病原性細菌的檢查需要哪些儀器

❶ 微生物限度檢測為什麼要用集菌儀

我用的是微生物限度檢查以MT01L。是比你說的集菌儀方又便宜。。。

高得泰林啊。和你一樣的

❷ 簡述臨床常用的細菌檢驗技術

細菌的培養和分離技術微生物分離鑒定流程第一節 細菌的形態學檢查工具：顯微鏡顯微鏡檢查的目的：1.鏡檢可以了解標本中有無細菌及大致的菌量2.根據細菌形態、排列和染色性有助於對標本中的病原菌進行初步診斷，對臨床早期診斷和治療疾病有一定的參考意義方法：包括不染色標本檢查法和染色標本檢查法常用的顯微鏡（1）普通光學顯微鏡（light microscope）光源：自然光或燈光，波長0.4μm最大解析度：0.2μm（2）暗視野顯微鏡（darkfield microscope）（3）相差顯微鏡（phase contrast microscope）（4）熒光顯微鏡（fluorescence microscope）（5）電子顯微鏡（electron microscope）返回普通光學顯微鏡一、不染色標本直接鏡檢目的：主要用於檢查生活狀態下細菌的動力及運動狀況。常用的方法：懸滴法和壓滴法 懸滴法檢查細菌的動力不染色標本鏡下結果觀察：動力（+），動力（-）觀察時注意：用普通光學顯微鏡高倍鏡觀察，調小顯微鏡的光柵。有動力：可看到細菌自一處移至另一處，有明顯的方向性位移。無動力：細菌呈現布朗運動，只在原地顫動而無位置的改變。 意義：有些病原菌通過不染色標本的動力檢查可作出初步鑒定： 如疑似霍亂患者「米泔水樣」便中發現穿梭樣運動細菌，可輔助診斷。 螺旋體輔助診斷二、染色標本的顯微鏡檢查（一）常用染料（色基+助色基）1．鹼性染料：鹼性復紅、結晶紫、美藍等， 電離後帶正電荷，常用於細菌染色（原因何在？）。2．酸性染料：有伊紅、剛果紅等，電離後帶負電荷。3．復合染料（中性染料）：復合染料有瑞氏染料（伊紅美藍）、姬姆薩染料（伊紅天青）等 。

