Ⅰ 島津液相LC-20AT的壓力問題
首先看看顯示的壓力,甲醇做流動相,250mm的C18柱一般壓力在7左右,如果壓力異常偏高,就是哪裡堵住了,可以一段段排查,先把柱子卸下來,如果壓力馬上下降說明色譜柱賭了,可以這樣排查。
Ⅱ 島津的高效液相色譜色譜儀用了一年了,重復性現在不是很好,什麼原因
有色友經常反映說,樣品或者標品的重現性不好,下面本人根據自己的經驗把原因和處理方式給大家分享一下。
不要籠統說重現性不好,要細分兩種情況:單獨樣品重現性不好;樣品和標品的重現性不好。
(一)如果單是樣品的重現性不好而標品的重現性可以的話,原因比較容易分析。問題可能出現在樣品本身上。
1)樣品降解或者分解,當你的樣品在稀釋液中不穩定,這種情況是很有可能發生的。解決辦法:改變稀釋溶液,要是遇水
分解的流動相中不能有水,必要時還等改用正向色譜。
2)樣品溶解時間不足。比如當你進第一針時候假設樣品溶解率為90%,後一針為95%,以後隨著時間延長而增加,這樣
你重現性肯定不好。這種情況的判定比較簡單,不要肉眼看容量品是否有不容物,你的眼睛沒有那麼高的解析度,只要把
容量瓶超聲一下,看看超聲前後的對比就可以判斷。如果是這種問題,解決方法簡單,在處理樣品時加入少量的易容溶
劑,超聲5秒左右,再用你的稀釋液定容,一般就可以解決。
3)樣品稱量問題。當你做同一容量瓶的樣品取得很好的重現,而在同一樣品不同容量瓶中存在重現不好的情況。可能就是
你的稱量中出了問題。具體哪裡的問題,我沒有肯定的答案,但是可以肯定的是,你必須要重新稱量,並復檢,按著要求
可是要加倍復檢的,所以每次稱量你都必須小心。此外,還可能是容量瓶本身不準,不過這個可能性比較小,建議用
100ml容量瓶。因為容量瓶越小誤差越大,這點我做過驗證的,在國內可以作為「真理」。真理就不要在耗時費事驗證
了。
(二)樣品和標准品同時出現重現性不好的情況。
這種情況比上一種可能要稍微復雜一些。但是也比較好分析。
首先,不要籠統說重現性不好。也有兩種情況,一是保留時間較好,只是響應值不好;二是兩者都不好。
如果是第一種情況,請參考(一)中的分析,這里不贅述。
如果保留時間和響應值都不好可能的原因如下:
1)柱溫的影響。柱子溫度和保留時間的關系,一般是反向的,即柱溫越高保留時間越短,反之亦然。但是柱溫不僅會對保
留時間有影響,還會影響響應值也就是峰面積。一般來講保留時間提起會使峰寬變小和峰高變大,但他們兩者的對於峰面
積的作用一般不會正好抵消,也就是說面積有所變化的。所以,柱溫箱是必要的。如果你還沒有趕快和老闆說,如果不給
買,就說是我說的。哈哈!
