酸度計法測氨基酸態氮儀器有哪些

『壹』 食品中氨基酸態氮測定的方法有哪些

凱氏定氮法、全自動凱氏定氮儀、液相、紅外

『貳』 在食品中對氨基酸態氮的檢驗時用什麼檢驗設備

由中國疾病預防控制中心營養與食品安全所研製，北京智林科技公司出品的「食品安全快速檢測箱」、「常見急性食物中毒快檢箱」，外型小巧、莊重大方、攜帶方便。箱內儲物盒，不但容量大、且可隨意組合。檢測箱內的檢測項目，都是針對社會關注的焦點、難點及食物鏈中容易發生問題的關鍵性環節。在這些方法中，除微生物法外，項目的平均檢測時間不到10分鍾，最長的也可在30分鍾內出結果，非常適合現場使用。
食品安全快速檢測箱由外箱、公共試劑盒、檢測試劑盒、輔助儀器組成。檢測箱外色為黑色和銀灰色，上蓋內側有規范的裝具袋，裝備有常用的器材，如多功能剪刀、移液管、量筒等。檢驗箱採用耐酸鹼、耐沖擊、耐擠壓材料，設計合理便於攜帶及現場操作。食品安全快速檢測箱的外型設計得體、大小適宜、攜帶方便。箱內儲物盒的設計不但容量大、且可隨意組合。檢測項目針對社會關注的食品安全熱點、難點及食物鏈中容易發生問題的關鍵性環節。檢測設備是目前國內較為先進或較為恰當的。

檢測方法來源：一是將國標法、AOAC法或經典的教科書方法所用的諸多試劑事先做成試劑盒、試劑包或試紙卡，盡量減少現場試劑的配置。將方法中所用的儀器、器皿等研製成為或精心選購一些小巧和便於攜帶的設備。二是將實驗室中最新的科研成果轉化成為能適於現場使用的檢測設備和方法。所採用的一些快速檢測方法正在制訂我國國家標准，如蔬菜中亞硝酸鹽快速檢測方法等，還有已成為了國家標准方法，如大腸菌群的檢測方法、農葯殘留快速檢測方法等。
目前,食品安全快速檢測箱中有40多個理化快速檢測項目，隨著社會需求和技術的發展在不斷增加。操作方法力求簡單、易用，給操作者帶來方便，為食品安全的監管、質控、以及食物中毒現場快速篩查提供科學有效的手段 。

醬油中總酸與氨基酸態氮含量的快速測定：滴瓶計數法（國標基礎上的快速方法）。主要用於產品質量和假冒偽劣產品的現場檢測。10分鍾內出結果，本方法總酸測定誤差±0.45%，氨基酸態氮測定誤差±0.078%。

一般可用方法:

1、單指示劑甲醛滴定法：

(一)原理：氨基酸具有酸、鹼兩重性質，因為氨基酸含有-COOH基顯示酸性，又含有-NH2基顯示鹼性。由於這二個基的相互作用，使氨基酸成為中性的內鹽。當加入甲醛溶液時，-NH2與甲醛結合，其鹼性消失，破壞內鹽的存在，就可用鹼來滴定-COOH基，以間接方法測定氨基酸的量，反應式可能以下面三種形式存在。

（二）試劑

(1)40％中性甲醛溶液，以麝香草酚酞為指示劑，用1N NaOH溶液中和。

(2)0.1％麝香草酚酞乙醇溶液。

(3)0.100N氫氧化鈉標准溶液。

(三)操作步驟：

稱取一定量樣品(約含20毫克左右的氨基酸)於燒杯中(如為固體加水50毫升)，加2-3滴指示劑，用0.1OON NaOH溶液滴定至淡藍色。加入中性甲醛20毫升，搖勻，靜置1分鍾，此時藍色應消失。再用0.1OON NaOH溶液滴定至淡藍色。記錄兩次滴定所消耗的鹼液毫升數，用下述公式計算

計算：

氨基酸態氮(％)=( N V×0.014×100)/W

式中：

N：NaOH標准溶液當量濃渡。

V：NaOH標准溶液消耗的總量(m1)

W：樣品溶液相當樣品重量(克)。

0.014：氮的毫克當量。

2、雙指示劑甲醛滴定法：

(一)原理：

與單色法相同，只是在此法中使用了兩種指示劑。從分析結果看，雙指示劑甲醛滴定法與亞硝酸氮氣容量法(此法操作復雜，不作介紹)相近單色滴定法稍偏低，主要因為單指示劑甲醛滴定法是以氨基酸溶液PH值作為麝香草酚酞的終點。PH值在9.2，而雙指示劑是以氨基酸溶液的PH值作為中性紅的終點，PH值為7.0，從理論計算看，雙色滴定法較為准確。