❸ 細菌鑒定辦法有哪些，常見細菌的鑒定辦法就可以

細菌的鑒定通過分離培養獲得的病原菌，必須達到不含有其他微生物的純培養程度，才能進行系統鑒定。系統鑒定就是通過病原菌的形態結構、生長特性、抗原性和病原性等檢測，並用已知標准免疫血清確定分離細菌的屬、種和型。微生物鑒定的程序通常是根據其形態，生長、生化特性等定種，最後根據抗原的免疫血清學檢查定型。(一)形態學檢查各種細菌的形態，在適宜的環境下是相對穩定的。但環境的改變，如培養基條件的改變，抗生素和化學葯品的作用等，均可使細菌產生不規則的形態，並可出現細胞壁的缺陷和多樣性。為此，在作細菌形態鑒定時，必須按被檢菌的生長要求，選擇適宜的培養基和培養條件，以及適宜的培養時間和檢查方法，才能作出正確的形態學鑒定。形態學檢查一般包括二方面：肉眼觀察和顯微鏡檢查。1.肉眼觀察肉眼觀察主要觀察細菌在固體、液體、半固體，鑒別培養基上的生長情況。在固體培養基上要觀察菌落形態、大小、顏色是否均勻一致，表面是光滑濕潤，還是乾燥無光或呈皺紋狀，邊緣是整齊還是不規則，菌落是隆起、扁平，還是乳頭樣，是透明、半透明或不透明。在液體培養基中，要觀察培養基是否呈均勻渾濁，管底有無沉澱，液面有無菌膜，是否產氣等。在半固體培養基上應觀察細菌是否沿著接種線生長，是呈毛刷樣生長還是均勻生長，上下生長是否一致。在鑒別培養基上，應觀察其生長情況是否與預期的相一致，在血瓊脂培養基上還要觀察是否溶血及溶血圈的特點，在某些培養基上還要注意是否有臭味等。2.顯微鏡觀察在作細菌個體形態學檢查時，要根據被檢菌的種類和檢查項目，選用相應的染色方法，同時要注意選擇適合的培養基以及細菌培養的時間，才能達到預期的目的。一般以18－24小時（生長時間長的細菌除外）的幼嫩培養菌為宜。例如，作革蘭氏染色檢查時，培養時間長的陳舊細菌，可能由陽性變為陰性。作細菌運動性檢查時，液體培養基的幼嫩培養物（幾小時到十幾小時）最為適宜。作炭疽莢膜染色時，因炭疽桿菌在一般培養基上不形成莢膜，而在動物體內形成明顯的莢膜，因此，應先接種小鼠，取死亡動物的病料作塗片標本鏡檢。作鞭毛染色時，以液體培養基為宜。芽胞的形成，因細菌種類不同，往往對培養條件如培養基、空氣和培養時間等而異，但一般均要求較長時間。鏡檢時除注意其基本形態結構和大小（要用測微計測量）外，還應注意其排列狀態、菌端形狀、有無兩極染色、有無形成芽胞和莢胞等。必要時可用電鏡觀察其微細結構。3.常用的幾種染色方法塗片用的載玻片需用清潔液洗凈、擦乾、不留油質，否則培養物不能均勻地推開。被檢材料如果是肉湯培養物，用鉑金耳環取一滴，均勻塗抹於載玻片上，塗抹的范圍約有手指甲大即可。隨後，在酒精燈火焰上加熱使之固定（即火焰固定）；被檢材料如果是固體培養物，先滴一滴水（常用生理鹽水）於載玻片上，用鉑金耳環取少許培養物，在水滴中混勻，培養物不宜太多，菌體看不清楚。膿汁、淋巴液、乳汁也按同樣方法制備抹片。血液和病變組織，直接塗抹在載玻片上，組織抹片也不能太厚，否則看不見細菌，細菌培養物抹片用火焰固定，組織抹片常用甲醇或甲醛固定。

❹ 病原微生物中細菌常見檢測方法有哪些

傳統檢測有三種方法1、直接顯微鏡觀察，正常情況，在一定的培養條件下（相同的培養基、溫度以及培養時間），同種微生物表現出穩定的菌落特徵。可以通過顯微鏡觀察菌落特徵對微生物種類進行判斷。
2、選擇培養基培養微生物或人為提供有利於目的菌株生長的條件，選擇培養基，其作用是允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養一般是通過觀察微生物的同化作用類型或某一特徵進行間接判斷，得到的微生物往往並不只有一種，但是能夠大致確定這些微生物存在的共有特徵從而對其分類。
3、鑒別培養基，根據微生物的代謝特點，在培養基中加入某種指示劑或化學葯品。與選擇培養相比，鑒別培養基的鑒別所得結果的范圍比較小，一般可直接測定某微生物的種類。
現代定義
微生物：個體難以用肉眼觀察的一切微小生物之統稱。微生物包括細菌、病毒、真菌、和少數藻類等。（但有些微生物是肉眼可以看見的，像屬於真菌的蘑菇、靈芝等。）病毒是一類由核酸和蛋白質等少數幾種成分組成的「非細胞生物」，但是它的生存必須依賴於活細胞。根據存在的不同環境分為空間微生物、海洋微生物等，按照細胞機構分類分為原核微生物和真核微生物。
主要特徵
1、體小面大2、吸多轉快3、生長繁殖快
微生物的這一特性使其在工業上有廣泛的應用，如發酵、單細胞蛋白等。微生物是人類不可或缺的好朋友。

❺ 食品檢驗常用的儀器有哪些

1.電子天平：食品檢驗用試劑、樣品和標准品的稱量;

2.酸度計：食品檢驗過程中pH值的測定;

3.冷凍離心機：食品檢驗過程中營養成分或者污染物等的提取分離;

4.離心機：食品檢驗過程中營養成分或者污染物等的提取分離;

5.超凈工作台：食品檢驗過程中提供局部超凈工作環境;

6.生物安全櫃：食品檢驗過程中提供潔凈安全的操作環境;

7.索氏提取器：食品檢驗過程中營養成分或者污染物的提取;

