶膠必須有少量電解質作穩定劑，但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質促使溶膠凝聚，但一定量的高分子物質反而可增加溶膠穩定性，如蛋白質、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的穩定效果。. 當金溶膠吸附蛋白質後，溶膠的穩定性隨溶液pH而變化，而這種變化又取決於吸附蛋白質的等電點，如ConA，過氧化物酶等，當pH較低時保持穩定，提高pH則顯得不穩定，接近等電點或略高時又變得穩定了。標記後的膠體金溶液可用0.2～0.5mg/ml PEG20000 作為穩定劑。在4～10℃貯存數月有效，不宜冰凍。貯存中可能會發生程度不同的凝聚，可離心除去。 當今國內有很多膠體金試紙條生產廠商，江浙這一帶尤為突出，推薦廠家：蘇州快捷康生物技術有限公司。

❷ 納米金的應用

納米金的應用相當廣泛，涉及到很多領域，簡而言之可以概括為：

1.美容護膚

> 祛斑抗衰 > 無痕癒合 > 全效營養導入

❸ 跪求POCT行業大神科普，酶免法，膠體金，凝集法，免疫熒光，比濁法這些方法學的利弊，

比較幾種免疫標記技術的異同。
答：根據標記物種類的不同，免疫標記技術可以分為放射免疫分析、酶標記免疫分析、熒游標記免疫分析、化學發游標記免疫分析、膠體金標記免疫分析技術，它們之間具有相同點，也有不同之處，現將其歸納如下。
一、相同點主要包括以下幾個方面：
1、均具有高特異性。五種免疫標記技術的免疫技術都是採用抗原抗體反應，而抗原與抗體的結合是一一對應、特異性結合的，故它們都具有非常高的特異性。
2、均具有高靈敏性。由於五種免疫標記技術的標記技術均採用示蹤物標記，例如酶、放色性核素、熒光素、膠體金以及緻密物質等，當與標本中的相應抗體或抗原反應後，可以不必測定抗原抗體復合物本身，只需測定復合物中的標記物，通過化學或物理的手段使不見的反應放大，轉化為可見的、可測知的光、色、電、脈沖等信號，並可藉助儀器精密測定，從而間接測出微量的抗原或抗體。
3、檢測對象相同。除了放射免疫技術只能檢測抗原外，其他四種免疫標記技術均可檢測抗原或者抗體，即通過已知抗原(或抗體)特異性結合待測抗體（或抗原），從而定性或定量地測出抗體或抗原。
4、免疫標記的程序基本相同。其包括純化抗原或抗體、確定標記物質（即決定了最終的檢測方式）、進行標記、對標記產物分離純化和分析鑒定等一系列程序。
二、不同點主要包括以下幾個方面：
1、檢測原理不一樣。首先，酶免疫技術是以酶標記的抗體（或抗原）作為主要試劑，將抗原-抗體反應的特異性和酶催化底物反應高效性和專一性結合起來的一種免疫方法，其對作為標記用的酶具有特定的要求，如活性高、純度高等；放射免疫標記技術是以放射性同位素作為示蹤物的標記免疫測定方法；免疫熒光技術是以熒光素作為標記物與已知的抗體或抗原結合，然後將熒光素標記的抗體作為標准試劑，用於檢測和堅定未知的抗原，其對用於標記的熒光素也有特定的要求，如熒光效率高，與蛋白質結合穩定，易於保存等；發光免疫分析技術是將發光分析與免疫反應相結合而建立的一種新型超微量分析技術，它是使用發光劑標記抗體（或抗原），通過發光檢測抗原（或抗體）反應的免疫分析方法；免疫膠體金標記技術則是以膠體金作為示蹤標記物，而膠體金在鹼性環境中帶負電荷，與抗體蛋白質分子的正電荷基團因靜電而形成牢固結合應用於抗原抗體反應的一種新型免疫檢測方法。
2、所採用的標記物不同。由於彼此間免疫標記的原理不一樣，故採用的標記物必然存在差異性。熒光免疫技術的標記物為熒光素，一般採用四乙基羅丹明、異硫氨酸熒光素及藻紅蛋白等；酶免疫技術的標記物為酶，一般採用辣根過氧化物酶（HRP）或鹼性磷酸酶（AP）；放射免疫技術的採用放射性核素標記，一般有131I、125I、14C和3H；發光免疫技術採用化學發光物質來進行標記，常用的化學發光劑有魯米諾、異魯米諾以及魯米諾的衍生物；免疫膠體金技術的標記物為膠體金，，是由金鹽被還原成原金後形成的金顆粒懸液，膠體金顆粒大小多在1—100nm。
3、檢測所需儀器或方法不同。酶免疫技術通過加酶的底物顯色，然後通過酶標檢測儀比色來進行檢測；放射免疫技術是採用液體閃爍計數儀、晶體閃爍計數儀或X膠片來進行免疫檢測；免疫熒光技術則是採用熒光比色計或熒光顯微鏡來進行分析；發光免疫技術所需儀器為發光分析儀；免疫膠體金技術是通過免疫電競或斑點免疫金染色法進行檢。

❹ 采便器怎麼用

采便器裡面有液體，採集樣本之後裡面的液體需要倒掉，不用直接樣本放在原來的液體里。

便潛血檢測意義：便潛血檢測是臨床上診斷和檢測消化道出血性疾病的重要手段之一，是消化道惡性腫瘤早期診斷的重要篩查指標，現已成為國內外公認的、行之有效的大腸癌篩檢技術。

陽性見於各種消化道出血性疾病，如消化性潰瘍、胃腸道腫瘤、憩室、息肉、炎症、傷寒、鉤蟲病、痔瘡等。

簡介：

便潛血(或隱血)是指消化道少量出血，紅細胞被破壞，但糞便外觀無異常改變，肉眼和顯微鏡均不能證實的出血。便潛血檢驗是用化學檢查的方法檢測糞便中微量的血紅蛋白，主要有化學法和免疫法。

免疫法檢測的原理是單克隆抗體標記技術和抗原抗體結合的特異性，如膠體金法、酶聯免疫吸附法、免疫斑點法、乳膠凝集法等。與化學法相比，免疫法不受食物和葯物干擾，靈敏度與特異性均優於化學法，不易出現假陽性。