2)流速和柱壓的問題。首先要知道在液相色譜中是用流速控制柱壓的,流速你要設定的,而柱壓是配合你的流速儀器自行
控制的。柱壓是流速的因,流速是柱壓的果。當你系統正常運行時突然柱壓降低,這個時候流速會突然降低,樣品的保留
時間會延後,當然也就造成重現性的不好了。還有柱壓波動較大的時候,也不會有好的重現性(保留時間和響應值)。
的。
3)其他比較少見的情況。燈的能量不足。表現為,保留時間可以,但是響應值逐漸降低。解決辦法:換燈。說實在的這種
情況比較少見,至少我沒有遇到過。有些色友在分析類似的問題時上來就說人家的燈可能不行了,我覺得這是很站不住腳
的一種說法。首先氘燈的平均使用壽命為3000小時,每天8小時的話可以用375天(一年半使用時間),也就是說這種情
況如果成立的可能性為1/375,而且未必成立。其次,一般儀器開機時都有自檢的(國產儀器我不清楚,至少waters和
agilent是有的),自檢通過了一般工作1天是一點問題都沒有的。我曾經在自檢初次通不過情況下使用半月也沒有問題
(一次不通過,關機,停一會再開機)。第三,我認為燈能量的衰減速度是隨著你燈能量降低而降低的。這個是我個人的
觀點。好比100元的股票每天跌10%,第一天下跌10元,第十天下跌多少我就不算了,反正比10元少很多。扯遠了,這
個觀點套用到這里就是,燈的能量低事實,不支持短短一天時間內重現性不好這個現象,也可以近似說等能量低與檢測重
現性不好無關。看似比較矛盾,我的論據在反對我的論點。但是我想這就是我的態度,因為這種情況我沒有遇到過,而我
推論也僅僅是推論,加之有的色友一再強調,未免心虛,故而矛盾一把吧。
Ⅲ 島津高效液相最小進樣量和最大進樣量是多少
最大進樣量和最小進樣量的問題要看你的儀器。
如果是手動進樣,那麼定量環就是最大進樣量。一般是20ul,最小最好不低於定量環的一半,就是10ul。不過定量環是可以換的。50ul,100ul,都可以。跟廠家購買就行了。
如果是自動進樣,那麼可調節性就很強了。最小的2ul、5ul,最大的50ul,100ul都可以。不過有一點,你要保證進樣量和濃度配合,峰面積不超載。就是說,我打了一針之後不出現平頭峰。
關於流速的問題,一般來說0.5ml/min-2ml/min的流速都比較常見。
不過一個要看你的流動相。如果你的流動相當中有鹽,最好流速不要太低,會導致鹽析的。
一個要看你的柱壓。其實島津的液相流速開到5ml/min也不是問題。不過你的色譜柱未必能承受得住。一般的反相色譜柱(C18、C8、苯基柱),柱壓最好都不要超過20MPa。太高的柱壓會加速色譜柱老化。
還有流速要看你的樣品跑的情況了。一般來說,你的色譜峰要保證都分開,流速太快可能就分的不好了。而且保留時間上面也有問題,最好在5min之後。因為色譜柱還有一個死體積。太快出峰可能物質在色譜柱當中沒有保留。這個具體實驗的時候可以自己掌握。
Ⅳ 島津高效液相色譜儀儀器開機壓力超大,怎麼辦
建議你把色譜柱卸下來開機試一下,如果色譜柱卸下來開機壓力也高,就說明儀器那裡有點堵了。如果不是,就是色譜柱的問題。
氘燈的使用時間,與壓力沒有關系。
色譜問題建議你去「生化色譜網」去看看。這個網站非常專業。
Ⅳ 島津液相基線不穩,怎麼回事
1、可能是還沒有平衡。一般更換色譜柱、流動相之後,系統需要一段時間平衡。大約30-60min左右。有時候系統裡面有緩沖鹽,那麼平衡時間可能就更長了。等過了那個時間就好了。當然,這是針對等度條件說的。如果是梯度洗脫,那麼基線肯定是會有變化的。這個在情理之中的。
2、流動相不幹凈。色譜儀器需要用色譜純,如果是反相體系,那麼水應該是超純水,如果用到無機鹽,那麼需要用0.45um或者0.22um的濾膜過濾才行。如果用的是國產的甲醇乙腈,那就換一下吧。
