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食品中氨基酸用什麼儀器測定

發布時間:2022-08-07 14:22:21

❶ 測定氨基酸

用高相液相質譜儀可以測氨基酸含量,取標准氨基酸作標准曲線,用質譜作檢測器。看有沒有質譜信號,應該是沒有問題,如果沒有信號,則進行衍生,例如苯肼等。不同濃度標准氨基酸提取離子流圖的峰面積作標准曲線。最後檢測樣品,計算含量。

❷ 食品中氨基酸態氮測定的方法有哪些

凱氏定氮法、全自動凱氏定氮儀、液相、紅外

❸ 國標 氨基酸的檢測方法

國家標准檢測食品中的氨基酸是採用先將食品中蛋白質經鹽酸水解成為游離氛基酸,經氨基酸分析儀的離子交換柱分離後,與印三酮溶液產生顏色反應,再通過分光光度計比色瀏定氨基酸含量。

❹ 食品中氨基酸的測定實驗中檢測時為什麼要加入甲醛選用何種玻璃儀器加量甲醛

目的是固定氨基的鹼性,選擇微量滴定管加量甲醛。

分析:氨基酸具有酸性基團—COOH和鹼性基團—NH2,利用氨基酸的兩性作用,加入甲醛以固定氨基的鹼性,使羧基顯示出酸性,將酸度計的玻璃電極及甘汞電極同時插入被測液中構成電池,用氫氧化鈉標准溶液滴定,依據酸度計指示的pH值判斷和控制滴定終點。

物理性質

氨基酸為無色晶體,熔點超過200℃,比一般有機化合物的熔點高很多。α-氨基酸有酸、甜、苦、鮮4種不同味感。谷氨酸單鈉和甘氨酸是用量最大的鮮味調味料。氨基酸一般易溶於水、酸溶液和鹼溶液中,不溶或微溶於乙醇或乙醚等有機溶劑。

氨基酸在水中的溶解度差別很大,例如酪氨酸的溶解度最小,25℃時,100g水中酪氨酸僅溶解0.045g,但在熱水中酪氨酸的溶解度較大。賴氨酸和精氨酸常以鹽酸鹽的形式存在,因為它們極易溶於水,因潮解而難以製得結晶。

