加入顯色劑用什麼儀器測量

『壹』 儀器測量條件的選擇

儀器測量條件的選擇包括測量波長的選擇，適宜吸光度范圍的選擇及儀器狹縫寬度的選擇。

4.3.2.1 測量波長的選擇

通常都是選擇最強吸收帶的最大吸收波長λ_max作為測量波長，亦稱為最大吸收原則，以獲得最高的分析靈敏度，而且在λ_max附近，吸光度隨波長的變化一般較小，因波長的稍許偏移而引起吸光度的測量偏差較小，可得到較好的測定精密度。但在測量高濃度組分時，寧可選用靈敏度低一些的吸收峰波長(ε較小)作為測量波長，以保證校正曲線有足夠的線性范圍。如果λ_max所處吸收峰太尖銳，則在滿足分析靈敏度的前提下，可選用靈敏度低一些的波長進行測量，以減少比耳定律的偏差。

4.3.2.2 適宜吸光度范圍的選擇

任何光度計都有一定的測量誤差，這是由於測量過程中光源的不穩定、讀數的不準確或實驗條件的偶然變動等因素造成的。由於吸收定律中透光率T與濃度c為負對數關系，從負對數的關系曲線可以看出，相同的透光率讀數誤差在不同的濃度范圍中引起的濃度相對誤差不同，當濃度較大或濃度較小時，相對誤差都比較大。因此，要選擇適宜的吸光度范圍進行測量，以降低測定結果的相對誤差。

當吸光度A=0.434時，儀器的測量誤差最小；當A增大或減小時，誤差都會變大。在分析中，一般選擇A的測量范圍為0.2～0.8(T為65%～15%)，此時如果儀器的透光率讀數誤差(ΔT)為1%時，由此引起的測定結果相對誤差(Δc/c)約為3%。

在實際工作中，可通過調節待測溶液的濃度或選用適當厚度的吸收池的方法，使測得的吸光度符合要求。

4.3.2.3 儀器狹縫寬度的選擇

狹縫的寬度會直接影響測定的靈敏度和校準曲線的線性范圍。狹縫寬度過大，入射光的單色性降低，校準曲線偏離比耳定律，靈敏度降低；狹縫寬度過窄，光強變弱，勢必要提高儀器的增益，隨之造成儀器雜訊增大，於測量不利。選擇狹縫寬度的方法是測量吸光度隨狹縫寬度的變化，狹縫的寬度在一定范圍內，吸光度是不變的，當狹縫寬度增大到某一程度時，吸光度開始減小，因此在不減小吸光度時的最大狹縫寬度，即是所要選取的合適的狹縫寬度。

4.3.2.4 顯色反應條件的選擇

顯色反應條件的選擇包括顯色劑及其用量、反應的酸度和溫度、顯色的時間等條件的選擇。

(1)顯色劑及其用量

顯色反應中，顯色劑與待測離子發生顯色反應時，產物組成恆定、穩定性好、顯色條件易於控制；產物對紫外、可見光有較強的吸收能力，即ε大；顯色劑與產物的顏色對照性好，即吸收波長有明顯的差別，一般要求Δλ_max﹥60nm。表4.2列出了幾種常見的顯色劑。

而使顏色變淺，ε降低;而用CNS^-測定Fe(Ⅲ)時，隨CNS^-濃度增大，配位數逐漸增加，顏色也逐漸加深。因此，必須嚴格控制CNS^-的用量，才能獲得准確的分析結果。顯色劑用量可通過實驗選擇，在固定金屬離子濃度的情況下，作吸光度隨顯色劑濃度的變化曲線，選取吸光度恆定時的顯色劑用量。

(2)反應的酸度

介質的酸度往往是顯色反應的一個重要條件，酸度的影響因素很多，主要從顯色劑及金屬離子兩方面進行考慮。

多數顯色劑是有機弱酸(或弱鹼)，介質的酸度直接影響著顯色劑的離解程度，從而影響顯色反應的完全程度。當酸度高時，顯色劑離解度降低，顯色劑可配位的陰離子濃度降低，顯色反應的完全程度也跟著降低。對於多級配合物的顯色反應來說，酸度變化可形成具有不同配位比的配合物，產生顏色的變化。在高酸度時多生成低配位數的配合物，可能沒有達到金屬離子的最大配位數；而在低酸度(pH高)時，游離的配體陰離子濃度相應變大，則可能生成高配位數的配合物。

不少金屬離子在酸度較低的介質中，會發生水解而形成各種羥基、多核羥基配合物，有的甚至可能析出氫氧化物沉澱，或者由於生成金屬離子的氫氧化物而破壞有色配合物，使溶液的顏色完全褪去。

在實際分析工作中，要通過實驗來選擇顯色反應的適宜酸度，即固定溶液中待測組分和顯色劑的濃度，通過改變溶液(通常用緩沖溶液控制)的酸度，分別測定在不同酸度下溶液的吸光度A，繪制A-pH曲線，以此選定最適宜的pH范圍。

(3)顯色的時間

由於各種顯色反應的速度不同，控制一定的顯色時間是必要的，尤其是對一些反應速度較慢的反應體系，更需要有足夠的反應時間。值得注意的是，介質酸度、顯色劑的濃度都將會影響顯色的時間。

