做逆轉錄的儀器叫什麼

『壹』 逆轉錄PCR的實驗步驟用到哪些試劑和儀器

• 一、實驗器具與材料：

• 1、移液器：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl

• 2、吸頭：1ml、200μl、20μl

• 3、勻漿管：5ml

• 4、吸頭台：放置1ml吸頭的一個，放置20μl吸頭的一個

• 5、EP管：1.5ml、0.2ml、100μl

• 6、試劑瓶：2個60ml的棕色試劑瓶（廣口，帶蓋）；1個125ml的白色試劑瓶（放無水乙醇）

• 7、量筒：50ml、250ml、500ml

• 8、容量瓶：250ml、500ml、1000ml

• 9、試管架：5ml、1.5ml、20μl

• 10、鹽水瓶：250ml、500ml各2個備用，一個裝無水乙醇，另一個裝DEPC水

• 11、鋁制飯盒：4個

• 12、塑料小飯盒：1個

• 13、大瓷缸：2個

• 14、錫泊紙：一卷

• 15、卷紙：2卷

• 16、三角燒瓶：帶蓋，稍大

• 二、實驗器具的處理與准備

• 1、塑料製品：（包括槍頭、EP管、勻漿管等）

• 先將DEPC水從容量瓶中倒入瓷缸中，將塑料製品逐個浸泡其中，其中小槍頭需要吸管打入DEPC水，過夜，然後高壓，再烤乾備用，實驗前將槍頭等放入吸頭台，再高壓一次（EP管）

• 2、玻璃製品：泡酸過夜，沖洗干凈，蒙錫紙烤乾備用（DEPC水泡）（洗凈後先泡1‰DEPC過夜，再烤乾）

• 3、勻漿器：（包括剪刀、鑷子）先洗凈後，再高壓（不需要泡DEPC）

• 三、試劑配製：

• 1、DEPC水：吸出1ml放在1000ml雙蒸水中配成1‰DEPC水，放在1000ml容量瓶中靜置4小時備用。

• 2、75%乙醇：用無水乙醇DEPC水配，然後放-20℃保存（其中DEPC水需先高壓）

• 3、異丙醇：放入棕色瓶中

• 4、氯仿：放入棕色瓶中

• 5、瓊脂糖

• 僅供參考

『貳』 RNA轉錄為cDNA的試劑盒有哪幾種，優缺點各是什麼

說白啦，你就是要逆轉錄試劑盒啦。每個課題組用的都不一樣，我們課題組用的比較多的是OneShine™First Strand cDNA Synthesis Kit。給你發下說明吧。

手指輕微彈震PCR管以混勻體系，若液體濺到蓋子內壁上則短暫低速離心使其下沉入管底。

3．把經過2處理後的PCR管放入PCR儀中，如果使用Oligo (dT)18Primer或gene specific Primer，則設置反應程序為42℃ 60 min，若使用Random Hexamer Primer，則設置反應程序為37℃ 60 min。

4．85℃ 5 min即可終止反應。

III注意事項

1. 試劑應儲存在-20℃。

2. 合成的第一鏈cDNA可馬上用於第二鏈的合成、PCR、qPCR或線性RNA的擴增，若要長期保存則建議置於-70℃以下。

3. M-MLV 5×Reaction Buffer是一種適配於後續多種實驗的酶緩沖液，在進行下一步實驗前不需要再用苯酚抽提和乙醇沉澱。

4. cDNA第二鏈合成的標准操作方法見：Sambrook, J., Fritsch, E. F. and Maniatis, T. (1989) In: Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 8.64.

5. 總RNA中必須沒有胍鹽、多胺、亞精胺、焦磷酸鹽、磷酸鹽、金屬離子、SDS、EDTA、乙醇和苯酚等，因為這些物質可以抑制逆轉錄酶的活性。

6. 總RNA必須沒有DNA污染，可以對總RNA直接進行RT-PCR以驗證是否有DNA的污染。也可以設置跨內含子的引物用於後續的RT-PCR實驗。可以用DNaseI對總RNA做cDNA第一鏈合成前的處理，如OneShine DNaseI。DNaseI處理總RNA的標准操作方法見：Wiame, I. et al., Irreversible heat inactivation of DNaseI without RNA degradation, Bio Techniques, 29, 252-256, 2000.