8.超臨界萃取儀：食品檢驗過程中營養成分或者污染物的提取;

9.磁力攪拌器：食品檢驗過程中目的物質提取或反應過程中的攪拌混勻;

10.微波消解儀(高壓)：食品檢驗過程中樣品的消解;

11.冷凍乾燥機：食品檢驗過程中樣品的冷凍乾燥;

12.碎花製冰機：食品檢驗用冰的制備;

13.高壓滅菌器：食品檢驗中滅菌試劑的制備;

14 .冰箱：食品樣品和試劑的存放;

15.冷藏櫃：食品樣品和試劑的存放;

❻ 細菌性疾病的實驗檢查

(一)葯物敏感試驗 參閱臨床微生物
(二)聯合葯敏試驗 參閱臨床微生物
(三)血清殺菌滴度試驗(serum bactericidaltitre)原理和方法與試管稀釋法葯敏試驗同。用經過抗菌葯物治療後患者的血清與患者自身的病原菌進行試驗，患者血清能抑制細菌生長的最大稀釋度即血清殺菌滴度。一般認為血清殺菌滴度在1∶8以上者預示治療有效，在1∶4以下者則治療有可能失敗。本試驗對嚴重感染患者(如感染性心內膜炎)或粒細胞減低合並敗血症者的預後，有較大參考意義。但進行本試驗必須獲得病原菌。
(四)細菌β內醯胺酶活性測定 不少致病菌能產生β內醯胺酶，後者水解青黴素和頭孢菌素結構中的β內醯胺環而使之失去抗菌活性，如金葡菌、淋球菌和流感桿菌等對青黴素G或氨苄西林的耐葯性。因此臨床實驗室在對上述細菌進行葯敏試驗的同時，檢測細菌β內醯胺酶的產生，對臨床選用葯物有很大參考意義。測定的方法有碘法、微生物法、酸度(pH)法等；以頭孢硝噻吩(nitrocefin 或cefinase紙片)法最為靈敏可靠，並可在數分鍾內獲知結果。
(五)血葯濃度監測或治療葯物監測(therapeuticdrug monitoring，TDM) 葯物作用的強弱與組織和體液中的葯濃度成正比，而後者又與血葯濃度成平行關系，因此測定血葯濃度可作為感染部位葯濃度的間接指標。治療葯物監測即採用先進和靈敏的測試技術測定體液，特別是血液中葯物濃度，用以研究血葯濃度與療效、毒性的關系，確定最佳劑量和給葯間隔時間，提高葯物療效和減少不良反應。在抗菌葯物的應用中，血葯濃度監測主要適用於治療指數低，毒性大的葯物，例如氨基糖甙類抗生素、萬古黴素，或新生兒或嬰幼兒應用氯黴素過程中，或有腎功能損害的患者應用由腎排泄的抗菌葯物時出現或可能出現體內葯物積蓄者。有時大劑量青黴素治療也須進行監測，以防止出現青黴素腦病。
測定血葯濃度的方法有微生物法、放射免疫法、酶免疫法、熒光免疫法、氣相色譜法和高效液相色譜法等。後數種具有快速、專一性強、靈敏度高等優點，但亦各有一定缺點和限制，需要專門的設備儀器。

