Ⅰ 蛋白質柱純化過程中用的主要儀器有哪些
柱純化是蛋白純化最高效的方法.
首先我們需要一個帶有特定標簽的柱子,也可能是陰離子柱,陽離子柱或者層析柱.
然後要一台純化儀,我們實驗室的是bio-red,其實最好的純化儀是AKTA的,很耐折騰,bio-red的太敏感,大量純化是容易出問題.
其他的儀器就是純化後工作,比如純化好的蛋白保存,可能會用到冷凍乾燥.
對了,還有一個,就是SDS-PAGE蛋白電泳儀,用來檢測蛋白是否表達,是否完全破碎,純化後是否有雜蛋白等等.
其他的就沒有了.
Ⅱ Lcms用的是什麼儀器
在飛秒檢測中心使用的是液質聯用（LCMS），質譜儀一般由進樣系統、離子源、分析器、檢測器組成。還包括真空系統、電氣系統和數據處理系統等輔助設備。 液質聯用(LC-MS)主要可解決如下幾方面的問題：不揮發性化合物分析測定；極性化合物的分析測定；熱不穩定化合物的分析測定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析測定；沒有商品化的譜庫可對比查詢，只能自己建庫或自己解析譜圖。
Ⅲ 現在國內檢測蛋白質用什麼方法涉及到哪些化學儀器
目前食品中蛋白質的測定方法有蛋白質自動分析儀，近紅外自動測定儀，紫外分光光度法以及凱氏定氮法等。本文採用納氏試劑作為顯色劑測定食品中蛋白質含量，適用范圍廣，可用於各類食品及保健食品的檢測。用本法對標准品、質控樣品進行測定獲得滿意結果，對批量樣品的快速測定更具有實用性。現將結果報告如下。
材料與方法
儀器與試劑 WFZ800-D3型紫外分光光度計(北京第二光學儀器廠)。分析純硫酸、硫酸銅、硫酸鉀。(1)納氏試劑：稱取碘化汞100g及碘化鉀70g，溶於少量無氨蒸餾水中，將此溶液緩緩傾入己冷卻的32%氫氧化鈉溶液500ml中，並不停攪拌，再用蒸餾水稀釋至1L，貯於棕色瓶中，用橡皮塞塞緊，避光保存。(2)硫酸銨標准儲備溶液(1.0g/L)：精確稱取經硫酸乾燥的硫酸銨0.4720g，加水溶解後移入100mL容量瓶中，並稀釋至刻度，混均此液每毫升相當於1.0mgNH3-N(10℃下冰箱內儲存穩定1年以上)。(3)硫酸銨標准使用溶液(0.01g/L)：用移液管精密吸取1.0ml標准儲備液(1.0g/L)於100ml容量瓶內，加水稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升相當於10.0μg NH3-N。
方法
標准曲線繪制 取25ml比色管7支，分別准確吸取0.01g/L硫酸銨標准使用液0.00，0.5，1.0，3.0，5.0，7.0，10.0ml(相當於標准0.0，5.0，10.0，30.0，50.0，70.0，100.0μg)，加水至10ml刻度，於標准系列管中各加2ml納氏試劑，混勻後放置10min，移入1cm比色皿內，以零管為參比，於波長420mm處測量吸光度，以標准管含量為橫坐標(μg),對應的吸光度(A)值為縱坐標繪制標准曲線。
樣品測定 選擇牛奶和奶粉為檢測樣品。精密稱取樣品0.1～2.0g置於250ml三角瓶中，加入0.2gCuSO4、1.0gK2SO4、硫酸10ml，先小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫停止後，加大火力至液體呈藍色，使H2SO4剩餘量約為3ml左右為止，室溫放冷後，沿瓶壁慢慢加入10ml水，移入100ml容量瓶中，用少量蒸鎦水洗三角瓶3次，洗液全部並入容量瓶中，冷卻，加蒸餾水至刻度，混勻。測定時取0.5ml，加水至10ml刻度，以後操作同標准曲線。同時做空白試驗。
計算公式
X=c×Fm×V2V1×1000×1000×1000
式中：X-試樣中蛋白質含量(g/100g或g/100ml)
C-試樣測定液中扣除空白後氮的含量(μg)
V1-試樣消化液定容體積(ml)
V2-測定用消化液體積(ml)
m-樣品質量(g)或體積(ml)
F-氮換算為蛋白質的系數。
