流式細胞技術是什麼儀器

⑴ 流式細胞儀分析技術及應用

在2019年的三月份我正式開始做單細胞相關研究工作，有趣的同時也是朋友我們經常誤會的是：你是不是用流式細胞術？而我在得知自己要做這單細胞（single cell ）的研究時，在Google搜關鍵詞（single cell ），居然有不少是介紹流式細胞術的。流式細胞術應用到高通量測序領域就變成了微流控技術。可見，把生命科學的視界拉倒單細胞水平的比高通量測序更早的是流式細胞術。

那麼在單細胞測序技術出現之前，人們在研究單細胞的時候都是怎麼做的呢，都有哪些分析點呢？單細胞測序技術給單細胞研究帶來了哪些新的視角？這一切的答案都要求我們對流式細胞術有一個基本的了解。

流式細胞術(flow cytometry, FCM)是以流式細胞儀為檢測手段的一項能快速、精確的對單個細胞理化特性進行多參數定量分析和分選的新技術。

流式細胞儀是測量染色細胞標記物熒光強度的細胞分析儀，是在單個細胞分析和分選基礎上發展起來的對細胞的物理或化學性質（如大小、內部結構、DNA、RNA、蛋白質、抗原等）進行快速測量並可分類收集的高技術。

採用激光作為激發光源，保證其具有更好的單色性與激發效率；利用熒光染料與單克隆抗體技術結合的標記技術，保證檢測的靈敏度和特異性；用計算機系統對流動的單細胞懸液中單個細胞的多個參數信號進行數據處理分析，保證了檢測速度與統計分析精確性。

（1） 液流系統
（2） 光學系統
（3） 數據處理系統

激光光源：氣冷式氬離子激光器
分色反光鏡：反射長/短波長，通過短/長波長
光束成形器：兩十字交叉放置的透鏡
透鏡組：形成平行光，除去室內光
濾片：長通、短通、帶通
光電倍增管：FS, SS（散射光）， FL1, FL2, FL3, FL4（熒光）

測得的FS與SS信號通過計算機處理，可得到FS-SS圖，由此可僅用散射光信號對未染色的活細胞進行分析或分選。此為血細胞分類的基本原理，但不能分析表面分子。

熒光信號由被檢細胞上標記的特異性熒光染料受激發後產生，發射的熒光波長與激發光波長不同。
每種熒光染料會產生特定波長的熒光和顏色，通過波長選擇通透性濾片，可將不同波長的散射光和熒光信號區分開，送入不同的光電倍增管。
選擇不同的單抗及染料就可同時測定一個細胞上的多個不同特徵。
線性放大器和對數放大器

通過流式細胞儀進行細胞分選主要是在對具有某種特徵的細胞需進一步培養和研究時進行的。

FS：反映顆粒的大小
SS：反映顆粒的內部結構復雜程度
FL：反映顆粒被染上的熒光數量多少

單參數直方圖
雙參數直方圖:點圖
二維等高圖
假三維等高圖
三參數直方圖
多參數分析

雙參數直方圖：縱軸和橫軸分別代表被測量細胞的兩個測量參數，根據這兩個參數就可以確定細胞在圖上的表達位置。

雙參數信號通常採用對數信號，最常用的是點密圖，在圖中，每個點代表一個細胞，點圖利用顆粒密度反映同樣散射光或熒光強度的顆粒數量的多少。

由類似地圖上的等高線組成，其本質也是雙參數直方圖。
等高圖上每一條連續曲線上具有相同的細胞相對或絕對數，即「等高」。
曲線層次越高(越裡面的線) 所代表的細胞數愈多。
等高線越密集則表示細胞數變化率越大。

流式細胞儀(FCM)是集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器，已廣泛應用於免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。

①細胞生物學 ：細胞凋亡研究；定量分析細胞周期並分選不同細胞周期時相的細胞；分析生物大分子如DNA、RNA、抗原、癌基因表達產物等物質與細胞增殖周期的關系，進行染色體核型分析，並可純化X或Y染色體。 [詳細]