(二)試劑：

(1)三種試劑同單指示劑法

(2)0.1％中性紅(50％乙醇溶液)

(三)操作步驟：

取相同的兩份樣品，分別注入100毫升三角燒瓶中， 一份加入中性紅指示劑2-3滴，用0.100N NaOH溶液滴定終點(由紅變琥珀色)，記錄用量，另一份加入麝香草酚酞3滴和中性甲醛20毫升，搖勻，以0.100NNaOH准溶液滴定至淡藍色。按下述公式計算。

計算：

氨基酸態氮(％)=( N(V2-V1)×0.014)/W×100

式中：

V2：用麝香草酚酞為指示劑時標准鹼液消耗量(毫升)

V1：用中性紅作指示劑時鹼液的消耗量(m1)。

N：標准鹼液當量濃度。

W：樣品的重量(克)。

0.014：氮的毫克當量。

注意事項：

測定時樣品的顏色較深，應加活性炭脫色之後再滴定．

3.酸度計法
精確吸取稀釋液10ml或20ml放入150ml燒杯中，加入80ml蒸餾水，開動磁力攪拌器，然後用0.0500N氫氧化鈉標准溶液滴定至PH8.2，然後加入甲醛10ml，搖勻，繼續用0.0500N氫氧化鈉標准溶液滴定至PH9.2，記下加入甲醛後耗用0.0500N氫氧化鈉標准溶液毫升數V。用同一條件做一空白對照，記下耗用數V0。
按式(6)計算：
(V-V0)×N×0.014
氨基酸態氮(g/100g)=_×100 _ (6) W
10×_S
式中：V 樣品加入甲醛後，耗用0.0500氫氧化鈉標准溶液毫升數；
V0 空白加入甲醛後，耗用0.0500N氫氧化鈉標准溶液毫升數；
N 氫氧化鈉標准溶液當量濃度；
0.014 氮的毫克當量；
W 樣品重量；
S 樣品稀釋液體積，ml。

『叄』 氨基酸態氮的檢測方法

依據醬油衛生標准GB 2717-2003，醬油中氨基酸態氮<0.40g/100ml，即表明醬油為不合格產品，針對氨基酸態氮主要有以下幾種檢測方法：
1.甲醛滴定法
GB 18186-2000《釀造醬油》規定，對醬油中氨基酸態氮檢測時，採用甲醛作為掩蔽劑，即用甲醛掩蔽氨基酸中的氨基，使溶液呈現羧基酸性，再在酸度計指示下，用氫氧化鈉標准溶液滴定，
2.比色法
原理：在PH4.8的乙酸鈉-乙酸緩沖液中，氨基酸態氮與乙醯丙酮和甲醛反應生成黃色3,5-二乙醯-2,6-二甲基-1，4二氫化吡啶氨基酸衍生物，在波長400nm處測定吸光度，與標准比較定量 。
3. Hantzsch反應快速測定法
1.適用范圍
本方法適用於調味品中氨基酸態氮的測定。
2.原理
利用Hantzsch反應原理，用乙醯丙酮一甲醛混合溶液作為氨基酸的衍生試劑，測定調
味品中氨基酸態氮的方法。
3.試劑
顯色劑：15ml37%甲醛和7.8ml乙醯丙酮混合，加水至100ml，劇烈振搖混勻；緩沖溶液：pH4.8,1mol/L乙酸鈉與1mol/L乙酸用pH計調制混合；氨氮標准容液；
4.儀器
光柵分光光度計；pH計。
5.試樣的制備
液體樣品（如醬油等）：直接取樣或水適量稀釋後取樣；半固體樣品（如面醬等）：稱取5-10g於50ml或100ml量瓶內，水稀釋至刻度，濾紙過濾後取濾液測定；
固體試樣：取5-10g，加水20-50ml，用組織搗碎機搗碎後移入50ml或100ml量瓶內，水洗至刻度，取上清液或濾紙過濾後測定。
6.操作步驟
吸取
1.0-2.0ml試樣溶液或氨氮標准溶液（0～100ugNH3-N）於10ml比色管內，加4.0ml緩沖液、4.0ml顯色劑，水稀釋至刻度，混勻。於100℃水浴中加熱15min，取出用冷水冷卻至室溫，移入1cm比色皿內，以試劑空白為參比，波長400nm處測量吸光度。
7.結果計算

式中：
X試樣中AN含量，%；
A測得樣品吸光度；
M測得氨氮標准曲線的斜率（本法的斜率值為88.348）；
W取樣量，ml或g；
V樣品稀釋總體積，ml；
V1測定時取樣體積，ml 。