(4)反應的溫度

吸光度的測量是在室溫下進行的，溫度變化較小時對測量影響不大，但有些顯色反應受溫度影響較大，需要進行反應溫度的選擇和控制，特別是進行熱力學參數的測定、動力學方面的研究等特殊工作時，反應溫度的控制尤為重要。

此外，由於配合物的穩定時間不同，顯色後放置時間及測量時間的影響也不容忽視，需經實驗選擇合適的放置及測量的時間。

4.3.2.5 參比溶液的選擇

測量試樣溶液的吸光度時，首先要用參比溶液調節透光率為100%，以消除溶液中其他成分以及吸收池和溶劑對光的反射和吸收所帶來的誤差。根據試樣溶液的性質，選擇合適組分的參比溶液是很重要的。

(1)溶劑參比

如試樣溶液的組成較為簡單，共存的其他組分很少，且對測定波長的光幾乎沒有吸收，對顯色劑也沒有吸收時，可採用溶劑作為參比溶液，這樣可消除溶劑、吸收池等因素的影響。

(2)試劑參比

如果顯色劑或其他試劑在測定波長有吸收，按顯色反應相同的條件，只是不加入試樣溶液，同樣加入試劑和溶劑作為參比溶液。這種參比溶液可消除試劑中的組分產生吸收的影響。

(3)試樣參比

如果試樣基體(除被測組分外的其他共存組分)在測定波長處有吸收，而與顯色劑不起顯色反應時，可按與顯色反應相同的條件處理試樣，只是不加顯色劑，作為參比溶液。這種參比溶液適用於試樣中有較多的共存組分，加入的顯色劑較少，且顯色劑在測定波長無吸收的情況。

(4)平行操作溶液參比

用不含被測組分的試樣，在相同條件下與被測試樣進行同樣處理，由此得到平行操作參比溶液。

4.3.2.6 干擾及消除方法

在光度分析中，體系內存在的干擾物質的影響有以下幾種情況：干擾物質本身有顏色或與顯色劑形成有色化合物，在測定條件下也有吸收；在顯色條件下，干擾物質水解，析出沉澱使溶液混濁，致使吸光度的測定無法進行；與待測離子或顯色劑形成更穩定的配合物，使顯色反應不能進行完全。一般可以採用以下幾種方法來消除這些干擾。

(1)控制酸度

根據配合物的穩定性不同，可以利用控制酸度的方法提高反應的選擇性，以保證主反應進行完全。例如，雙硫腙能與Hg²⁺、Pb²⁺、Cu²⁺、Ni²⁺、Cd²⁺等十多種金屬離子形成有色配合物，其中與Hg²⁺生成的配合物最穩定，在0.5mol·L^-1H₂SO₄介質中仍能定量進行，而上述其他離子在此條件下不發生反應。

(2)選擇適當的掩蔽劑

使用掩蔽劑消除干擾是常用的有效方法。選取的條件是掩蔽劑不與待測離子發生作用，掩蔽劑以及其與干擾物質形成配合物的顏色應不幹擾待測離子的測定。

(3)利用生成的惰性配合物

例如鋼鐵中微量鈷的測定，常用鈷試劑為顯色劑，但鈷試劑不僅與Co²⁺有靈敏的反應，而且與Ni²⁺、Zn²⁺、Mn²⁺、Fe²⁺等都有反應。當鈷試劑與Co²⁺在弱酸性介質中一旦完成反應後，即使再用強酸酸化溶液，該配合物也不會分解，而 Ni²⁺、Zn²⁺、Mn²⁺、Fe²⁺等與鈷試劑形成的配合物在強酸介質中會很快分解，從而消除了上述離子的干擾，提高了反應的選擇性。