以上內容參考:網路—氨基酸

❺ 蛋白質及氨基酸的測定有哪些方法求大神幫助

樓主你好: 測定蛋白質最基本的方法是定氮法,即先測定樣品中的總氮量,再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量。蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法,它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一,在國內外應用普遍。此外,雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定,由於方法簡便快速,故多用於生產單位質量控制分析。 蛋白質及氨基酸的測定 蛋白質是生命的物質基礎,是構成生物體細胞組織的重要成分,一切有生命的活體都含有不同類型的蛋白質。人體內的酸鹼平衡、水平衡的維持;遺傳信息的傳遞;物質的代謝及轉運都與蛋白質有關。人及動物只能從食品得到蛋白質及其分解產物,來構成自身的蛋白質,故蛋白質是人體重要的營養物質,也是食品中重要的營養指標。 蛋白質是復雜的含氮有機化合物,分子量很大,它們由20種氨基酸通過醯胺鍵以一定的方式結合起來,並具有一定的空間結構。不同的蛋白質其氨基酸構成比例及方式不同,故各種不同的蛋白質其含氮量也不同。蛋白質可以被酶、酸或鹼水解,最終產物為氨基酸。氨基酸是構成蛋白質的最基本物質,在構成蛋白質的氨基酸中,亮氨酸、異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、色氨酸和纈氨酸等8種氨基酸在人體中不能合成,必須依靠食品供給,故被稱為必需氨基酸,它們對人體有著極其重要的生理功能,常會因其在體內缺乏而導致患病,或通過補充而增強了新陳代謝作用。所以食品及其原料中蛋白質和氨基酸的分離、鑒定和定量具有極其重要的意義。 蛋白質的測定 測定蛋白質最基本的方法是定氮法,即先測定樣品中的總氮量,再由總氮量計算出樣品中蛋白質的含量。蛋白質含量測定最常用的方法是凱氏定氮法,它是測定總有機氮的最准確和操作較簡便的方法之一,在國內外應用普遍。此外,雙縮脈法、染料結合法、酚試劑法等也常用於蛋白質含量測定,由於方法簡便快速,故多用於生產單位質量控制分析。 微量凱氏定氮法 本法適用於各類食品中蛋白質的測定。 1.原理 食品與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質分解,分解的氨與硫酸結合生成硫酸胺。然後鹼化蒸餾使氨游離,用過量硼酸吸收後再以硫酸或鹽酸標准溶液滴定,根據酸的消耗量乘以換算系數,即為蛋白質含量。反應過程分為三個階段,用反應式表示如下。 ①消化 2NH2(CH2)2COOH 4-13H2S04一(NH。)2S04+6C02+12S0=+16H20 (NH4)2S04+2Na()H一2NH3十+2H20+。Na2S04 2NH3+4H3803—,(NH4)2 B207+5H20 ③滴定 (NH4)2 B2 07+2HCl+5H20—NH4C1+4H3803 2.儀器 ①消化爐。 ②凱氏定氮蒸餾裝置。 3.試劑 所用試劑均用不含氨的蒸餾水配製。試劑均為分析純。 ①CuS04。 ②K2SO。 ③濃H2SO。 ④2%H。BO。溶液。 ⑤混合指示劑:1份O.1%甲基紅乙醇溶液與5份O.1%溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。也可用2份O.1%甲基紅乙醇溶液與1份0.1%次甲基藍乙醇溶液臨用時混合。 ⑥飽和氫氧化鈉:500 g氫氧化鈉加入500 mL水中,攪拌溶解,冷卻後放置數日,澄清後使用。 ⑦0.01 toolI.一』或0.05 toolL叫HCl標准溶液(需用無水碳酸鈉標定後使用)。 4.操作步驟 ①樣品消化:精密稱取O.2~2.0 g固體樣品或2~5 g半固體樣品或吸取液體樣品5~20mI。,放人500 mI。乾燥凱氏燒瓶中,加人O.2 g硫酸銅、3 g硫酸鉀及20 mL濃HzSOa,於凱氏瓶口放一小漏斗,並將其以45。角斜支於有小孔的石棉網上。(更多詳細咨詢請參考國家標准物質網 www.rmhot.com )用電爐以小火加熱,待內容物全部碳化,泡沫停止產生後,加大火力,保持瓶內液體微沸,至液體變藍綠色透明後再繼續加熱微沸30 min。冷卻,小心加入20 mL水,再放冷至室溫,移人100 mL容量瓶中,並用少量水洗燒瓶洗液並人容量瓶,在加水至刻度,混勻備用。除不加樣品外,取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸,按同一方法做試劑空白消化。 ②水蒸氣發生瓶內裝水至約2/3處,加甲基紅指示液數滴及數毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入數粒玻璃珠以防暴沸,加熱煮沸水蒸氣發生瓶內的水。 ③向接收瓶內加入10 mL 2%硼酸溶液及混合指示液l滴,並使冷凝管的下端插入液面下,吸取lO mI。樣品消化稀釋液由小玻璃杯流人反應室,並以10 mL水洗滌小燒杯使之流人反應室內,塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將3~10 mL飽和氫氧化鈉溶液倒人小玻璃杯中,提起玻璃塞使其緩緩流入反應室,立即將玻璃塞蓋緊,並加水於小玻璃杯中以防漏氣。加緊螺旋夾,開始蒸餾。蒸汽通人反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內,蒸餾2~5 min,移動接收瓶,使冷凝管下端離開液面,然後用少量中性水沖洗冷疑管下端外部,再蒸餾1 min取下接收瓶,以0.01 molI.叫或O.05 molL1HCl標准溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。同時吸取10 mI_,試劑空白消化液按③操作。 5.計算 6。說明 ①干樣用稱量紙稱重連紙一同消化,空白管同樣放稱量紙消化。 ②含糖量高和油脂高的樣品消化時容易溢出,加熱要緩慢。 ③氨是否蒸餾完全,可用pH試紙測試餾出液是否為鹼性來判斷。 ④實驗前必須仔細檢查蒸餾裝置的各個連接處,保證不漏氣。所用橡皮管、塞子須浸在氫氧化鈉(10%)中,煮沸10 min,然後水洗、水煮,再用水洗。 ⑤小心加樣,切勿使樣品沾污凱氏燒瓶口部和頸部。

❻ 測定氨基酸含量的方法有幾種

1)稱乾重法.可用離心法或過濾法測定.優點:可適用於一切微生物,缺點:無法區別死菌和活菌.
2)比濁法.原理:由於微生物在液體培養時,原生質的增加導致混濁度的增加,可用分光光度計測定.優點:比較准確.
3)測含氮量,大多數微生物的含氮量占乾重的比例較一致,根據含氮量再乘以6.25即可測得其粗蛋白的含量.
4)血球計數板法.優點:簡便、快速、直觀.缺點:結果包括死菌和活菌.
5)液體稀釋法.對未知菌樣作連續的10倍系列稀釋,經培養後,記錄每個稀釋度出現生長的試管數,然後查MPN表,再根據樣品的稀釋倍數就可計算其中的活菌含量.優點:可計算活菌數,較准確.缺點:比較繁瑣.
6)平板菌落計數法.取一定體積的稀釋菌液塗布在合適的固體培養基,經培養後計算原菌液的含菌數.優點,可以獲得活菌的信息.缺點:操作繁瑣,需要培養一定時間才能獲得,測定結果受多種因素的影響.