蛋白質的氮含量一般為15%～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.7，肉及肉製品為6.25，大豆為5.71。
結果
2.1 測定波長選擇 含氮量為30μg的標准管在顯色後，在波長400～440mm范圍內每間隔5nm進行測定，最大吸收波長為420mm。
顯色劑用量選擇 含氮量為30μg的標准管分別加入不同量的納氏試劑，在420mm的波長下分別測定其吸光度結果。納氏試劑顯色劑加入量為1.5～3.0ml時吸光度基本無變化，本法選擇加入納氏試劑2.0ml。
顯色時間及穩定性 含氮量為30μg的標准管經顯色後，分別在10，30min，1，2，4，8h進行測定。顯色後10min～8h內吸光度穩定無變化。本法選顯色10min後測定。
標准曲線 回歸方程：y=0.016X-1.5×10-3，r=0.9998，最佳線性范圍0.0～100μg。
精密度 牛乳和奶粉2種樣品分別取6份按本法重復測定6次，牛乳和奶粉精密度測定結果：平均數分別為3.06，23.50；標准差分別為±0.029，±0.073；相對標准偏差分別為0.31%，0.94%。
對2種樣品利用標准加入法作回收試驗(表1) 結果可見，回收率為95.50%～99.44%。
2種方法測定結果比較 分別用GB/T5009.5-2003凱氏定氮法與本法測定。結果顯示，2種分析方法的測定結果差異無統計學意義(t=0.026，P>0.05)。
測定標准物質 用本法測定4種不同的蛋白質標准物質，測定結果與標准物質含量一致。
以納氏試劑作為顯色劑快速測定食品中蛋白質的方法特點簡單、快速，適用於批量樣品測定。在鹼性條件下NH3-N與納氏試劑反應生成的黃色化合物穩定。本法與國標凱氏定氮法進行比較t=0.026,P<0.05，n=32，2種方法測定結果無明顯差異。測定范圍廣，線性范圍寬0.0～100.0μg；精密度高；相對標准偏差為0.31%～0.94%；回收率好，加標回標率為95.50%～99.44%。用本法測定標准物質結果一致，用於質量控制樣本測定結果滿意。本法儀器試劑簡單，易於基層普及，有利於推廣應用。
Ⅳ western blot實驗都需要哪些儀器
試劑：tris、Hcl、Nacl、脫脂牛奶、甲醇、甘氨酸、tween 20、抗、二抗、顯色劑及SDS PAGE需要試劑（tris、Hcl、TEMED、SDS、硫酸銨、丙烯醯胺、N N 甲叉雙丙烯醯胺、甘氨酸、非預染蛋白Marker、甲醇、乙酸、考馬斯亮藍R250）、預染蛋白Marker
耗材：濾紙、膜、乳膠手套等
儀器：電泳儀、電轉槽、搖床、冰浴等
Ⅳ 分子生物學實驗室需要哪些儀器
請教高人：一個最小最小的、只作DNA提取和擴增的分子生物學實驗室需要什麼儀器？？？請列明儀器名稱、推薦型號和大概價格。
如果量很小的話，可以這樣
PCR儀一台 用作擴增
高速離心機一台（可達12000rpm即可）
電泳儀一台
可以跑PAGE和瓊脂糖的槽
紫外觀測儀器 看膠
超凈工作台，接菌用
大搖床 培養菌用
脫色搖床 如果需要染膠的話用
細菌培養箱 細菌生長需要恆溫
水浴鍋或電熱板 很有用，呵呵
然後就是移液器一套3-4支，槍頭1000ul、200ul、20ul若干
最好還有滅菌鍋，槍頭需要滅菌使用才准確。
還有可以-20度的冰箱，保存DNA，一般菌種保存也差不多，有條件可以上-70度冰箱。
電子精密天平 稱葯品，配培養基等
微波爐 用來制膠很方便的。
凝膠成像系統 掃膠用，可以將膠圖保存為圖像文件存檔。
暫時就想這么多，我們實驗室大致就這樣。價錢不清楚，可以找生物公司去要他們的單子，多要幾家的，選擇對比下再買。
祝你成功
Ⅵ 「蛋白質的鑒定」實驗怎麼做
實驗一 生物組織中脂肪,蛋白質的鑒定
一,實驗原理
(1)鑒定實驗設計的理念:
某些化學試劑 + 生物組織中有關有機化合物 產生特定的顏色反應.
(2)具體原理:
1、脂肪小顆粒 + 蘇丹Ⅲ染液→橘黃色小顆粒.
2、蛋白質 + 雙縮脲試劑→紫色反應.
二,目標要求
初步掌握鑒定生物組織中脂肪,蛋白質的基本方法.