(4)選擇適當的測量波長

如有K₂Cr₂O₇存在時測定KMnO₄，不選擇λ_max=525nm，而是選擇λ=545nm處測定。溶液的吸光度，K₂Cr₂O₇的干擾即可消除。

(5)分離

若上述方法不易採用時，也可以採用預先分離的方法，如沉澱、萃取、離子交換、蒸發和蒸餾以及色譜分離法(包括柱色譜、紙色譜、薄層色譜等)。

此外，還可以利用化學計量學方法實現多組分同時測定，以及利用導數光譜法、雙波長法等新技術來消除干擾。

『貳』 檢測重金屬離子的技術，儀器有哪些

常規的方法有原子吸收光譜、原子發射光譜等，但是只能測ppm級別的，而飛秒檢測方法則可以精確測定ppb及更低濃度的金屬離子。
從環境污染方面所說的重金屬，實際上主要是指汞、鎘、鉛、鉻、砷等金屬或類金屬，也指具有一定毒性的一般重金屬，如銅、鋅、鎳、鈷、錫等。我們從自然性、毒性、活性和持久性、生物可分解性、生物累積性，對生物體作用的加和性等幾個方面對重金屬的危害稍作論述。
通常認可的重金屬分析方法有：紫外可分光光度法（UV）、原子吸收法（AAS）、原子熒光法（AFS）、電感耦合等離子體法（ICP）、X熒光光譜（XRF）、電感耦合等離子質譜法（ICP-MS）。除上述方法外，更引入光譜法來進行檢測，精密度更高，更為准確！
日本和歐盟國家有的採用電感耦合等離子質譜法（ICP-MS）分析，但對國內用戶而言，儀器成本高。也有的採用X熒光光譜（XRF）分析，優點是無損檢測，可直接分析成品，但檢測精度和重復性不如光譜法。最新流行的檢測方法--陽極溶出法，檢測速度快，數值准確，可用於現場等環境應急檢測。
（一）原子吸收光譜法（AAS）
原子吸收光譜法是20世紀50年代創立的一種新型儀器分析方法，它與主要用於無機元素定性分析的原子發射光譜法相輔相成，已成為對無機化合物進行元素定量分析的主要手段。
原子吸收分析過程如下：1、將樣品製成溶液（同時做空白）；2、制備一系列已知濃度的分析元素的校正溶液（標樣）；3、依次測出空白及標樣的相應值；4、依據上述相應值繪出校正曲線；5、測出未知樣品的相應值；6、依據校正曲線及未知樣品的相應值得出樣品的濃度值。
現在由於計算機技術、化學計量學的發展和多種新型元器件的出現，使原子吸收光譜儀的精密度、准確度和自動化程度大大提高。用微處理機控制的原子吸收光譜儀，簡化了操作程序，節約了分析時間。現在已研製出氣相色譜—原子吸收光譜（GC-AAS）的聯用儀器，進一步拓展了原子吸收光譜法的應用領域。
（二）紫外可見分光光度法（UV）
其檢測原理是：重金屬與顯色劑—通常為有機化合物，可於重金屬發生絡合反應，生成有色分子團，溶液顏色深淺與濃度成正比。在特定波長下，比色檢測。
分光光度分析有兩種，一種是利用物質本身對紫外及可見光的吸收進行測定；另一種是生成有色化合物，即「顯色」，然後測定。雖然不少無機離子在紫外和可見光區有吸收，但因一般強度較弱，所以直接用於定量分析的較少。加入顯色劑使待測物質轉化為在紫外和可見光區有吸收的化合物來進行光度測定，這是目前應用最廣泛的測試手段。顯色劑分為無機顯色劑和有機顯色劑，而以有機顯色劑使用較多。大多當數有機顯色劑本身為有色化合物，與金屬離子反應生成的化合物一般是穩定的螯合物。顯色反應的選擇性和靈敏度都較高。有些有色螯合物易溶於有機溶劑，可進行萃取浸提後比色檢測。近年來形成多元配合物的顯色體系受到關注。多元配合物的指三個或三個以上組分形成的配合物。利用多元配合物的形成可提高分光光度測定的靈敏度，改善分析特性。顯色劑在前處理萃取和檢測比色方面的選擇和使用是近年來分光光度法的重要研究課題。
（三）原子熒光法（AFS）
原子熒光光譜法是通過測量待測元素的原子蒸氣在特定頻率輻射能激以下所產生的熒光發射強度，以此來測定待測元素含量的方法。
原子熒光光譜法雖是一種發射光譜法，但它和原子吸收光譜法密切相關，兼有原子發射和原子吸收兩種分析方法的優點，又克服了兩種方法的不足。原子熒光光譜具有發射譜線簡單，靈敏度高於原子吸收光譜法，線性范圍較寬干擾少的特點，能夠進行多元素同時測定。原子熒光光譜儀可用於分析汞、砷、銻、鉍、硒、碲、鉛、錫、鍺、鎘鋅等11種元素。現已廣泛用環境監測、醫葯、地質、農業、飲用水等領域。在國標中，食品中砷、汞等元素的測定標准中已將原子熒光光譜法定為第一法。
氣態自由原子吸收特徵波長輻射後，原子的外層電子從基態或低能態會躍遷到高能態，同時發射出與原激發波長相同或不同的能量輻射，即原子熒光。原子熒光的發射強度If與原子化器中單位體積中該元素的基態原子數N成正比。當原子化效率和熒光量子效率固定時，原子熒光強度與試樣濃度成正比。
現已研製出可對多元素同時測定的原子熒光光譜儀，它以多個高強度空心陰極燈為光源，以具有很高溫度的電感耦合等離子體（ICP）作為原子化器，可使多種元素同時實現原子化。多元素分析系統以ICP原子化器為中心，在周圍安裝多個檢測單元，與空心陰極燈一一成直角對應，產生的熒光用光電倍增管檢測。光電轉換後的電信號經放大後，由計算機處理就獲得各元素分析結果。
（四）電化學法—陽極溶出伏安法
電化學法是近年來發展較快的一種方法，它以經典極譜法為依託，在此基礎上又衍生出示波極譜、陽極溶出伏安法等方法。電化學法的檢測限較低，測試靈敏度較高，值得推廣應用。如國標中鉛的測定方法中的第五法和鉻的測定方法的第二法均為示波極譜法。