❼ 致病菌感染的微生物學檢查基本程序是怎麼樣的

病原微生物種類繁多，變異迅速，快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前，應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接塗片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因晶元、多聚酶鏈反應等，該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物，又稱病原體，有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、痴獃等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強，往往造成世界性大流行，因此對病原體的檢測必須做到快速、准確。常規病原學檢測方法操作繁瑣，檢測周期長，而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展，病原學診斷已不再局限於病原體水平，深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現並被應用於臨床和實驗室 J。核酸分子雜交技術、PCR技術、基因晶元技術等檢測方法，自動化程度高，快速省時、無污染、結果精確，可以准確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主，將標本直接塗片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。1．1 直接塗片鏡檢病原微生物體形體積微小，大多無色半透明狀，將其染色後可藉助顯微鏡觀察其大小、形態、排列等。直接塗片染色鏡檢簡便快速，對那些具有特殊形態的病原微生物感染仍然適用，例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接塗片鏡檢不需要特殊的儀器和設備，在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。1．2 分離培養與生化反應 分離培養主要用於臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間，檢測周期較長，不能同時處理批量樣本。為解決這一問題，各種自動化培養和鑒定系統不斷產生，傳統鑒定方法也在逐步改進，大大加快了檢驗速度。例如Microscan WalLCAway全自動微生物分析儀，可同時做細菌鑒定和葯敏試驗，檢驗500多個菌種。苛養菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養要求比較高，常規培養陽性率低。雍剛 等將不要同比例的葡萄糖、玉米澱粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養基中製成了新型淋病奈瑟菌培養基，大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養率。蘇盛通等在營養瓊脂中加人了中葯紅棗、赤小豆培養甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎鏈球菌等細菌，生長指數明顯高於血平板。1．3 組織細胞培養 活組織細胞培養適於專營活組織細胞內生存的病原體，包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的，將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養或用病原體敏感細胞系進行傳代培養，再將病原體接種於相應的組織細胞中後，病原體可在其中繁殖增長，引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種於敏感動物體內，引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。2 血清學與免疫學檢測血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術，簡化了鑒定步驟，常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協同凝集試驗、酶聯免疫測試技術等。酶聯免疫技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性，不僅可檢測樣本中病原體抗原，也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50％ ～80％ ，應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染，其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率極高，ELISA應用於乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果最為明顯。臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起，如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。免疫磁珠分離技術(IMBS)是近年來發展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯到磁珠微球上，通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物，在外部磁場磁力的作用下，將目標病原體分離出來。目前已經開發出了針對各種病原體的免疫磁珠，如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等，廣泛應用到各級科研和實驗室 。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測，檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯合來檢測病原菌，免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續用於分離培養使大腸埃希菌0157最低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g～；IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養條件比較特殊的細菌如苛養菌、厭氧菌進行快速檢測，肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS．PC