②腫瘤學 ：DNA倍體含量測定是鑒別良、惡性腫瘤的特異指標。近年來已應用DNA倍體測定技術，對白血病、淋巴瘤及肺癌、膀胱癌、前列腺癌等多種實體瘤細胞進行探測。用單克降抗體技術清除血液中的腫瘤細胞。 [詳細]

③免疫學 ：研究細胞周期或DNA倍體與細胞表面受體及抗原表達的關系；進行免疫活性細胞的分型與純化；分析淋巴細胞亞群與疾病的關系；免疫缺陷病如艾滋病的診斷；器官移植後的免疫學監測等。 [詳細]
④血液學 ：血液細胞的分類、分型，造血細胞分化的研究，血細胞中各種酶的定量分析，如過氧化物酶、非特異性酯酶等；用NBT及DNA雙染色法可研究白血病細胞分化成熟與細胞增殖周期變化的關系，檢測母體血液中Rh(+)或抗D抗原陽性細胞，以了解胎兒是否可能因Rh血型不合而發生嚴重溶血；檢測血液中循環免疫復合物可以診斷自身免疫性疾病，如紅斑狼瘡等。 [詳細]

⑤葯物學 ：檢測葯物在細胞中的分布，研究葯的作用機制，亦可用於篩選新葯，如化療葯物對腫瘤的凋亡機制，可通過測DNA凋亡峰，Bcl-2凋亡調節蛋白等。 [詳細]

細胞凋亡研究 ：細胞凋亡是細胞在基因控制下的有序死亡，在疾病發生、發展中有重要作用，因而研究細胞凋亡有重要意義。細胞凋亡檢測方法很多，應用流式細胞儀技術可根據細胞在凋亡過程中發生一系列形態、生化變化從多個角度對細胞凋亡進行定性和定量的測定。 [詳細]

** 細胞分選**：流式細胞儀能夠分選某一亞群細胞,分選純度＞95%。目前細胞分選主要用於研究，臨床應用較少。利用流式細胞儀分選免疫擔當細胞進行細胞免疫學研究也是目前的熱門課題。流式細胞儀能夠分選出你想得到的任何一亞群細胞，只要你想得到的某一亞群細胞有合適的單克隆抗體標記。 [詳細]

** 細胞因子的檢測**：隨著多標記及胞內細胞因子標記流式細胞技術的出現，使對細胞內細胞因子的研究推向了一個新的階段。本文主要對胞內細胞因子流式細胞技術作介紹。 [詳細]

** 血液學應用**：本文向您介紹流式細胞儀在血液研究領域的應用，包括DNA倍體分析及細胞周期分析，淋巴細胞亞群測定，白血病免疫分型，淋巴瘤免疫分型，紅細胞疾病診斷，血小板功能分析和血小板病診斷，微小殘留白血病檢測，白細胞吞噬功能測定，NK和LAK細胞活性測定，造血干/祖細胞測定等。 [詳細]

⑵ 什麼是流式細胞儀

流式細胞儀可同時進行多參數測量，信息主要來自特異性熒光信號及非熒光散射信號。測量是在測量區進行的，所謂測量區就是照射激光束和噴出噴孔的液流束垂直相交點。液流中央的單個細胞通過測量區時，受到激光照射會向立體角為2π的整個空間散射光線，散射光的波長和入射光的波長相同。散射光的強度及其空間分布與細胞的大小、形態、質膜和細胞內部結構密切相關，因為這些生物學參數又和細胞對光線的反射、折射等光學特性有關。未遭受任何損壞的細胞對光線都具有特徵性的散射，因此可利用不同的散射光信號對不經染色活細胞進行分析和分選。經過固定的和染色處理的細胞由於光學性質的改變，其散射光信號當然不同於活細胞。散射光不僅與作為散射中心的細胞的參數相關，還跟散射角、及收集散射光線的立體角等非生物因素有關。