陽極溶出伏安法是將恆電位電解富集與伏安法測定相結合的一種電化學分析方法。這種方法一次可連續測定多種金屬離子，而且靈敏度很高，能測定10-7-10-9mol/L的金屬離子。此法所用儀器比較簡單，操作方便，是一種很好的痕量分析手段。我國已經頒布了適用於化學試劑中金屬雜質測定的陽極溶出伏安法國家標准。
陽極溶出伏安法測定分兩個步驟。第一步為「電析」，即在一個恆電位下，將被測離子電解沉積，富集在工作電極上與電極上汞生成汞齊。對給定的金屬離子來說，如果攪拌速度恆定，預電解時間固定，則m=Kc，即電積的金屬量與被測金屬離了的濃度成正比。第二步為「溶出」，即在富集結束後，一般靜止30s或60s後，在工作電極上施加一個反向電壓，由負向正掃描，將汞齊中金屬重新氧化為離子回歸溶液中，產生氧化電流，記錄電壓-電流曲線，即伏安曲線。曲線呈峰形，峰值電流與溶液中被測離了的濃度成正比，可作為定量分析的依據，峰值電位可作為定性分析的依據。
示波極譜法又稱「單掃描極譜分析法」。一種極譜分析新力一法。它是一種快速加入電解電壓的極譜法。常在滴汞電極每一汞滴成長後期，在電解池的兩極上，迅速加入一鋸齒形脈沖電壓，在幾秒鍾內得出一次極譜圖，為了快速記錄極譜圖，通常用示波管的熒光屏作顯示工具，因此稱為示波極譜法。其優點：快速、靈敏。
（五）X射線熒光光譜法（XRF）
X射線熒光光譜法是利用樣品對x射線的吸收隨樣品中的成分及其多少變化而變化來定性或定量測定樣品中成分的一種方法。它具有分析迅速、樣品前處理簡單、可分析元素范圍廣、譜線簡單，光譜干擾少，試樣形態多樣性及測定時的非破壞性等特點。它不僅用於常量元素的定性和定量分析，而且也可進行微量元素的測定，其檢出限多數可達10-6。與分離、富集等手段相結合，可達10-8。測量的元素范圍包括周期表中從F-U的所有元素。多道分析儀，在幾分鍾之內可同時測定20多種元素的含量。
x射線熒光法不僅可以分析塊狀樣品，還可對多層鍍膜的各層鍍膜分別進行成分和膜厚的分析。
當試樣受到x射線，高能粒子束，紫外光等照射時，由於高能粒子或光子與試樣原子碰撞，將原子內層電子逐出形成空穴，使原子處於激發態，這種激發態離子壽命很短，當外層電子向內層空穴躍遷時，多餘的能量即以x射線的形式放出，並在教外層產生新的空穴和產生新的x射線發射，這樣便產生一系列的特徵x射線。特徵x射線是各種元素固有的，它與元素的原子系數有關。所以只要測出了特徵x射線的波長λ，就可以求出產生該波長的元素。即可做定性分析。在樣品組成均勻，表面光滑平整，元素間無相互激發的條件下，當用x射線（一次x射線）做激發原照射試樣，使試樣中元素產生特徵x射線（熒光x射線）時，若元素和實驗條件一樣，熒光x射線強度與分析元素含量之間存在線性關系。根據譜線的強度可以進行定量分析
（六）電感耦合等離子體質譜法（ICP-MS）
ICP-MS的檢出限給人極深刻的印象，其溶液的檢出限大部份為ppt級，實際的檢出限不可能優於你實驗室的清潔條件。必須指出，ICP-MS的ppt級檢出限是針對溶液中溶解物質很少的單純溶液而言的，若涉及固體中濃度的檢出限，由於ICP-MS的耐鹽量較差，ICP-MS檢出限的優點會變差多達50倍，一些普通的輕元素（如S、
Ca、Fe 、K、 Se）在ICP-MS中有嚴重的干擾，也將惡化其檢出限。
ICP-MS由作為離子源ICP焰炬，介面裝置和作為檢測器的質譜儀三部分組成。
ICP-MS所用電離源是感應耦合等離子體（ICP），其主體是一個由三層石英套管組成的炬管，炬管上端繞有負載線圈，三層管從里到外分別通載氣，輔助氣和冷卻氣，負載線圈由高頻電源耦合供電，產生垂直於線圈平面的磁場。如果通過高頻裝置使氬氣電離，則氬離子和電子在電磁場作用下又會與其它氬原子碰撞產生更多的離子和電子，形成渦流。強大的電流產生高溫，瞬間使氬氣形成溫度可達10000k的等離子焰炬。被分析樣品通常以水溶液的氣溶膠形式引入氬氣流中，然後進入由射頻能量激發的處於大氣壓下的氬等離子體中心區，等離子體的高溫使樣品去溶劑化，汽化解離和電離。部分等離子體經過不同的壓力區進入真空系統，在真空系統內，正離子被拉出並按照其質荷比分離。在負載線圈上面約10mm處,焰炬溫度大約為8000K,在這么高的溫度下,電離能低於7eV的元素完全電離，電離能低於10.5ev的元素電離度大於20%。由於大部分重要的元素電離能都低於10.5eV，因此都有很高的靈敏度，少數電離能較高的元素，如C，O，Cl，Br等也能檢測，只是靈敏度較低。
（七）飛秒檢測方法
飛秒檢測主要利用飛秒激光研究各種化學過程和物質組成，包括化學鍵斷裂，新鍵形成，質子傳遞和電子轉移，化合物異構化，分子解離，反應中間產物及最終產物的速度、角度和態分布，溶液中的化學反應以及溶劑的作用，分子中的振動和轉動對化學反應的影響等。飛秒檢測為當今先進的檢測技術，通過觀測分子、原子、電子、原子核、官能團等粒子飛秒級（一千萬億分之一秒，即10-15s）的振動、能級躍遷，可以很方便的判斷物質組成和含量。飛秒檢測技術可以用於未知物分析、配方分析還原、工業診斷、衛星遙感、超級計算、痕量檢測分析等方面。