❽ 如何針對一名細菌感染患者進行病原生物學的診斷

摘要：病原微生物種類繁多，變異迅速，快速鑒定病原微生物的檢驗技術也在不斷發展前進著。目前，應用比較廣泛的病原微生物檢測方法主要有直接塗片鏡檢、分離培養、生化反應、血清學反應、核酸分子雜交、基因晶元、多聚酶鏈反應等，該文對這些檢測技術進展做一綜述。 對人和動物具有致病性的微生物稱為病原微生物，又稱病原體，有病毒、細菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體、真菌、放線菌、朊粒等。這些病原微生物可引起感染、過敏、腫瘤、痴獃等疾病，也是危害食品安全的主要因素之一。近年來出現的SARS、高致病性禽流感、西尼羅病毒感染等疾病的傳染性極強，往往造成世界性大流行，因此對病原體的檢測必須做到快速、准確。常規病原學檢測方法操作繁瑣，檢測周期長，而且對操作人員技術水平要求比較高。隨著醫學微生物學研究技術的不斷發展，病原學診斷已不再局限於病原體水平，深入到分子水平、基因水平的檢測手段不斷出現並被應用於臨床和實驗室 J。核酸分子雜交技術、PCR技術、基因晶元技術等檢測方法，自動化程度高，快速省時、無污染、結果精確，可以准確靈敏地鑒定病原微生物。1 傳統的病原微生物的檢測方法傳統的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養、生化鑒定等為主，將標本直接塗片染色鏡檢和接種在培養基上進行分離培養是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。1．1 直接塗片鏡檢病原微生物體形體積微小，大多無色半透明狀，將其染色後可藉助顯微鏡觀察其大小、形態、排列等。直接塗片染色鏡檢簡便快速，對那些具有特殊形態的病原微生物感染仍然適用，例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接塗片鏡檢不需要特殊的儀器和設備，在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。1．2 分離培養與生化反應 分離培養主要用於臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間，檢測周期較長，不能同時處理批量樣本。為解決這一問題，各種自動化培養和鑒定系統不斷產生，傳統鑒定方法也在逐步改進，大大加快了檢驗速度。例如Microscan WalLCAway全自動微生物分析儀，可同時做細菌鑒定和葯敏試驗，檢驗500多個菌種。苛養菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養要求比較高，常規培養陽性率低。雍剛 等將不要同比例的葡萄糖、玉米澱粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養基中製成了新型淋病奈瑟菌培養基，大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養率。蘇盛通等在營養瓊脂中加人了中葯紅棗、赤小豆培養甲型鏈球菌、乙型鏈球菌、肺炎鏈球菌等細菌，生長指數明顯高於血平板。1．3 組織細胞培養 活組織細胞培養適於專營活組織細胞內生存的病原體，包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的，將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養或用病原體敏感細胞系進行傳代培養，再將病原體接種於相應的組織細胞中後，病原體可在其中繁殖增長，引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種於敏感動物體內，引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。2 血清學與免疫學檢測血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術，簡化了鑒定步驟，常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協同凝集試驗、酶聯免疫測試技術等。酶聯免疫技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性，不僅可檢測樣本中病原體抗原，也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50％ ～80％ ，應用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染，其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率極高，ELISA應用於乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果最為明顯。臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起，如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。免疫磁珠分離技術(IMBS)是近年來發展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯到磁珠微球上，通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物，在外部磁場磁力的作用下，將目標病原體分離出來。目前已經開發出了針對各種病原體的免疫磁珠，如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等，廣泛應用到各級科研和實驗室 。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測，檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯合來檢測病原菌，免疫磁珠分離得到的目標菌可繼續用於分離培養使大腸埃希菌0157最低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g～；IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養條件比較特殊的細菌如苛養菌、厭氧菌進行快速檢測，肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS．PCR檢測，檢測時間縮短到10 h，最低檢測限可達10cfu·g～，有研究者利用IMBS結合實時熒光定量PCR(IMBS—RT—PCR)成功檢測出了水中的輪狀病毒和草莓的諾如病毒，檢測時間大大縮短；Leon—Velarde等利用IMB8結合酶聯檢測，大大提高了沙門菌的檢測效率。3 基因檢測隨著科技水平發展，分子生物學檢測技術日新月異，對病原微生物的鑒定已不再局限於對普通外部形態結構和生理生化特性等的一般檢驗上，而是深入到了分子水平、核酸水平。病原微生物的核酸序列即基因片段都是特異的，有別於其他種或屬，檢測其特有的基因片段序列可用來鑒別病原微生物。