Ⅰ 跪求POCT行業大神科普，酶免法，膠體金，凝集法，免疫熒光，比濁法這些方法學的利弊，
比較幾種免疫標記技術的異同。
答：根據標記物種類的不同，免疫標記技術可以分為放射免疫分析、酶標記免疫分析、熒游標記免疫分析、化學發游標記免疫分析、膠體金標記免疫分析技術，它們之間具有相同點，也有不同之處，現將其歸納如下。
一、相同點主要包括以下幾個方面：
1、均具有高特異性。五種免疫標記技術的免疫技術都是採用抗原抗體反應，而抗原與抗體的結合是一一對應、特異性結合的，故它們都具有非常高的特異性。
2、均具有高靈敏性。由於五種免疫標記技術的標記技術均採用示蹤物標記，例如酶、放色性核素、熒光素、膠體金以及緻密物質等，當與標本中的相應抗體或抗原反應後，可以不必測定抗原抗體復合物本身，只需測定復合物中的標記物，通過化學或物理的手段使不見的反應放大，轉化為可見的、可測知的光、色、電、脈沖等信號，並可藉助儀器精密測定，從而間接測出微量的抗原或抗體。
3、檢測對象相同。除了放射免疫技術只能檢測抗原外，其他四種免疫標記技術均可檢測抗原或者抗體，即通過已知抗原(或抗體)特異性結合待測抗體（或抗原），從而定性或定量地測出抗體或抗原。
4、免疫標記的程序基本相同。其包括純化抗原或抗體、確定標記物質（即決定了最終的檢測方式）、進行標記、對標記產物分離純化和分析鑒定等一系列程序。
二、不同點主要包括以下幾個方面：
1、檢測原理不一樣。首先，酶免疫技術是以酶標記的抗體（或抗原）作為主要試劑，將抗原-抗體反應的特異性和酶催化底物反應高效性和專一性結合起來的一種免疫方法，其對作為標記用的酶具有特定的要求，如活性高、純度高等；放射免疫標記技術是以放射性同位素作為示蹤物的標記免疫測定方法；免疫熒光技術是以熒光素作為標記物與已知的抗體或抗原結合，然後將熒光素標記的抗體作為標准試劑，用於檢測和堅定未知的抗原，其對用於標記的熒光素也有特定的要求，如熒光效率高，與蛋白質結合穩定，易於保存等；發光免疫分析技術是將發光分析與免疫反應相結合而建立的一種新型超微量分析技術，它是使用發光劑標記抗體（或抗原），通過發光檢測抗原（或抗體）反應的免疫分析方法；免疫膠體金標記技術則是以膠體金作為示蹤標記物，而膠體金在鹼性環境中帶負電荷，與抗體蛋白質分子的正電荷基團因靜電而形成牢固結合應用於抗原抗體反應的一種新型免疫檢測方法。
2、所採用的標記物不同。由於彼此間免疫標記的原理不一樣，故採用的標記物必然存在差異性。熒光免疫技術的標記物為熒光素，一般採用四乙基羅丹明、異硫氨酸熒光素及藻紅蛋白等；酶免疫技術的標記物為酶，一般採用辣根過氧化物酶（HRP）或鹼性磷酸酶（AP）；放射免疫技術的採用放射性核素標記，一般有131I、125I、14C和3H；發光免疫技術採用化學發光物質來進行標記，常用的化學發光劑有魯米諾、異魯米諾以及魯米諾的衍生物；免疫膠體金技術的標記物為膠體金，，是由金鹽被還原成原金後形成的金顆粒懸液，膠體金顆粒大小多在1—100nm。
3、檢測所需儀器或方法不同。酶免疫技術通過加酶的底物顯色，然後通過酶標檢測儀比色來進行檢測；放射免疫技術是採用液體閃爍計數儀、晶體閃爍計數儀或X膠片來進行免疫檢測；免疫熒光技術則是採用熒光比色計或熒光顯微鏡來進行分析；發光免疫技術所需儀器為發光分析儀；免疫膠體金技術是通過免疫電競或斑點免疫金染色法進行檢。
Ⅱ 膠體金法怎麼用
膠體金與標記蛋白簡介
在不同還原劑的作用下，由氯金酸（HAuCL4）可以制備出金顆粒直徑在0.8-500nm的膠體金。制備好的膠體金保存時間較長，可在4℃保存6個月以上，或在室溫下可保存1-2個月。