『叄』 請問如何用分光光度計測定溶液的成分

722型分光光度計的使用方法

一、 測量原理

分光光度法測量的理論依據是伯郎—比耳定律：當容液中的物質在光的照射和激發下，產生了對光吸收的效應。但物質對光的吸收是有選擇性的，各種不同的物質都有其各自的吸收光譜。所以根據定律當一束單色光通過一定濃度范圍的稀有色溶液時，溶液對光的吸收程度A與溶液的濃度c（g/l）或液層厚度b(cm)成正比。其定律表達式A=abc

（a是比例系數）。當c的單位為mol/l時，比例系數用ε表示，則A=εbc稱為摩爾吸光系數。其單位為L·mol-1·cm-1它是有色物質在一定波長下的特徵常數。

T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT 或 A=K·C·L(比色皿的厚度)
測定時，入射光I,
吸光系數和溶液的光徑長度不變時，透過光是根據溶液的濃度而變化的，即「K」為常數。比色皿厚度一定，「L」、「I0」也一定。只要測出A即可算出「C」。
《分光光度計的表頭上，一行是透光率，一行是吸光度。》
二、 722型分光光度計的使用
1、將靈敏度旋鈕調至「1」檔（信號放大倍率最小）。
2、開啟電源，指示燈亮 ，選擇開關置於「T」，波長調至到測試用波長。儀器預熱20分鍾。
3、打開試樣室（光門自動關閉），調節透光率零點旋鈕，使數字顯示為000.0。（調節100%T旋鈕），蓋上試樣室蓋，將比色皿
架處於蒸餾水校正位置，使光電管受光，調節透光率100%旋鈕使數字顯示100.0。如顯示不到100.0，則可適當增加微電流放大的倍數。（增加靈敏度
的檔數同時應重復（3）調節儀器透光率的「0」位）但盡量使倍率置於低檔使用。這樣儀器會有更高的穩定性。
4、預熱後，按（3）連續幾次調整透光率的「0」位和「100%」的位置，待穩定後儀器可進行測定工作。
三、 吸光度「A」的測量
將選擇開關置於A 。調節吸光度調零旋鈕，使得數字顯示為零，然後將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度值。
四、 濃度c的測量
將選擇開關由「A」旋至「C」將已標定濃度的樣品放入光路，調節濃度旋鈕，使得數字顯示為標定值，將被測樣品放入光路即可讀出被測樣品的濃度值。
注意事項：
1、測量完畢，速將暗盒蓋打開，關閉電源開關，將靈敏度旋鈕調至最低檔，取出比色皿，將裝有硅膠的乾燥劑袋放入暗盒內，關上蓋子，將比色皿中的溶液倒入燒杯中，用蒸餾水洗凈後放回比色皿盒內。
2、每台儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表面皿單個調換。
http://www.ccep.cn/Article/measure/200604/1240.html

使用方法

（1）預熱儀器 將選擇開關置於「T」，打開電源開關，使儀器預熱20分鍾。為了防止光電管疲勞，不要連續光照，預熱儀器時和不測定時應將試樣室蓋打開，使光路切斷。

（2）選定波長 根據實驗要求，轉動波長手輪，調至所需要的單色波長。

（3）固定靈敏度檔 在能使空白溶液很好地調到「100%」的情況下，盡可能採用靈敏度較低的擋，使用時，首先調到「1」擋，靈敏度不夠時再逐漸升高。但換擋改變靈敏度後，須重新校正「0%」和「100%」。選好的靈敏度，實驗過程中不要再變動。

（4）調節T=0% 輕輕旋動「0%」旋鈕，使數字顯示為「00.0」，（此時試樣室是打開的）。

（5）調節T=100% 將盛蒸餾水（或空白溶液，或純溶劑）的比色皿放入比色皿座架中的第一格內，並對准光路，把試樣室蓋子輕輕蓋上，調節透過率「100%」旋鈕，使數字顯示正好為「100.0」。

（6）吸光度的測定 將選擇開關置於「A」，蓋上試樣室蓋子，將空白液置於光路中，調節吸光度調節旋鈕，使數字顯示為「.000」。將盛有待測溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它格內，蓋上試樣室蓋，輕輕拉動試樣架拉手，使待測溶液進入光路，此時數字顯示值即為該待測溶液的吸光度值。讀數後，打開試樣室蓋，切斷光路。

重復上述測定操作1-2次，讀取相應的吸光度值，取平均值。

（7）濃度的測定 選擇開關由「A」旋置「C」，將已標定濃度的樣品放入光路，調節濃度旋鈕，使得數字顯示為標定值，將被測樣品放入光路，此時數字顯示值即為該待測溶液的濃度值。