隨著科技的發展，基因檢測技術逐漸代替其它檢測技術，成為臨床檢驗科和基礎實驗室對病原體的主流檢測技術。3．1 核酸雜交技術具有一定互補序列的核苷酸單鏈在液相或固相中按鹼基互補配對原則締成異質雙鏈的過程叫核酸雜交，其雜交雙方是所使用探針和要檢測的核酸。在病原微生物檢測中核酸分子雜交主要包括膜上印跡雜交和核酸原位雜交兩種。膜上印跡雜交是指將核酸從微生物細胞中分離出來，純化後在體外結合到一定的固相支持物上，與存在於液相中標記的核酸探針進行雜交。核酸原位雜交是指標記的核酸探針直接與細胞或組織切片中的核酸進行雜交。探針還可以用熒游標記，在熒光顯微鏡或激光掃描共聚焦顯微鏡下即可鑒別病原體還可顯示在三維空間中的位置。核酸分子雜交檢測技術與其它方法相比顯著地優點是簡便、敏感、快速、特異。Wong 等用熒游標記2個不同的寡核苷酸探針從血液標本中檢測出假單胞菌屬和不動桿菌屬的細菌，最低檢測限為10 cfu·mL～，特異度為100％ ，檢測時間不到2 h。寡核苷酸探針是針對病原體特異基因序列設計的，可以將待檢測的病原體定位在不同的分類等級，如科、屬、種、亞種「 。（病原微生物檢測技術進展）3．2 基因晶元技術基因晶元(DNA chip)又稱為DNA微陣列(DNA microarray)或DNA晶元，是生物晶元的一種 j，是核酸分子雜交技術發展延伸而來的。通過微加工技術，將數以萬計甚至百萬計的基因探針即DNA片段有規律地排列成二維DNA探針陣列，固定到矽片、玻片等固態支持物上，與標記的樣品分子進行核酸雜交，用於基因檢測工作。其測序原理與核酸雜交一樣，但解決了傳統核酸雜交技術操作繁雜、檢測效率低、自動化程度不高的缺點。基因晶元在病原微生物感染診斷上的應用，大大縮短了確診所需要的時間，而且能檢測出病原體是否耐葯、對那些抗生素耐葯、對那些抗生素敏感。Naas 等設計的基因晶元可以檢測出銅綠假單胞菌、腸桿菌屬、鮑氏菌屬中各型B一內醯胺酶類耐葯基因。蔡挺等設計的基因晶元檢測出大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑氏不動桿菌、陰溝腸桿菌對l7種抗菌葯物的耐葯率。Batchelor 等開發的基因晶元可以檢測出編碼耐超廣譜8．內醯胺酶、磺胺類、四環素類、氨基糖甙類等47個耐葯基因的大腸埃希菌和沙門氏菌。基因晶元技術同樣還有些問題有待解決，如提高晶元的特異性和檢測信號的敏感性，降低晶元的製作成本等，而且多數晶元都需要昂貴的檢測儀器，這些問題使得基因晶元到目前主要局限於實驗室研究而未能廣泛應用於臨床病原微生物的檢測與鑒定。（病原微生物檢測技術進展）3．3 PCR技術聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction，PCR)是一種在體外是用已知寡核苷酸引物引導未知片段中微量待測基因片段並進行擴增的技術。由於PCR可以對待測基因進行擴增，特別適用於病原體感染早期的診斷，但是如果引物特異性不強，可能會造成假陽性的出現。PCR技術在近20年裡發展迅速，從基因擴增到基因的克隆和改造以及遺傳分析，可靠性逐步提高。Jbara 用PCR和傳統法直接檢測75例樣本中的流感嗜血桿菌、腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌，與傳統方法相比，PCR檢測的特異度和靈敏度分別為87．3％ 和100％ 。1988年Chamberian等提出了多重PCR的概念，同一PCR反應體系裡加上二對以上引物，可同時擴增出多個核酸片段，適合大量樣本的分析與鑒定。多重PCR具有：(1)高效性，在同一反應體系內可同時檢出多種病原微生物，或對同一病原微生物的不同型別進行分型；(2)系統性，多重PCR很適宜於成組病原體的檢測，如幾種肝炎病毒同時感染；淋球菌、梅毒螺旋體、艾滋病病毒等多重性病病原體的感染；需特殊培養的無芽胞厭氧菌感染；破傷風桿菌，炭疽桿菌，產氣莢膜桿菌，鼠疫耶爾森菌等戰傷感染細菌感染；(3)經濟簡便性，多種病原體在同一反應管內同時被檢出，節省試劑、節約費用、節省時間，為臨床提供更快更多更准確的診斷信息。Reyes等 用多重PCR從90例發熱但培養陰性的兒童細菌性腦膜炎腦脊液樣本中檢測出了腦膜炎奈瑟球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌，特異度100％ ，敏感度89％。實時熒光定量PCR，在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程。具有高度靈敏、高度特異、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點。實時熒光定量PCR對性病病原體早期確診、窗口期篩查、療效檢測、基因變異分析和預後評估等具有重要價值，為流行病學調查提供幫助 J。王娉等 建立了多重實時熒光定量PCR反應體系，同一體系能同時快速檢測出耐甲氧西林和產腸毒素A的金黃色葡萄球菌。熒光基團標記的特異性引物可准確反映病原體感染和葯物療效，特別適用於不可人工培養和難以培養的病原體如病毒、衣原體等感染的診斷。基因晶元技術與多重PCR結合可以通過PCR對目的基因進行放大，通過基因晶元的熒光探針增加檢測的靈敏性和特異性，使得兩種檢測技術的優勢互補，已廣泛應用於病原微生物的檢測。將病原體特異性基因作為靶基因設計出引物與探針，進行多重PCR擴增，制備出寡核苷酸晶元，再對待測樣本靶基因進行多重PCR擴增，將擴增產物與病原菌多重PCR基因晶元檢測體系雜交，可根據雜交信號直觀地判讀樣品中所含病原體的種類、型別、毒力、侵襲力，從而對病原體進行檢測和鑒定。（病原微生物檢測技術進展）3．4 其它基因檢測技術分子生物學技術飛速發展，各種新的基因檢測手段不斷出現。Notomi等於2000年開發出一種新的環介導恆溫核酸擴增法(1oop—mediated isothermal amplifi—cation of DNA，簡稱LAMP)，針對靶基因序列上6或8個特異區域設計出4或6條引物，在具有鏈置換活性的DNA聚合酶的作用下形成環狀結構和鏈置換對目標DNA大量擴增。短短幾年LAMP已被廣泛應用於疾病診斷、食品檢驗、環境監測、生物安全等各方面心 ]。李蒙等 運用LAMP法60 min檢測了16例開放性傷口深部傷口感染分泌物中的破傷風芽孢梭菌，其中陽性為4例，最低檢測限為4 x 10 。有研究報道l2 用LAMP技術快速檢測了200例肺結核患者的痰標本，結核分枝桿菌的陽性檢出率遠遠高於培養法和染色法。多位點可變數目串聯重復序列分析(Multiple—locus Variable—nun—ber Tandem repeat Analysis，MLVA)是一種根據病原體基因組中可變數目串聯重復序列的特徵來對病原體基因分型的一種技術，廣泛應用於金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、炭疽芽胞桿菌等的基因分型與鑒定 ⋯。4 小結與展望對病原體進行快速准確的檢測和鑒定是傳染病防治工作的首要問題。隨著生物學研究由宏觀領域向微觀領域的發展，病原體檢測方法也從組織形態學水平深入到分子水平、基因水平。近年來發展起來的病原微生物高通量檢測技術樣本需要量少、快速省時、無污染、診斷結果精確、自動化程度高，相信隨著研究的不斷進展和深入，這些高通量診斷技術和方法必將在病原微生物的診斷分析方面起到越來越重要的作用，而多種檢測技術的聯合和綜合更是有著廣闊的應用前景。