⑶ 流式細胞技術與流式細胞儀

流式細胞技術 （Flow Cytometer, FCM）是細胞學的研究手段之一。其能在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，並能同時從一個細胞中測得多個參數。例如，採用雙激光的方法，研究者可進行核型分析和鑒定，分離純化某號染色體並構建染色體特異性DNA文庫。流式細胞技術是當代最先進的細胞定量分析技術之一。

該技術依託 流式細胞儀 。其主要部件為光源、流動室、熒光檢測部件、分選器。

（1）光源。通常是激光光源，目的是提供足夠的熒光激光能量。

（2）流動室。其為流式細胞儀中最重要的部分。目的是使細胞流穩定流動，依次通過固定的檢測區。其間一道加入還有鞘液（sheath fluid），使樣品微粒之間相互分離，基於 鞘流原理 ，使微粒恆定處於同軸流動的中心位置。流動室的設計運用 液體聚焦原理 ，把激光激發點放在液流聚焦點上，該處是液流直徑最小處，通常為10-20μm，做到了單個細胞進入檢測區。

（3）熒光檢測部件。染色細胞通過激光束時會發出熒光，檢測系統將接收的這些熒光轉換成與其量大小成正比的電壓脈沖信號，該脈沖稱為 峰值脈沖 ，分析系統根據這些來自不同方向的信號把不同的細胞群加以區分。散射光是圍繞細胞360°散發的，所以檢測裝置里一般有90°散色光檢測器（SSC，側向散射光）和前向散射光檢測器（FSC，前向角度散射光）。由於側向散射光強度較弱，因此光電轉換器件選用增益較大的 光電倍增管 。一般來說，6°以內的前向散射光為小角度散射光，可反映細胞體積的大小。大於6°的前向散射為大角度散射光，可提供細胞內的信息，特別是分葉核的信息，細胞質粒存在與否會明顯改變前向大角度散射光的強度。由於前向散射光的強度較強，因此用光電二極體作 光電轉換器 。

（4）分選器。細胞的分選是通過分離含有單細胞的滴液實現的。通過特異性識別與給液滴加電（2kV～6kV），施加靜電場，來實現分離。

過程細節：被激光照射的染色細胞會產生散射光和激發熒光。這兩種光信號同時被光電二極體和光電倍增管接收後轉換成電脈沖信號。無論是散射光或熒光信號，檢測的目的都是要分析不同的粒子。分析的方法有兩種，一是測量粒子通過激光束的最大電壓（與熒光強度成正比），二是測量脈沖的面積。再經過A/D 轉換器將脈沖信號變換成二進制數字信號由計算機處理。光信號基本上反映了細胞體積的大小，熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度。這種屬分析型流式細胞儀。分選型則是則是將液滴充電後送入上面描述的分選器中進行分離，目的是為了將所需的細胞做進一步的培養、觀察和實驗。

染色體倍性不同的細胞，染料吸附於染色體的量迥異，激發的熒光強度限定於一定區間。因此可以對染色體倍性實施鑒定。

總而言之，流式細胞儀能夠對細胞的性質進行系列分析，是細胞學研究的重要工具。

[1] 何克健.流式細胞技術與流式細胞儀[J].醫療裝備,2000(05):6-8.
[2] 羅慶,高建有,李潔維,葉開玉,莫權輝,蔣橋生,查滿榮,王發明,劉世彪.利用流式細胞儀對51份獼猴桃種質染色體倍性的鑒定[J/OL].生物學雜志:1-8[2022-06-02]. http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1081.Q.20220321.1515.00