❼ 氨基酸的檢測方法有哪些

1. 分光光度法氨基酸檢測:主要是利用氨基酸與衍生劑發生化學反應,產生藍紫色化合物,該化合物在某一波長處有最大吸收峰,根據吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生劑為茚三酮。
2. 毛細管電泳法氨基酸檢測:根據分離原理的不同,可分為毛細管區帶電泳、毛細管凝膠電泳、毛細管等電電泳、毛細管等速電泳以及膠束電動力學毛細管電泳。其中,毛細管區帶電泳和膠束電動力學毛細管電泳可用於氨基酸檢測。
3. 近紅外光譜法氨基酸檢測:利用有機化合物的含氫基團在特定波長區域躍遷,產生光譜的變化,結合統計學方法間接地實現氨基酸的定量檢測。
4. 氣相色譜法氨基酸檢測:將氨基酸衍生化處理變為容易氣化的物質,根據氣態樣品中各組分在流動相和固定相中的分配系數的不同,實現對氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色譜法氨基酸檢測:是最常用的一種氨基酸檢測方法。由於大多數氨基酸本身沒有紫外吸收和熒光反應,因此需要對樣品進行衍生化處理將其轉化為有紫外吸收和發射熒光的物質,衍生可分為柱前衍生和柱後衍生。