三,重點,難點
1.重點
①初步掌握鑒定生物組織中脂肪,蛋白質的基本方法.
②通過實驗的操作和設計培養學生的動手能力,掌握探索實驗設計技巧,從而培養創新思維能力.
2.難點
根據此實驗方法,原理,設計實驗來鑒定常見食物的成分.
四,實驗材料
1.脂肪的鑒定實驗:選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實驗前浸泡3h～4h).
2.蛋白質的鑒定實驗:可用浸泡1d～2d的黃豆種子(或用豆漿,或用雞蛋蛋白).
五,儀器,試劑
1.儀器:剪刀,解剖刀,雙面刀片,試管,試管架,試管夾,大小燒杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精燈,三腳架,石棉網,火柴,研缽,石英砂,紗布,載玻片,蓋玻片,毛筆,吸水紙,顯微鏡.
2.試劑：1蘇丹Ⅲ染液;2雙縮脲試劑;3 體積分數為50%的酒精溶液;4蒸餾水.
六,方法步驟
（1）脂肪的鑒定
脂肪的鑒定步驟:
取材:花生種子(浸泡3-4h),將子葉削成薄片
取理想薄片
在薄片上滴2-3滴蘇丹Ⅲ染液
去浮色
製成臨時裝片
觀察:先在低倍鏡下,找到材料的脂肪滴,然後,轉為高倍鏡觀察.
結論:細胞中的圓形脂肪小顆粒已經被染成橘黃色.
實驗成功的要點:
①.脂肪的鑒定實驗:選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實驗前浸泡3h～4h).
②該試驗成功的關鍵是獲得只含有單層細胞理想薄片.
③滴蘇丹Ⅲ染液染液染色2-3min,時間不宜過長,以防細胞的其他部分被染色.
（2）蛋白質的鑒定
蛋白質的鑒定步驟:
選材:卵清稀釋液或黃豆(浸泡1-2d) 豆漿 濾液
結論:蛋白質與雙縮脲試劑發生紫色反應.
2,實驗成功的要點:
①蛋白質的鑒定實驗:可用浸泡1d～2d的黃豆種子(或用豆漿,或用雞蛋蛋白稀釋液).
②雙縮脲試劑的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入雙縮脲試劑B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液).
③還可設計一隻加底物的試管,不加雙縮脲試劑,進行空白對照,說明顏色反應的引起是蛋白質的存在與雙縮脲試劑發生反應,而不是空氣的氧化引起.
Ⅶ western blot實驗都需要哪些儀器
試劑：tris、Hcl、Nacl、脫脂牛奶、甲醇、甘氨酸、tween
20、抗、二抗、顯色劑及SDS
PAGE需要試劑（tris、Hcl、TEMED、SDS、硫酸銨、丙烯醯胺、N
N
甲叉雙丙烯醯胺、甘氨酸、非預染蛋白Marker、甲醇、乙酸、考馬斯亮藍R250）、預染蛋白Marker
耗材：濾紙、膜、乳膠手套等
儀器：電泳儀、電轉槽、搖床、冰浴等
Ⅷ 蛋白質鑒定實驗
實驗一 生物組織中脂肪,蛋白質的鑒定
一,實驗原理
(1)鑒定實驗設計的理念:
某些化學試劑 + 生物組織中有關有機化合物 產生特定的顏色反應.
(2)具體原理:
1、脂肪小顆粒 + 蘇丹Ⅲ染液→橘黃色小顆粒.
2、蛋白質 + 雙縮脲試劑→紫色反應.
二,目標要求
初步掌握鑒定生物組織中脂肪,蛋白質的基本方法.
三,重點,難點
1.重點
①初步掌握鑒定生物組織中脂肪,蛋白質的基本方法.
②通過實驗的操作和設計培養學生的動手能力,掌握探索實驗設計技巧,從而培養創新思維能力.
2.難點
根據此實驗方法,原理,設計實驗來鑒定常見食物的成分.
四,實驗材料
1.脂肪的鑒定實驗:選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實驗前浸泡3h～4h).
2.蛋白質的鑒定實驗:可用浸泡1d～2d的黃豆種子(或用豆漿,或用雞蛋蛋白).
五,儀器,試劑
1.儀器:剪刀,解剖刀,雙面刀片,試管,試管架,試管夾,大小燒杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精燈,三腳架,石棉網,火柴,研缽,石英砂,紗布,載玻片,蓋玻片,毛筆,吸水紙,顯微鏡.
2.試劑：1蘇丹Ⅲ染液;2雙縮脲試劑;3 體積分數為50%的酒精溶液;4蒸餾水.