⑷ 流式細胞術簡介

目錄

• 1 拼音
• 2 英文參考
• 3 流式細胞術發展簡史
• 4 工作原理
• 5 檢測范圍
• 6 流式細胞術的臨床應用
• 7 科研應用
• 8 常規檢測時的樣品制備
• 8.1 直接免疫熒游標記法
• 8.2 間接免疫熒游標記法
• 9 質量控制和注意事項
• 9.1 流式細胞術免疫學檢測的影響因素和質量控制
• 9.2 DNA倍體分析的質量控制
• 9.3 操作
• 9.4 資料分析

1 拼音

liú shì xì bāo shù

2 英文參考

flow cytometry

流式細胞術(Flow Cytometry, FCM)是七十年代發展起來的高科學技術,它集計算機技術、激光技術、流體力學、細胞化學、細胞免疫學於一體, 同時具有分析和分選細胞功能。它不僅可測量細胞大小、內部顆粒的性狀,還可檢測細胞表面和細胞漿抗原、細胞內DNA、RNA含量等,在血液學、免疫學、腫瘤學、葯物學、分子生物學等學科廣泛應用。

3 流式細胞術發展簡史

流式細胞術（Flow Cytometry, FCM）是一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術和分選技術。其特點是：①測量速度快，最快可在1秒種內計測數萬個細胞；②可進行多參數測量，可以對同一個細胞做有關物理、化學特性的多參數測量，並具有明顯的統計學意義；③是一門綜合性的高科技方法，它綜合了激光技術、計算機技術、流體力學、細胞化學、圖像技術等從多領域的知識和成果；④既是細胞分析技術，又是精確的分選技術。

概要說來，流式細胞術主要包括了樣品的液流技術、細胞的分選和計數技術，以及數據的採集和分析技術等。FCM目前發展的水平凝聚了半個世紀以來人們在這方面的心血和成果。

1934年，Moldavan1首次提出了使懸浮的單個血紅細胞等流過玻璃毛細管，在亮視野下用顯微鏡進行計數，並用光電記錄裝置計測的設想，在此之前，人們還習慣於測量靜止的細胞，因為要使單個細胞順次流過狹窄管道容易造成較大的細胞和細胞團塊的淤阻。1953年Crosland –Taylor根據雷諾對牛頓流體在圓形管中流動規律的研究認識到：管中軸線流過的鞘液流速越快，載物通過的能力越強，並具有較強的流體動力聚集作用。於是設計了一個流動室，使待分析的細胞懸浮液都集聚在圓管軸線附近流過，外層包圍著鞘液；細胞懸浮液和鞘液都在作層液。這就奠定了現代流式細胞術中的液流技術基礎。

1956年，Coulter在多年研究的基礎上利用Coulter效應生產了Coulter 計數器。其基本原理是：使細胞通過一個小孔，只在細胞與懸浮的介質之間存在著導電性上的差異，便會影響小孔道的電阻特性，從而形成電脈沖信號，測量電脈沖的強度和個數則可獲得有關細胞大小和數目方面的信息。1967年Holm等設計了通過汞弧光燈激發熒光染色的細胞，再由光電檢測設備計數的裝置。1973年Steinkamp設計了一種利用激光激發雙色熒光色素標記的細胞，既能分析計數，又能進行細胞分選的裝置。這樣就基本完成了現代FCM計數技術的主要歷程。

現代的FCM數據採集和分析技術是從組織化學發源的，其開拓者是Kamentsky。1965年，Kamentsky在組織化學的基礎上提出了兩個新設想：（1）細胞的組分是可以用光光度學來定量測定的，即分光光度術可以定量地獲得有關細胞組織化學的重要信息。（2）細胞的不同組分可以同時進行多參數測量，從而可以對細胞進行分類。換句話說，對同一細胞可以同時獲得有關不同組分的多方面信息，用作鑒別細胞的依據。Kamentsky不僅思路敏捷，而且能身體力行。他是第一個把計算機介面接到儀器上並記錄分析了多參數數據的人，也是第一個採用了二維直方圖來顯示和分析多參數的人。

