吸光度儀器怎麼用波長校正

⑴ fl8500分光光度計使用方法

1、首先使用儀器前，使用者應該首先了解本儀器的結構和工作原理。以及各個操作旋鈕之功能。在未接通電源前，應該對儀器的安全性進行檢查，電源線接線應牢固。將靈敏度旋鈕調置「1」檔(放大倍率最小)。開啟電源， 指示燈 亮，選擇開關置於「T」，波長調至測試用波長。儀器預熱20分鍾。
2、其次打開試樣室蓋(光 門 自動關閉)，調節「0」旋鈕，使數字顯示為「00.0」，蓋上試樣室蓋，將比色皿架置與蒸餾水校正位置，使光電管受光，調節透過率「100%」旋鈕，使數字顯示為「100.0」。如果顯示不到「100.0」，則可適當增加微電流放大器的倍率檔數，但盡可能置低倍率檔使用，這樣儀器將有更高的穩定性。但改變倍率後必須按(4)重新校正「0」和「100%」。預熱後，按(4)連續幾次調整「0」和「100%」，儀器即可進行測定工作。
3、最後吸光度A的測量按(4)調整儀器的「00.0」和「100%」，將選擇開關置於「A」，調節吸光度調零旋鈕，使得數字顯示為「.000」，然後將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度值。濃度C的測量：選擇開關由「A」旋置「C」，將已標定濃度的樣品放入光路，調節濃度旋鈕，使得數字顯示為標定值，將被測樣品放入光路，即可讀出被測樣品的濃度值。如果大幅度改變測試波長時，在調整「0」和「100%」後稍等片刻，(因光能量變化急劇，光電管受光後響應緩慢，需一段光響應平衡時間)，當穩定後，重新調整「0」和「100%」即可工作。

⑵ 紫外分光光度計的校正方法

紫外分光光度計的校正方法：分光光度法的最重要的一個物理化學量是吸光度。為了獲得准確的研究結果，准確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般，分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度，可通過足夠數量測量的統計處理來減少;系統誤差影響測量結果的准確度，可在大體相同實驗條件下，用比較一種物質的准確測量結果，使系統誤差統一起來。而分光光度計的系統誤差(波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應、暗電流和比色皿的光程)和操作誤差(溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質的純度、稱量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關於操作誤差，多數情況下，通過嚴格按操作程序測量、儀器調零、准確稱量等來控制或減少這種誤差的產生。關於儀器的系統誤差，可通過對分光光度計的定期校正來克服，若所需准確度很高的測量，則必須天天校正。
校正內容：
1、波長的准確度試驗 以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示，應在±1.0nm范圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正；
2、吸收度的准確度試驗；
3、雜散光的試驗；
4、波長重現性試驗；
5、解析度試驗。
吸光度的校正方法：校正吸光度常用一很純物質一定濃度的溶液為標准，且此溶液的吸光度系數經不同實驗室核對，為了使標准液吸光度不受測定波長的微移動而有改變，常選擇具有較平滑吸收高峰的物質，同時要求溶液穩定，且在相當的波長范圍內吸收度的改變符合Beer-Lambert定律，常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是最常用的標准溶液，此溶液在紫外區和可見區均適用。
波長或波數的校正方法：可用具有窄吸收帶的溶液，濾光片或蒸氣來校正所需要的光波范圍。如果要求很高的精密度時，可用放電燈泡發射的射線來校正。有的光譜儀其上已裝有一個為校正用的燈。苯的蒸氣對校正一定范圍的波長亦很有用，可用一小滴苯放於一厘米厚的吸收杯中，測其吸收波長，在遠紫外區可用氧氣的吸收帶進行校正。用各種稀土金屬的濾光片，可以很快地校正波長，但准確度不如上述方法高。常用含有鈥和釹、鐠離子的濾光片。
雜散光的校正方法：小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差，它的校正可用一個能完全吸收某一波長單色光，且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶，亦可用Beer-Lambert定律來檢查，但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大於0.1%，應設法減低，或對測得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比，因此校正值很容易從化合物的近於正確的曲線計算而得。此外，還可用一個適當的濾光片，該濾光片在測定波長范圍內完全透光，但吸收此范圍外的光波，由此來消除雜散光。