❽ 食品檢測實驗室一般應配備哪些儀器設備

近年來食品安全及品質問題越來越受到人們的關注。這里說的食品是廣泛意義上的食品,包括初級農產品,如:糧谷、油料籽、蔬菜、水產品、畜禽產品、水果等,也包括加工後的食品,如:罐頭、火腿腸、食用油、方便麵、醬菜、調味品等。開展食品檢測的實驗室也越來越多。在這些實驗室中由於性質不同,檢測的項目不同,而對實驗室籌建和發展過程中對儀器的購置和選型有著不同的要求。根據這些年工作經驗和對各種實驗室檢查的體會,對食品檢測實驗室儀器設備的配置提出個人的一點粗淺建議,供有關人員參考。
企業實驗室
企業實驗室可根據生產的產品品種、檢測項目的多少和生產規模的大小設置,實驗室儀器設備的配置也可繁、可簡。對於這樣的實驗室,儀器設備的配置能滿足企業產品品質檢測就行了。
食品檢驗可分為兩大項,一是檢測產品的品質項目;二是檢測產品的衛生項目,這一類項目的檢測相對難度大、投資高。
(1)品質項目包括:水分、含鹽量、含糖量、蛋白含量、脂肪含量、纖維含量、維生素含量、酸度等。對於這些項目的檢測,如果經費有限,都可以採用化學法分析,只需配置最簡單的烘箱、水浴、電爐、攪拌器、粉碎機、pH計等設備即可。如果經費充足或檢驗批次較多,對應的檢測項目都有對應的專用儀器可供選購。此外,也有一些通用的儀器可供選購,如:紫外/可見分光光度計、近紅外分析儀、自動滴定儀等。檢測維生素A、E等有時還需配置熒光光度計。檢測營養元素,如鈣、鋅、鐵等,可購置原子吸收儀-火焰檢測器。
(2)衛生項目包括:微生物、添加劑、有害元素、農葯殘留、獸葯殘留、毒素等。對於一般食品企業,微生物檢測實驗室應該建。
a)微生物
建微生物實驗室要按照生物實驗室規范標准要求進行布局。必要的設備有潔凈台、培養箱、高壓滅菌鍋、電爐等,其它設備則根據具體檢測項目配置。經費少可以買國產的,經費多可以考慮買進口的,兩者的價錢相差很多。
b)添加劑和有害元素
有一部分項目可以用化學法,如亞硝酸鹽、二氧化硫、重金屬含量、總砷等。但要想滿足現在國標的食品衛生要求,應該購置氣相色譜-氫火焰檢測器、液相色譜-紫外/可見光檢測器,這樣一般的防腐劑(苯甲酸、山梨酸等)、甜味劑(甜蜜素、糖精鈉等)、色素(檸檬黃、胭脂紅等)都可以檢測了。購置原子吸收儀-石墨爐檢測器,可以分別檢測鉛、鉻、鎘、銅、鎳等有害元素,還需要一台原子熒光儀,用來檢測砷和汞等。
c)殘留農葯
檢測殘留農葯氣相色譜是不能少的。檢測有機氯農葯,需配電子俘獲ECD檢測器;檢測有機磷農葯,需配火焰光度FPD檢測器或氮磷NPD檢測器。現在農殘檢測的項目越來越多,為提高通用性,建議配置毛細管柱分流/不分流進樣口,安裝毛細管色譜柱。與傳統填充柱色譜柱相比,毛細管柱分析項目多,分離度好,可以減少頻繁的更換色譜柱,提高分析效率。出口食品加工企業生產的產品在出口時需檢測的農殘項目越來越多,為了把好生產原料和產品質量關,可以配置氣相色譜-質譜儀。一般只需配置電子轟擊EI源,如果有必要可再配一個負化學NCI源。是選擇四極質譜還是離子阱質譜,個人認為都可以,兩種儀器各有優缺點。還是要看具體工作。
d)殘留獸葯
若進行殘留獸葯的檢測,項目不多且批次多,可以考慮配置酶聯免疫儀,該儀器一次投入不大,操作簡便,檢測靈敏度高。採用ELISA也有一些缺點,一是試劑盒為長期的消耗品,若檢測的批次少成本會較高,二是特異性不好,可能會有假陽性,三是如果在相對長的一段時間內檢測項目較多,成本甚至比儀器分析還高。對於有一定規模的出口食品企業,為適應當前歐盟、美國、日本等發達國家檢測限量要求,最好配置一台液相色譜-串聯質譜儀。第一台儀器建議配置三重四極質譜儀,靈敏度高、重現性好。儀器不一定要追求高配置,夠用就行,但靈敏度、穩定性、抗污染等性能要好。最好買用戶較多的型號,有一個與自己檢測項目相近的用戶群,首先說明該型號儀器檢測擬檢的項目沒有問題,其次也便於今後技術交流。
商業實驗室
商業實驗室與企業實驗室相比檢測的商品和檢測的項目都要比企業多,所以儀器設備的配置從門類和數量上都應比企業實驗室更完善。儀器設備的配置不僅能滿足當前檢測的需要,還應適當超前,否則等客戶找上門來被你推走了,再將客戶找回來就困難了。
1)檢測品質項目通常要考慮使用的標准或根據客戶要求,配置相應的檢測儀器和設備(參照1. 企業實驗室品質項目一段)。由於不同商品和不同客戶可對同一項目可能提出不同的檢測標准或方法,對於這些項目的檢測,若方法規定採用化學法分析,只需配置最簡單的設備即可(參照1. 企業實驗室品質項目一段)。如果經費充足或檢驗批次較多,對應的檢測方法又有儀器法的,可配置相應的專用儀器,如:水分測定儀、凱氏定氮儀、快速脂肪測定儀、糖度計、粘度計、脂肪酸分析儀等。通用儀器也可參照企業實驗室品質項目一段。如果有需要,像氨基酸分析儀這樣的專用分析儀也可以配置。
2)衛生項目檢測的實驗室配置參見「1. 企業實驗室」相關段落。個人認為對於一個現代商業實驗室液相色譜-串聯質譜、氣相色譜-質譜是不可少的,這是現在對禁用農獸葯殘出具陽性報告時指令和標准要求的條件。如果有規模、檢測項目多,每類儀器還應配置多台套。這時要考慮儀器性能的互補,如:液相色譜-串聯質譜一台配電噴霧電離源,一台配大氣壓化學電離源;氣相色譜-質譜一台配電子轟擊源,一台配負化學電離源。元素多、樣品雜,還可以考慮配置等離子發射光譜-質譜儀、氣相色譜-串聯質譜儀等。如果要做形態分析,等離子發射光譜-質譜儀還應能與液相色譜或氣相色譜聯用。
行業實驗室
中國的行業實驗室(指政府法規實驗室)都隸屬於不同行業行政領導機構,因此,多少都帶有一點行政功效。近年政府非常重視食品安全工作,加大了投入,所以,實驗室的硬體得到了較大的改善。現在一個較完善的行業實驗室(省市一級以上的),除了分析測試設備的門類和數量應等同或優於一般商業實驗室外,為提高分析效率還可以在前處理設備配置方面更完善一些,如:微波消解(包括微波萃取)、自動固相萃取儀、凝膠色譜凈化儀、溶劑加速萃取儀、高速冷凍離心機、高速均質機、氮吹儀等。這些前處理設備效率更高、自動化程度更高(可利用晚上時間自動處理樣品),並且會提高結果的重現性。
隨著我國的行政監管體系正在與國際發達國家接軌,我們的行業實驗室越來越多的參加國際上一些權威機構的能力比對活動,檢測方法和結果都按照國際通行做法執行。此外,為了適應食品安全檢測發展,許多實驗室開始開發新的分析方法。因此,行業實驗室今後會配置更高端的分析儀器,如高分辨質譜儀等,使最終的檢測結果更准確。

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