流式細胞術在細胞化學中的應用的先驅者是Van Dilla和美國的Los Alamos小組。他們在1967年研製出流液束、照明光軸、檢測系統光軸三者相互正交的流式細胞計的基礎上，首次用熒光Feulgen反應對DNA染色顯示出DNA的活性與熒光之間存在著線性關系，並在DNA的直方圖上清楚地顯示出細胞周期的各個時相。Gohde 和Dittrich接著把這項技術推向實用，他們用流式細胞術測定細胞周期藉以研究細胞葯代動力學問題。FCM用於免疫組織化學中的關鍵是對細胞進行免疫熒光染色，其它和在細胞化學的應用並沒有多大差異。

近20年來，國內外在FCM上都做了不少的研究和應用工作，也取得了不少成果。特別是隨著儀器和方法和日臻完善，人們越來越致力於樣品制備、細胞標記、軟體開發等方面的工作以擴大FCM的應用領域和使用效果。FCM在免疫組織化學中的應用也大致差不多，並注重了在臨床應用的推廣。

4 工作原理

流式細胞術

將待測細胞染色後製成單細胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動室，不含細胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣，鞘液就能夠包繞著樣品高速流動，組成一個圓形的流束，待測細胞在鞘液的包被下單行排列，依次通過檢測區域。

流式細胞儀通常以激光作為發光源。經過聚焦整形後的光束，垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細胞在激光束的照射下，產生散射光和激發熒光。這兩種信號同時被前向光電二極體和90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測，這種信號基本上反映了細胞體積的大小；熒光信號的接受方向與激光束垂直，經過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離，形成多個不同波長的熒光信號。

這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表面抗原的強度或其核內物質的濃度，經光電倍增管接收後可轉換為電信號，再通過模／數轉換器，將連續的電信號轉換為可被計算機識別的數字信號。計算機把所測量到的各種信號進行計算機處理，將分析結果顯示在計算機屏幕上，液可以列印出來，還可以數據文件的形式存儲在硬碟上以備日後的查詢或進一步分析。

檢測數據的顯示視測量參數的不同由多種形式可供選擇。單參數數據以直方圖的形式表達，其X軸為測量強度，Y軸為細胞數目。一般來說，流式細胞儀坐標軸的解析度有512或1024通道數，這視其模數轉換器的解析度而定。對於雙參數或多參數數據，既可以單獨顯示每個參數的直方圖，也可以選擇二維的三點圖、等高線圖、灰度圖或三維立體視圖。

細胞的分選是通過分離含有單細胞的液滴而實現的。在流動室的噴口上配有一個超高頻電晶體，充電後振動，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴，待測定細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負不同的電荷，當液滴流經帶有幾千伏特的偏轉板時，在高壓電場的作用下偏轉，落入各自的收集容器中，不予充電的液滴落入中間的廢液容器，從而實現細胞的分離。

5 檢測范圍

1．流式細胞儀可以檢測細胞結構，包括：細胞大小、細胞粒度、細胞表面面積、核漿比例、DNA含量與細胞周期、R NA 含量、蛋白質含量。

2．流式細胞儀可以檢測細胞功能，包括：細胞表面/ 胞漿/ 核的特異性抗原、細胞活性、細胞內細胞因子、酶活性、激素結合位點和細胞受體。

6 流式細胞術的臨床應用

1．流式細胞術在腫瘤學中的應用：流式細胞術可以檢測腫瘤細胞增殖周期、檢測腫瘤細胞表面標記、癌基因表達產物、進行多葯耐葯性分析、檢測凋亡；

2．流式細胞術在血液學中的應用：檢測白血病和淋巴瘤細胞、活化血小板、造血幹細胞（CD34+）計數、白血病與淋巴瘤的免疫分型、網織紅細胞計數、細胞移植的交叉配型和免疫狀態監測；