膠體金在做為標記探針時，不同用途選用的膠體金的直徑范圍也不同，用於免疫快速檢測的膠體金顆粒直徑范圍一般在3-40nm間。
膠體金粒子表面為一層AuC12—，粒子表面帶有負電荷金顆粒表麵包被一層生物大分子（如蛋白）可以穩定和保護金顆粒，維持膠體的穩定，可防止外來電解質的影響使粒子相互凝聚。
膠體金粒子對蛋白的吸附作用取決於溶液的pH值，這是因為蛋白中氨基酸的凈電荷取決於溶液的pH值，在pH=pI時蛋白溶液呈中性。在pH=pI時蛋白溶解度最小，水化程度最小，更容易吸附到疏水的金粒子表面。但在實際的膠體金探針制備中，一般膠體金調整為pH=pI+0.5，這樣更有利於結合更穩定。
膠體金探針所用的蛋白通過三種機制於吸附於金顆粒的表面：一、金粒子所帶負電荷與蛋白部分鹼性氨基酸（如賴氨酸，精氨酸，pH均大於10）所帶陽性電荷的最初的相互吸引；二、蛋白通過某些疏水性氨基酸殘基（包括色氨酸）與金粒子表面之間的疏水吸附作用；三、蛋白中的半胱氨酸或甲硫氨酸的硫基與金粒子間的電子對的共用以共價鍵結合。
用於制備膠體金探針的蛋白需要進行前處理後才能與金顆粒更好的結合。未經處理的蛋白質一般來說均含有較高濃度的鹽分，而高濃度的鹽分往往干擾蛋白與膠體金的吸附結合，或導致膠體金粒子的凝聚，所以首先要去除蛋白質溶液中的鹽分。凍干蛋白或高濃度蛋白溶液中蛋白分子常凝聚為多聚大分子，可同時與多個膠體金粒子結合，影響探針的靈敏度，分散蛋白分子為單體也是蛋白前處理的重要一項。處理標記的使其蛋白具有適當的分子量，如果蛋白分子量過小（30kD），形成的蛋白復合體往往是不穩定。把分子量過小的蛋白與其它蛋白（如BSA，牛血清蛋白等）結合後，能制備出穩定性更佳的探針。分子量過大時，影響探針的靈敏度，在已知蛋白的結構與活性中心的前提下，去除對活性無影響的結構部分可提高標記的靈敏度。
二、免疫膠體金產品原理及應用
膠體金探針大多用單克隆抗體標記，應用免疫層析法製成快速診斷產品，具有較高的特異性，而且相對穩定性很高。檢測一般在5-10min就可以讀出結果，相比其它方法(如ELISA需1-2h，PCR需要時間更長)大大的縮短了檢測時間。檢測樣(可以是組織液、血清、尿液、糞便等)只需做非常簡單的處理或不做前處理即可進行檢測。結果以顏色的變化讀取，不需要特別儀器設備。
免疫膠體金法快速檢測試紙利用層析原理、雙抗體夾心法或免疫競爭法或間接法，應用被檢測物質的特異性和能與其發生特異反應的抗原或抗體，並以金顆粒為顯色劑達到快速檢測目的。
使用快速檢測產品時，在卡的加樣孔加入待測樣，利用層析原理不斷的向另一端層析，隨著層析的進行，樣本中的待測成分固定於測試線（T線）並以顏色變化顯示，並以對照線（即控制線，C線）確保檢測的有效性。
Ⅲ 膠體金判讀儀具體是干什麼用的儀器能檢測哪些
膠體金檢測技術就是利用膠體金作為跟蹤標志
對食品中的抗原體進行標記
進而得出檢測結果的一種免疫標記檢測技術
具有檢測方便
結果明確的特點
膠體金分析儀就是對膠體金試劑卡檢測結果進行判讀的儀器
可用於食品安全監管中的快速檢測
在醫學實驗室用於對人體液樣本中待測物濃度進行判讀
Ⅳ 膠體金試紙條的測試原理是什麼