3、氘燈壽命過長。一般島津的氘燈可以使用2000個小時,但是壽命到了之後它不會壞掉,實驗員也就繼續使用了。但事實上在氘燈到了壽命之後,它檢測樣品的線性就會不好,而且在基線會不穩。這種情況在低波長下尤其明顯。這個解決方法就只能是更換到等了。
4、其他的實驗原因。這個我沒辦法一一給你說明。比如實驗室的溫度不穩定。那麼對基線肯定是會有影響的。比如在示差檢測器裡面,那麼溫度的影響就會相當大。再比如在線脫氣,如果流動相是在線混合,那麼基線很有可能不穩定。方法也很簡單,手混過濾就好了。這個需要具體問題具體分析。
Ⅵ 島津液相色譜儀的問題。
目前液相色譜只有極少數可以用超純水沖洗,一般的C8和C18柱都不能用純水沖水,即使是說明書說可以用超純水清洗,也不益這么做,這樣易造成填料坍塌。泵壓高,這是很正常,但不建議用大流量沖冼,一般情況不能超過泵能承受的壓力,比泵的最高承受壓力低10Mpa。即使用純的甲醇和乙腈,雖壓力不會過線,但最好不要這樣用,因為這樣容易造成柱的填料坍塌,
Ⅶ 島津液相色譜儀LC-2010A,流動相選用20%甲醇,接兩通,2ml/min的流速,壓力67。
首先我問一下,你說壓力是67,單位是什麼?67bar,6.7MPa?這兩個是一個數。如果是著兩個單位壓力有點高。如果是67PSI就不用折騰了。
島津色譜最愛堵的幾個點:
過濾頭:就是插在溶劑瓶里的那個。
單向閥:一進一出兩個
進樣口六通閥
這個沒辦法,挨個卸下來試一下。不過你先看看你儀器堵的原因。是鹽析了?還是微生物堵了,或者是配件老化了。老化了沒辦法,如果是前兩者,不拆也可以挽救一下。
鹽析:5%稀硝酸。如果能開溫度,最好把溫度調高一點。看看能不能把鹽溶出來。
微生物:DMF,記得過濾一下,那玩意挺臟的。
從一兩個小時再換異丙醇,低流速沖一會兒。異丙醇粘度大可以帶出來。
都不行再看配件。過濾頭,一拔就下來了。還有單向閥,拿扳手擰就行了。放在5%的甲醇裡面超聲30min。然後放在純甲醇里超聲10min。記住單向閥,一定要有方向的放著。就是說它在儀器上是大頭朝上的就朝上超聲,它是大頭朝下的就朝下超聲。
六通閥,我不建議你自己拆卸。首先,零配件太多,再有,重裝可能會影響密封性。如果拆的話也不太好講。就是怎麼拆的怎麼裝唄。島津的說明書上有六通的進出口方向,可以試一下。有可能是樣品不幹凈,沒過濾。裡面的不溶性微粒堵住了。那就打開六通。它可能是堵在了哪個管路里,或者是堵住六通進出的口上了。
Ⅷ 島津SIL30壓力高什麼原因,0.5的流速,壓力在9MPA,不接色譜柱的情況下
咨詢記錄 · 回答於2021-08-05
Ⅸ 怎麼挑選島津液相色譜質譜聯用儀
GYE99油色譜測試儀
油色譜分析儀是以氣體為流動相(載氣)。當樣品由微量注射器「注射」進入進樣器後被 載氣攜帶進入填充柱或毛細管色譜儀。由於樣品中各組份在色譜儀中的流動相(氣相)和固定相(液相或固相)間分配或吸附系數的差異,在載氣的沖洗下,各組份 在兩相間作反復多次分配,使各組織在柱中得到分離,使各組份在柱中得到分離,然後用接在柱後的檢測器根據組份的物理化學特性,將各組份按順序檢測出來。油色譜分析儀就是根據上述原理製造的分析儀器。
油色譜分析儀由流量控制部件、進樣器、色譜柱箱、檢測器、溫控及檢測器電路部件、色譜工作站等部分組成。 基型儀器中部是色譜柱箱,右側上部是微機溫度控制器,右側下部是FID微電流放大器,儀器左部是流量控制部件及氣路面板,柱箱上方右部是離子化檢測器安裝 位置(基型安裝二個火焰離子化檢測器)以及熱導池檢測器(TCD)安裝位置,柱箱上方左部是雙填充柱進樣器或毛細管進樣器。
Ⅹ 島津高效液相色譜儀壓力過大是怎麼回事
流速過大、流動相粘度過大、色譜系統堵塞都可能壓力過大。