3．流式細胞術在免疫學中的應用：可以進行淋巴細胞及其亞群分析、淋巴細胞免疫分型、檢測細胞因子。

7 科研應用

主要有細胞動力學功能研究、環境微生物分析、流式細胞術與分子生物學研究。

8 常規檢測時的樣品制備

8.1 直接免疫熒游標記法

取一定量細胞（約1×106 細胞/ml），直接加入連接有熒光素的抗體進行免疫標記反應（如做雙標或多標染色，可把幾種標記有不同熒光素的抗體同時加入），孵育20～60分鍾後，用PBS（pH7.2 ～7.4）洗1～2次，加入緩沖液重懸，上機檢測。本方法操作簡便，結果准確，易於分析，適用於同一細胞群多參數同時測定。雖然直標抗體試劑成本較高，但減少了間接標記法中較強的非特異熒光的干擾，因此更適用於臨床標本的檢測。

8.2 間接免疫熒游標記法

取一定量的細胞懸液（約1X106 細胞/ml），先加入特異的第一抗體，待反應完全後洗去未結合抗體，再加入熒游標記的第二抗體，生成抗原抗體抗抗體復合物，以FCM檢測其上標記的熒光素被激發後發出的熒光。本方法費用較低，二抗應用廣泛，多用於科研標本的檢測。但由於二抗一般為多克隆抗體，特異性較差，非特異性熒光背景較強，易影響實驗結果。所以標本制備時應加入陰性或陽性對照。另外，由於間標法步驟較多，增加了細胞的丟失，不適用測定細胞數較少的標本。

9 質量控制和注意事項

流式細胞儀並非是完全自動化的儀器，准確的實驗結果還需要准確的人工技術配合，所以標本制備需要規范，儀器本身亦需要質量控制。

9.1 流式細胞術免疫學檢測的影響因素和質量控制

流式細胞術在免疫學中有著廣泛的應用，其免疫熒光染色的標本制備非常重要，常常由於標本制備過程中出現人為非特異性熒光干擾(尤其在間接免疫熒光染色中)或細胞濃度低等影響檢測結果。解決這些影響因素的方法如下：

(1) 確保標本上機檢測前的濃度為1X106/ml，細胞濃度過低直接影響檢測結果。

(2) 使用蛋白封閉劑，封閉非特異結合位點，尤其在間接免疫熒游標記時必不可少。常用的蛋白封閉劑為0.5%牛血清白蛋白和1%胎牛血清。

(3) 熒光抗體染色後充分洗滌，注意混勻和離心速度，減少重疊細胞和細胞碎片。

(4) 設置對照樣品，採用與抗體來源同型匹配的無關對照和熒光抗體的本底對照。

(5)判定結果時，應注意減去本底熒光，為使免疫熒光的定量分析更精確，應用計算機程序軟體，用擬合曲線方法從實驗組的曲線峰值中減去對照組的曲線峰值，可以得到更准確的免疫熒光定量結果。

(6) 注意染色後避光，保證細胞免疫熒光的穩定。

9.2 DNA倍體分析的質量控制

DNA倍體分析的質量控制仍沒有統一的標准， 各文獻報道的實驗結果差異較大，1993年10月美國癌症研究組織制定了FCMDNA定的統一標准，我們根據這些標准並結合國內有經驗的專家多年的實踐，對FCM的DNA分析技術的質控和注意事項進行說明。

(1) 手術切除的新鮮標本或活檢針吸標本取材時，要避免出血壞死組織。

(2) 標本採集後要及時固定或深低溫保存，以免組織發生自溶，DNA降解，而造成測試結果的誤差。

(3) 固定劑要採用對組織細胞穿透性強的濃度，70%的乙醇固定效果較好。

(4) 單細胞懸液制備過程中，注意將待測細胞成分分離出來，減少其他成分的干擾，並注意不要損傷該群細胞。

(5) 細胞樣品的採集要保證足夠的細胞濃度，即1X106/ml，雜質、碎片、團塊和重疊細胞應<2%，對腫瘤細胞DNA異倍體的分析樣品，至少有20%的腫瘤細胞存在。