❾ 病原性細菌培養的條件有哪些

（一）細菌實驗室

細菌實驗室是進行細菌學實驗的場所。標本的接種、培養、分離、鑒定及葯敏試驗等工作都要在此完成。所以細菌室應該符合一定的條件。

1.細菌室必須安裝嚴密的門窗，以防室內環境受到外界的污染。且室內禁用風扇，避免細菌的播散。

2.細菌室必須安裝供空氣消毒的紫外線燈，置於操作台上面lm處，每天開始工作前照射20min。對其消毒效果要定期檢查，及時更換失效的燈管。

3.室內應備有消毒劑，用於試驗中發生菌液灑濺時的及時消毒處理。同時還應備有供工作人員浸手用的盛有消毒劑的水盆、肥皂及自來水源等。

4.室內操作台須每日用消毒劑擦洗，地面至少一周用消毒劑擦洗l次。

5.對接收的標本、無菌器具、用過的物品等應明顯分開並放在指定位置。同時要對用過的物品及時進行滅菌處理。

6.細菌室根據當地的氣溫特點，安裝空調機，以適合細菌實驗工作。同時室內應設置必要的消防設備。

（二）無菌實驗室

無菌實驗室是細菌實驗室內用於無菌操作的小室，其內部裝飾、消毒條件要求更嚴格。

1.無菌室應完全封閉，人員出入應有兩道門，其間應隔有緩沖區。

2.用前應以紫外線消毒30min，定期用乳酸或甲醛熏蒸，徹底消毒。

3.在無菌室中一般僅限於分裝無菌的培養基及傳染性強的細菌的接種，不進行有菌標本的分離及其他操作。

4.無菌室內應僅限操作人員進入，而且進入無菌室應著隔離衣和專用鞋，操作時戴口罩，隨時保證室內的無菌狀態。

5.條件有限的實驗室，可用超凈工作台代替無菌實驗室進行相應的操作。超凈工作台應選擇垂直氣流通風方式。

6.無菌室應配備空調設備，保證不因室溫而影響工作。

（三）基本設備和器具

細菌實驗室內必須具備的設備和器具有：用於細菌培養的溫箱、C02培養箱、厭氧培養設備；用於觀察細菌形態及標本直接鏡檢的顯微鏡；用於物品滅菌的高壓蒸氣滅菌器、干烤箱；用於儲存培養基、診斷用血清、抗生素及菌種等的冰箱和冷藏櫃；用於挑取標本、接種等的接種器具，包括接種環和接種針；制備培養基時用的pH計；細菌檢驗操作時用於接種器具滅菌的火焰燈或酒精燈；還有各種必用的平皿、試管、吸管等玻璃器皿，以及離心機、天平等。