（8）關機 實驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，並將比色皿座架用軟紙擦凈。

http://web2.fimmu.com/hxsyzx/shiyanjiaoc/jmyq/04.htm

『肆』 怎麼用酶標儀測ELASIA

作為微孔板比色計的酶標儀，其基本功能不外乎一個比色測定，所不同的是在測定波長范圍、吸光度范圍、光學系統、檢測速度、震板功能、溫度控制、定性和定量測定軟體功能等方面的差異，當然全自動酶免疫分析系統還具有自動洗板、溫育、加樣等功能。在臨床實驗室實際工作中，實驗人員在使用酶標儀進行測定操作時，有時難免會對酶標儀的一些性能指標產生迷惑，甚至對酶標儀的應用產生錯誤的理解。如諸如使用酶標儀較用肉眼觀察測定的陽性率明顯增加這樣的問題。 一、測定波長 一般酶標儀的測定波長在400～750nm或800nm之間，完全可以滿足ELISA的顯色測定。目前國內常見的ELISA試劑盒所使用的標記用酶均為辣根過氧化物酶（HRP），底物通常為四甲基聯苯胺（TMB）和鄰苯二胺（OPD），其在過氧化氫溶液的存在下，經HRP作用，分別氧化為2，2，-二氨基偶氮苯（DAB）和聯苯醌。當pH值為5．0左右時，DAB在450nm波長處有最大吸收，當pH值降為L 0時，最大吸收波長移至492 nm，同時摩爾消光系數變大，顯色加深，因而常用強酸如硫酸或鹽酸終止反應。TMB的氧化產物聯苯醌在波長450nm處有最大消光系數，如果HRP量少，H：O：和TMB過量時，則形成藍色的陽離子根。降低pH，即可使藍色的陽離子根轉變為黃色的聯苯醌，使用硫酸作為終止劑可使產物穩定90min。因此，450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定最常用的。各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉換的部件，可以同時安裝6～8片濾光片，所配備的濾光片均應包括上述兩個波長，有的酶標儀以490nm濾光片替代492nm濾光片，影響不大。除了這兩個基本濾光片外，考慮到雙波長比色的需要，還應有620nm或630nm或650nm和405nm波長的濾光片，其他濾光片可根據自己的需要選擇。有時，有的實驗室希望用酶標儀作微量生化測定，故酶標儀生產廠家對其生產的酶標儀擴展了紫外檢測功能，此時需要一個340 nm波長濾光片。此時，酶標儀的測定波長范圍就成為340-750nm或800nm。 酶標儀有單波長和雙波長檢測功能有時使用者不知在什麼情況下使用單或雙波長檢測。所謂的"單波長"就是使用一種對顯色具最大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定；而"雙波長"則除了用對顯色具最大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定外，同時用對特異顯色不敏感的波長如630 nm進行測定，酶標儀最後列印出來的吸光度則為二者之差。630 nm波長下得到的吸光度是非特異的，來自於板孑L上諸如指紋、灰塵、臟物等所致的吸收。因此，在ELISA比色測定中，最好使用雙波長，且不必設空白孔。 二、測定的吸光度范圍 通常，酶標儀的吸光度測定范圍在。一2．5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標儀可測定的吸光度一般在。一2．5之間，但現在基本上都做了拓寬，可達到3．5以上，並且能保持很好的精密度與線性。因此，對於酶標儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍，主要要看在一定的吸光度范圍內的線性和精密度如何。 三、光學系統 酶標儀的光學系統採用的是垂直光路多通道（通常為8或12通道，亦有單通道）檢測，一般為硅光管或光導纖維，除測定通道外，有的酶標儀還有一個參比通道，每次測定可進行自我校準。酶標儀的光學系統功能如何，均可通過酶標儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和准確度等體現出來。光學系統好的話，則上述指標也應較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關系。單通道可避免因通道不同所致的差異。 四、檢測速度 酶標儀的檢測速度是指其完成比色測定所需要的時間。檢測速度快，有利於提高檢測的精密度，即避免由於測定過程中，因測定時間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。目前市場上常見的酶標儀檢測速度都非常快，通常在數秒鍾內。