(6) 石蠟包埋組織單細胞制備時要注意：取材時應選取無自溶、壞死的組織，對腫瘤組織標本，選取含腫瘤細胞豐富的區域；石蠟組織片的厚度要適宜，最好為40～50μm 。過薄或過厚的切片均會影響檢測結果；徹底脫蠟，以免殘留的石蠟影響酶的消化活性，驗證脫蠟是否完全的方法是棄去二甲苯，加入100%乙醇，如果無絮狀物浮起，說明蠟已脫凈；水化要充分，使組織還原到與新鮮組織相似的狀態；注意消化的時間和消化酶的活性。常規使用0.5%胃蛋白酶，pH 1.5。

9.3 操作

(1)流式細胞儀在整個工作過程中處於最佳狀態，能保證定量檢測的准確性和檢測精度。使用標准樣品調整儀器的變異系數在最小范圍，解析度在最好狀態，能避免在測量過程中儀器條件的變化引起的檢測誤差。

(2)評價儀器精度的重要指標是儀器的變異系數（CV），對於校準樣品，其CV值越小越好，CV值越小，說明儀器校正的精度越高。校準樣品包括非生物樣品（熒光微球）和生物細胞樣品（人淋巴細胞、雞紅細胞等）。目前，非生物熒光微球已有商品試劑，CV一般<2%～3%。

9.4 資料分析

(1) 當樣品中碎片雜質或團塊過多，所測細胞數在20%以下，組方圖的基線抬高時，應放棄分析處理。

(2) 做細胞周期分析時，樣品細胞數應在1萬個，排除碎片、雜質和團塊，當異倍體細胞數占總細胞數10%以下時，需要結合其他診斷指標，不可盲目下結論，至少異倍體細胞占總細胞數的20%以上，可以確定異倍體的存在。

(3)DNA分析時，正常二倍體細胞組方圖CV值>8%時放棄分析，但腫瘤細胞的CV值>8%，與腫瘤細胞的異質性有關。另外，DNA倍體分析時，同源組織的不同個體會出現10%的漂移。

⑸ 流式細胞技術的介紹

流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，並能同時從一個細胞中測得多個參數，具有速度快、精度高、准確性好的優點，是當代最先進的細胞定量分析技術之一。光源、液流通路、信號檢測傳輸和數據的分析系統是流式細胞儀的主要組成。目前臨床中運用流式細胞儀進行外周血白細胞、骨髓細胞以及腫瘤細胞等的檢測是臨床檢測的重要組成部分。

⑹ 通過了解流式細胞術及儀器發展簡史你有哪些思政啟發

萬物既渺小又偉大。
流式細胞術是一種生物學技術，用於對懸浮於流體中的微小顆粒進行計數和分選。這種技術可以用來對流過光學或電子檢測器的一個個細胞進行連續的多種參數分析。 流式細胞術（Flow CytoMetry，FCM）是對懸液中的單細胞或其他生物粒子，通過檢測標記的熒光信號，實現高速、逐一的細胞定量分析和分選的技術。隨著流式細胞術的發展，出現了多種型號的流式分析儀、分選儀，同時隨著配備的激光器的不斷升級，有些流式分析儀可進行多達10色以上的熒光分析。
流式細胞術主要應用於生命科學的基礎研究，尤其是免疫學、細胞生物學和分子生物學。80年代後期開始應用於臨床，輔助多種疾病的診斷，尤其是白血病的診斷和分型。隨後，利用流式分選幹細胞過繼回輸用於疾病治療，如NK細胞回輸提高免疫力，CIK治療等。

⑺ 什麼是流式細胞儀

流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。
它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特徵參量，並可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。
多數流式細胞計是一種零解析度的儀器，它只能測量一個細胞的諸如總核酸量，總蛋白量等指標，而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說，它的細節 解析度為零。