❿ 檢測有害元素用什麼儀器

最經典的是採用原子吸收光譜儀（AAS），配上火焰和石墨爐可檢測元素痕量級的水平。近幾年來具有我國自主知識產權的原子熒光光譜儀（AFS），用於檢測砷、鉛、汞、錫、硒、鍺、銻等元素，具有靈敏度高、檢出限低、可多元素同時檢測，且價廉等優點。近幾年來，電感耦合等離子發射光譜—質譜聯用儀（ICP-MS），以具有極高的靈敏度，檢出限可達ng/ml級水平引起重視。

鑒於同一種元素價態（形態）不同，毒性差異很大，所以近年來對元素價態分析檢測很受關注，國外多採用HPLC-AAS、GC-AAS、HPLC-ICP-MS以及CE-ICP-MS，後二種聯用技術與儀器雖相當完美，但價格昂貴。近幾年我國研發成功並已批量生產的LC-AFS聯用儀，靈敏度、檢出限均能滿足農產品、食品安全檢測的要術，且價廉。

（a）AAS的國外著名生產廠家為：Thermo、PerkinElemer、Shimadzu 、Varian、 Jena AG等。國內有普析、東西電子、瑞利、上海精科、上海光譜、天美等。

（b）ICP、ICP-MS的國外著名生產廠家是：Thermo、PerkinElemer、 Shimadzu 、Agilent、Varian等；國內尚無批量生產的廠家。

（c）AFS目前只有我國生產，著名廠家為吉天、海光、瑞利等，其中吉天還生產LC-AFS，即元素價態檢測儀。

我認為食品安全檢測中,有毒有害元素檢測基本上可用國產儀器替代進口儀器了，尤其元素價態分析，對於縣、地（市）級食品安全質檢站，國產此類儀器完全能滿足要求。

（四） 致病菌檢驗和細菌鑒定的儀器

至今細菌鑒定、檢驗的方法有三大類：傳統方法、傳統法基礎上的數值化方法、化學及分子生物學的方法，每一類又派生出幾種方法及檢驗儀器。我國以往多用傳統的方法，俗稱培養法，即細菌培養後根據鏡檢其形態特徵和分析其生理及代謝特徵檢驗細菌。近幾年來，我國已大量引進國外20世紀90年代以後推出的新方法和儀器，應用的較廣的是：

（1）根據不同細菌對不同碳源的代謝利用率進行自動鑒定和檢驗，這屬於數值化方法和儀器，如API、ATB、VITEK等系統。

（2）利用抗原和抗體間專一性結合、免疫反應，進行致病菌檢驗，其中以酶聯熒光免疫分析（ELISA）為代表，如VIDAS系統。

（3）運用基因檢測技術檢測病原菌，如杜邦公司開發的BAX系統可用於進行菌種鑒定、分型， RP（Ridopvinter）系統用於溯源。

（4）根據不同細菌都具有特徵性的脂肪酸圖譜進行細菌鑒定，如Agilent開發的系統。

（5）基於表面等離子諧振（SPR）生物感測器開發的致病菌檢驗系統，如Biacore系統。

（6）基於生物晶元為平台，使用致病菌檢測試劑盒，檢測致病菌的系統，如我國博奧生物公司開發出來的可檢測12種食源性致病菌的生物晶元檢測系統。

致病菌檢驗和細菌自動鑒定系統的國外著名生產廠家為Biomerieux、Dupont，Agilent、Biologe、GE Healthcare和Biacore等；國內以往尚無正式生產廠家，只有抑菌圈測定儀的廠家，這是一個極大缺陷。可喜的是2000年以來博奧生物公司（生物晶元國家工程中心），推出了生物晶元檢測系統，另外中科院電子所也推出了SPR系列產品。需知從世界范圍講，致病菌引發的食品中毒案例，是食品安全中的首位，所以期待著有更多的國產儀器推出、並佔領這一巨大的市場。