7. cDNA第一鏈合成實驗所用的PCR管、吸頭等需用DEPC水處理過，以防止RNase對總RNA的降解。

8. 在進行cDNA第一鏈的合成實驗之前可以對所提取的總RNA進行電泳檢測，電泳試劑盒和電泳槽也需用DEPC水配製或重洗,如OneShine DEPC水、OneShine RNase free電泳buffer；電泳的條帶中28S和18S的邊緣應清晰才表明所提的總RNA質量達到要求。

9. 可以設置不同的Control以證明是否存在影響所研究RNA的實際拷貝數的因素，比如不加模板、不加M-MLV Reverse Transcriptase的陰性Control實驗，GAPDH RNA的陽性Control實驗等。

10. 在進行後續的RT-PCR時，可以對cDNA第一鏈進行稀釋。

『叄』 熒光定量pcr和實時熒光定量pcr還有反轉錄pcr都是什麼呀有什麼區別,分別是什麼作用啊

實時就是指每個階段的熒光都有收集,其實現在所有的熒光定量PCR儀器都是實時的.熒光定量PCR的英文簡寫是：FQ-PCR,F是熒光的縮寫,Q是定量的縮寫.（或者寫成是RT-PCR.RT就是realtime的縮寫）.
做定量PCR的目的是為了了解起始模板數的量,這個一下寫不清楚,你看一個說明書絕對看得懂.
而反轉錄PCR就是把mRNA反轉錄成cDNA,簡寫也是RT-PCR.不過和上面的不同!這個RT是reverse transcript的縮寫!
其實啊,對於做表達量的實驗而言,反轉錄PCR是熒光定量PCR的第一步,很多人是這么來描述的：RT-qPCR.這個RT就是反轉錄,這個q是指定量.
總之,自己好好看說明書!

『肆』 要做（mRNA）RT PCR，需要的儀器有哪些

首先，RT不是證明RNA有無表達的很好方法，RT批不出來會有很多原因，並不僅僅是沒有模板。建議你做northern。
做RT需要
1，很乾凈整潔的實驗環境，RNA提取對操作環境的要求很高。
2，電動組織分散儀（IKA公司的T10那種）或研缽+液氮或玻璃組織研磨器，以上提取效果遞減。
3，1.5ml管冷凍離心機。
4，移液槍1ml、200ul、10ul一套，最好專用。
5，紫外分光光度計、石英狹縫比色皿。
6，核酸電泳儀、電泳槽（電泳槽最好專用）
7，RNase
free的各式槍頭、1.5ml離心管；RNase
free的雙蒸水。
8，如果樣品不會立即進入下一步實驗，建議具備超低溫冰箱。

『伍』 ABI 7500 PCR儀可以做逆轉錄嗎

可以,只要能夠滿足精確的溫度控制就可以.根據所用逆轉錄酶的反應溫度,選擇37C,42C或者50C直接進行逆轉錄反應就可以了.所以PCR儀沒有任何問題的.

『陸』 逆轉錄的工具

轉錄所需工具應為DNA解旋酶和RNA聚合酶.翻譯所需工具應為tRNA,mRNA是翻譯所需的模板.

『柒』 ABI 7500 PCR儀可以做逆轉錄嗎

可以，只要能夠滿足精確的溫度控制就可以。根據所用逆轉錄酶的反應溫度，選擇37C,42C或者50C直接進行逆轉錄反應就可以了。所以PCR儀沒有任何問題的。

『捌』 反轉錄時用水浴鍋控制溫度好還是pcr儀好

反轉錄時用水浴鍋控制溫度好還是pcr儀
水浴鍋是實驗室常用的恆溫設備，水浴鍋的液體介質是水，沸點溫度通常為100攝氏度。在標准環境下燒開水時，無論燒的火有多大，時間有多長，只要還有水在沸騰，它的溫度一定是100度。這樣，用水浴鍋加熱就可以控制一個恆定的溫度。
水浴鍋主要適用於各大中院校、科研企事業單位的實驗室和化驗室，數顯電子恆溫水浴鍋廣泛位用於乾燥、濃縮，蒸餾、浸漬化學試劑，浸漬葯品和生物製品，也可用於水浴恆溫加熱和其它溫度試驗，是生物、遺傳、病毒、水產、環保、醫葯、衛生、生化實驗室、分析室教育科研的必備工具。對各種化學樣品，生物製品進行蒸餾、乾燥、濃縮及溫漬，是實驗室不可缺少的實驗器材。

『玖』 RPA試劑及試劑盒，提取RNA，然後做逆轉錄需要什麼試劑及試劑盒謝謝了，大神幫忙啊

trizol法提取大小RNA，trizol買invitrogen公司的。 逆轉錄用promega公司 http://proct.bio1000.com/100167/ 的M-MLV

『拾』 提取RNA，然後做逆轉錄需要什麼試劑及試劑盒

看你要提什麼RNA了，如果是總RNA建議用TRIZOL法，反轉錄用一步法或兩步法反轉錄試劑盒，如果你要做雙鏈cDNA，接下來還要進行第二條鏈合成，有雙鏈cDNA合成試劑盒，也有這兩步都包括的試劑盒。