『伍』 三年級科學上冊可測量液體的體積工具是多少是什麼工具

對液體體積的測量可以用量筒、量杯等容器測量，使用的單位為毫升。
量筒是用來量取液體的一種玻璃儀器。量筒是量度液體體積的儀器。規格以所能量度的最大容量（mL）表示，常用的有10 mL、25mL、50 mL、100 mL、250 mL、500 mL、1000 mL等。外壁刻度都是以 mL為單位，10 mL量筒每小格表示0.2 mL，而50 mL量筒每小格表示1mL。可見量筒越大，管徑越粗，其精確度越小，由視線的偏差所造成的讀數誤差也越大。所以，實驗中應根據所取溶液的體積，盡量選用能一次量取的最小規格的量筒。分次量取也能引起誤差。如量取70ml液體，應選用 100mL量筒。
常規用途
用來測液體體積的容器還有刻度吸管、移液管和滴管，前兩者都比量筒的准確性高。但一隻移液管一次只能量取固定量的溶液，刻度吸管可以量取需要的刻度量，而滴管使用上比較繁瑣，也相對准確度差，一般用於粗略移取，如顯色劑、緩沖液等。
特殊用途
1量取固體體積：先在量筒中取一定量的水，並記錄初始讀數，再向量筒中加入固體物質，再記錄末了讀數，其體積差即為固體的體積。  2. 量取氣體體積：進入量筒中液體的體積即近似為生成的氣體的體積。
注意事項
1.不能作反應容器
2.不能加熱
我們洗完東西，都喜歡放烘箱烘乾，但是量筒是玻璃器皿，加熱會使之變形，從而影響其准確度。尤其是反復長期加熱、高溫加熱。
3.不能稀釋濃酸、濃鹼
尤其是腐蝕性的液體。此外雖然玻璃是種惰性材料，但是也不是沒有一點活性。某些強酸強鹼，尤其是強鹼仍然會腐蝕它。因此長期存儲或者長期使用過的量筒也是不準確的。
4.不能儲存葯劑
量筒是個量器，不是容器，不適合存儲液體。
5.不能量取熱溶液
如果量過熱或過冷的液體，都不準確。
6.不能用去污粉清洗以免刮花刻度
量筒都是不允許刷洗的，因為刷洗會磨損量筒內壁，造成量筒的內容體積變化，從而影響量筒的准確度。但是多幾個實驗室的量筒沒有被刷過。
7 不用潤洗
有時候我們倒完之後，發現量筒內有很多掛壁，覺得倒的量不夠，在用溶劑或者其他手段去反復潤洗。其實這也是不對的，因為量筒的設計之初就考慮到了量筒的掛壁，這部分體積是被考慮進去的，倒出去的體積就是我們需要的體積。

『陸』 現在國內檢測蛋白質用什麼方法涉及到哪些化學儀器

目前食品中蛋白質的測定方法有蛋白質自動分析儀，近紅外自動測定儀，紫外分光光度法以及凱氏定氮法等。本文採用納氏試劑作為顯色劑測定食品中蛋白質含量，適用范圍廣，可用於各類食品及保健食品的檢測。用本法對標准品、質控樣品進行測定獲得滿意結果，對批量樣品的快速測定更具有實用性。現將結果報告如下。

材料與方法

儀器與試劑 WFZ800-D3型紫外分光光度計(北京第二光學儀器廠)。分析純硫酸、硫酸銅、硫酸鉀。(1)納氏試劑：稱取碘化汞100g及碘化鉀70g，溶於少量無氨蒸餾水中，將此溶液緩緩傾入己冷卻的32%氫氧化鈉溶液500ml中，並不停攪拌，再用蒸餾水稀釋至1L，貯於棕色瓶中，用橡皮塞塞緊，避光保存。(2)硫酸銨標准儲備溶液(1.0g/L)：精確稱取經硫酸乾燥的硫酸銨0.4720g，加水溶解後移入100mL容量瓶中，並稀釋至刻度，混均此液每毫升相當於1.0mgNH3-N(10℃下冰箱內儲存穩定1年以上)。(3)硫酸銨標准使用溶液(0.01g/L)：用移液管精密吸取1.0ml標准儲備液(1.0g/L)於100ml容量瓶內，加水稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升相當於10.0μg NH3-N。

方法

標准曲線繪制 取25ml比色管7支，分別准確吸取0.01g/L硫酸銨標准使用液0.00，0.5，1.0，3.0，5.0，7.0，10.0ml(相當於標准0.0，5.0，10.0，30.0，50.0，70.0，100.0μg)，加水至10ml刻度，於標准系列管中各加2ml納氏試劑，混勻後放置10min，移入1cm比色皿內，以零管為參比，於波長420mm處測量吸光度，以標准管含量為橫坐標(μg),對應的吸光度(A)值為縱坐標繪制標准曲線。

樣品測定 選擇牛奶和奶粉為檢測樣品。精密稱取樣品0.1～2.0g置於250ml三角瓶中，加入0.2gCuSO4、1.0gK2SO4、硫酸10ml，先小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫停止後，加大火力至液體呈藍色，使H2SO4剩餘量約為3ml左右為止，室溫放冷後，沿瓶壁慢慢加入10ml水，移入100ml容量瓶中，用少量蒸鎦水洗三角瓶3次，洗液全部並入容量瓶中，冷卻，加蒸餾水至刻度，混勻。測定時取0.5ml，加水至10ml刻度，以後操作同標准曲線。同時做空白試驗。

計算公式

X=c×Fm×V2V1×1000×1000×1000

式中：X-試樣中蛋白質含量(g/100g或g/100ml)

C-試樣測定液中扣除空白後氮的含量(μg)

V1-試樣消化液定容體積(ml)

V2-測定用消化液體積(ml)

m-樣品質量(g)或體積(ml)

F-氮換算為蛋白質的系數。

蛋白質的氮含量一般為15%～17.6%，按16%計算乘以6.25即為蛋白質，乳製品為6.38，麵粉為5.7，肉及肉製品為6.25，大豆為5.71。

結果

2.1 測定波長選擇 含氮量為30μg的標准管在顯色後，在波長400～440mm范圍內每間隔5nm進行測定，最大吸收波長為420mm。

顯色劑用量選擇 含氮量為30μg的標准管分別加入不同量的納氏試劑，在420mm的波長下分別測定其吸光度結果。納氏試劑顯色劑加入量為1.5～3.0ml時吸光度基本無變化，本法選擇加入納氏試劑2.0ml。