六,方法步驟
（1）脂肪的鑒定
脂肪的鑒定步驟:
取材:花生種子(浸泡3-4h),將子葉削成薄...實驗一 生物組織中脂肪,蛋白質的鑒定
一,實驗原理
(1)鑒定實驗設計的理念:
某些化學試劑 + 生物組織中有關有機化合物 產生特定的顏色反應.
(2)具體原理:
1、脂肪小顆粒 + 蘇丹Ⅲ染液→橘黃色小顆粒.
2、蛋白質 + 雙縮脲試劑→紫色反應.
二,目標要求
初步掌握鑒定生物組織中脂肪,蛋白質的基本方法.
三,重點,難點
1.重點
①初步掌握鑒定生物組織中脂肪,蛋白質的基本方法.
②通過實驗的操作和設計培養學生的動手能力,掌握探索實驗設計技巧,從而培養創新思維能力.
2.難點
根據此實驗方法,原理,設計實驗來鑒定常見食物的成分.
四,實驗材料
1.脂肪的鑒定實驗:選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實驗前浸泡3h～4h).
2.蛋白質的鑒定實驗:可用浸泡1d～2d的黃豆種子(或用豆漿,或用雞蛋蛋白).
五,儀器,試劑
1.儀器:剪刀,解剖刀,雙面刀片,試管,試管架,試管夾,大小燒杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,酒精燈,三腳架,石棉網,火柴,研缽,石英砂,紗布,載玻片,蓋玻片,毛筆,吸水紙,顯微鏡.
2.試劑：1蘇丹Ⅲ染液;2雙縮脲試劑;3 體積分數為50%的酒精溶液;4蒸餾水.
六,方法步驟
（1）脂肪的鑒定
脂肪的鑒定步驟:
取材:花生種子(浸泡3-4h),將子葉削成薄片
取理想薄片
在薄片上滴2-3滴蘇丹Ⅲ染液
去浮色
製成臨時裝片
觀察:先在低倍鏡下,找到材料的脂肪滴,然後,轉為高倍鏡觀察.
結論:細胞中的圓形脂肪小顆粒已經被染成橘黃色.
實驗成功的要點:
①.脂肪的鑒定實驗:選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實驗前浸泡3h～4h).
②該試驗成功的關鍵是獲得只含有單層細胞理想薄片.
③滴蘇丹Ⅲ染液染液染色2-3min,時間不宜過長,以防細胞的其他部分被染色.
（2）蛋白質的鑒定
蛋白質的鑒定步驟:
選材:卵清稀釋液或黃豆(浸泡1-2d) 豆漿 濾液
結論:蛋白質與雙縮脲試劑發生紫色反應.
2,實驗成功的要點:
①蛋白質的鑒定實驗:可用浸泡1d～2d的黃豆種子(或用豆漿,或用雞蛋蛋白稀釋液).
②雙縮脲試劑的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入雙縮脲試劑B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液).
③還可設計一隻加底物的試管,不加雙縮脲試劑,進行空白對照,說明顏色反應的引起是蛋白質的存在與雙縮脲試劑發生反應,而不是空氣的氧化引起.
Ⅸ 鑒別蛋白質的方法有哪些
常見的蛋白質鑒定方法有：
一、最簡單的方法就是對所要鑒定的物體進行灼燒
二、使用化學葯劑進行化學反應來鑒定蛋白質
三、較為精準的方法是使用儀器進行蛋白質鑒定，如質譜儀等
在生物學研究中經常會遇到一些關於蛋白質鑒定的問題，如單一蛋白質或者簡單混合物的鑒定；對單一蛋白質的序列分析等。這一類蛋白質鑒定，在精密度上要求較高，所以幾乎都是採用質譜儀器，來對蛋白質進行精密鑒定。
質譜技術是鑒定蛋白質的其中一種平台技術。可用到的質譜儀有Thermo Fisher的Q Exactive質譜儀，LTQ Orbitrap Velos質譜儀，以及AB SCIEX的6500 Q TRAP質譜儀。所在鑒定機構的不同，在硬體品牌的使用上也會有不同。
蛋白質鑒定的流程一般分三大步：蛋白質提取、純化、鑒定。這個流程是一個將蛋白質層層「解剖」的過程，從中我們可以對蛋白分子量進行測定，蛋白膠點、膠條、IP樣品蛋白質進行鑒定，非變性質譜分析以及Pull-down靶蛋白質譜鑒定等，較為細致的去分析蛋白質中的各種物質、性質等。