顯色時間及穩定性 含氮量為30μg的標准管經顯色後，分別在10，30min，1，2，4，8h進行測定。顯色後10min～8h內吸光度穩定無變化。本法選顯色10min後測定。

標准曲線 回歸方程：y=0.016X-1.5×10-3，r=0.9998，最佳線性范圍0.0～100μg。

精密度 牛乳和奶粉2種樣品分別取6份按本法重復測定6次，牛乳和奶粉精密度測定結果：平均數分別為3.06，23.50；標准差分別為±0.029，±0.073；相對標准偏差分別為0.31%，0.94%。

對2種樣品利用標准加入法作回收試驗(表1) 結果可見，回收率為95.50%～99.44%。

2種方法測定結果比較 分別用GB/T5009.5-2003凱氏定氮法與本法測定。結果顯示，2種分析方法的測定結果差異無統計學意義(t=0.026，P>0.05)。

測定標准物質 用本法測定4種不同的蛋白質標准物質，測定結果與標准物質含量一致。

以納氏試劑作為顯色劑快速測定食品中蛋白質的方法特點簡單、快速，適用於批量樣品測定。在鹼性條件下NH3-N與納氏試劑反應生成的黃色化合物穩定。本法與國標凱氏定氮法進行比較t=0.026,P<0.05，n=32，2種方法測定結果無明顯差異。測定范圍廣，線性范圍寬0.0～100.0μg；精密度高；相對標准偏差為0.31%～0.94%；回收率好，加標回標率為95.50%～99.44%。用本法測定標准物質結果一致，用於質量控制樣本測定結果滿意。本法儀器試劑簡單，易於基層普及，有利於推廣應用。

『柒』 用分光光度法測量水溶液中鉬酸根離子含量時要加入什麼顯色劑用量又是多少

答：
【】鉬酸根離子沒有顏色，必須加入「顯色劑」，使其產物有顏色，同時符合定量依據才可以再去測定器含量；
【】顯色劑用量，可以通過做器條件實驗，就可以有效確定。

『捌』 顏色使用儀器測量好還是目視判斷

指標准目視檢測
標准：水質氟化物測定茜素磺酸鋯目視比色HJ 487-2009 、濁度測量目視比濁、水質—顏色測定—目視等等
：用目視比色標准系列種使用套由同種材料制形狀相同平底玻璃管 ( 稱比色管 ) 於管別加入系列同量標准溶液待測液實驗條件相同情況再加入等量顯色劑其試劑至定刻度 ( 比色管容量 10 25 50 100 等幾種 ) 管口垂直向觀察比較待測液與標准溶液顏色深淺若待測液與某標准溶液顏色深度致則說明兩者濃度相等若待測液顏色介於兩標准溶液間則取其算術平均值作待測液濃度

『玖』 怎麼用可見紫外分光光度計測定樣品

第一步，知道你所需要測量物質的特徵吸收波長是多少？這個可以在國家標准、行業標准或其他相關標准或方法。例如測量總氮的話，就需要220和275nm這2個波長，所以必須買紫外的光度計，並且最好帶雙波長測定功能，例如測總磷是697nm，只需買台可見光度計就可以了。
第二步，知道所測量的物質的實驗方法，需要哪些儀器和設備，還有玻璃器皿等，同時還有比較完成測量所需要的所有化學試劑等。這個可以在標准或實驗方法中找到，基本在互聯網上都可以找到電子版的測量方法。
第三步，配置好所需測量物質的標准濃度溶液，一般是5-8個標准溶液，濃度建議從高到低，建議每個不同濃度貼上標簽，以防順序搞錯。注意，部分實驗需要往標准溶液中加顯色劑之後才可以用光度計進行測量。
第四步，設置好光度計的測量波長，這就需要熟悉光度計的基本操作，一般測量物質的濃度都是用的標准曲線法，就是對應光度計中的定量測量功能。具體操作時第一步，把儀器的波長調整到我們所需要的波長，例如測量總磷直接把波長走到697nm，之後放入裝好蒸餾水的比色皿到樣品室做空白，就是熟稱的調零。第三部把標准溶液放入樣品室，依次測量他們的吸光度，儀器一般會自動記錄之後就會給出標准曲線方程，實驗完畢。如果儀器不能直接記錄吸光度，可以先記在筆記本上，之後用excel軟體進行計算標准曲線。判斷做出的標准曲線是否能用，看哪個R值即那個相關系數，一般最少做出0.999就可以用了，差一點的儀器也可以做出0.99.
第五步，把未知樣品放入樣品室就可以直接測量出樣品濃度。

『拾』 western blot實驗都需要哪些儀器

試劑：tris、Hcl、Nacl、脫脂牛奶、甲醇、甘氨酸、tween 20、抗、二抗、顯色劑及SDS PAGE需要試劑（tris、Hcl、TEMED、SDS、硫酸銨、丙烯醯胺、N N 甲叉雙丙烯醯胺、甘氨酸、非預染蛋白Marker、甲醇、乙酸、考馬斯亮藍R250）、預染蛋白Marker
耗材：濾紙、膜、乳膠手套等
儀器：電泳儀、電轉槽、搖床、冰浴等