膠體金快速檢測卡是採用膠體金免疫層析技術研製而成的，此技術是90年代初在免疫滲透技術的基礎上建立的一種快捷簡單的免疫學檢測技術，市場上一般用到的有雙抗體夾心法、雙抗原夾心法、小分子競爭法等等。 膠體金是氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下，金離子還原後聚合成的一定大...小的金顆粒，它由一個基礎的晶核（11個金原子形成的二十面體）和包圍在外的雙離子層構成（內層為負離子層AuCl2－，外層是帶正電荷的H＋）。由於靜電作用，金顆粒之間相互排斥而懸浮成為一種穩定的膠體狀態，形成帶負電的疏水膠溶液，故稱膠體金。 。質量差的溶液燒制後，液面有漂浮物，大小不一，形狀各異。膠體金顆粒大小，決定了我們用肉眼觀察到的膠體金溶液顏色，由紅到紫色。 膠體金一般在弱鹼環境下帶負電荷，會與蛋白質分子的正電荷基團形成牢固的結合，一般稱這種結合叫靜電結合，所以不影響蛋白質的生物特性。除了與蛋白質結合以外，它還可以與許多其它生物大分子結合，如SPA、PHA、ConA等。根據膠體金的一些物理性狀，如高電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應，加上結合物的免疫和生物學特性，從而使膠體金廣泛地應用於免疫學、組織學、病理學和細胞生物學等領域。 膠體金標記技術，實質上是蛋白質等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。用於膠體金標記的蛋白必須要經過前處理，其目的在於 1、去除高濃度的鹽分，高濃度的鹽分往往干擾蛋白與膠體金的吸附結合，或導致膠體金粒子的凝聚，這一步往往採用低濃度緩沖液來進行。 2、使蛋白分子盡量分散為單體，凍干蛋白或高濃度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚為多聚體大分子，可同時與多個膠體金粒子結合，影響標記的靈敏度和定量分析。 3、使蛋白具有適當的分子量。蛋白分子量過小（30 kD），形成的蛋白復合體往往是不穩定，可短時間內失活。而分子量過大時，被認為影響探針的靈敏度，特別是已知蛋白的結構與活性中心的情況下，去除對活性影響的結構部分是提高標記靈敏度，延長探針壽命（防止凝集）的有效辦法。把分子量過小的蛋白與其它蛋白（如牛血清蛋白等）結合後，能制備出穩定性更強的探針。 當蛋白前處理完成後，接著要確定膠體金與蛋白結合的最佳pH值。對於理化性質不確定的蛋白這一步尤為重要。過量的蛋白與不同pH值的膠體金結合後，只有某一特定pH值能夠形成結合最穩定的探針。在高濃度電解質（如NaCl）作用下不會凝聚。不同蛋白的適宜pH范圍的寬窄大不相同。一般選擇最小適宜pH值為最佳pH值。但有些探針的實際情況並不完全如此，最穩定的探針並不完全代表活性最好，這要靠實驗驗證。 在確定最佳pH值後，最後要確定最小蛋白量，即能夠形成穩定探針的蛋白的最小量。如果在制備探針時加入太多的蛋白，不僅造成浪費，而且更為嚴重的是容易造成探針凝聚，並嚴重影響標記活性。因為探針溶液中的游離蛋白容易搶先與標記位點結合，起到「封閉」（Blocking）作用，而膠體金探針標記不上。在標記位點希少、被標記物含量較少的情況下要特別注意。 膠體金具有很高的動力學穩定性，在穩定因素不受破壞時自身凝聚極慢，可放置數年不發生凝聚。影響穩定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。金溶膠必須有少量電解質作穩定劑，但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質促使溶膠凝聚，但一定量的高分子物質反而可增加溶膠穩定性，如蛋白質、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的穩定效果。. 當金溶膠吸附蛋白質後，溶膠的穩定性隨溶液pH而變化，而這種變化又取決於吸附蛋白質的等電點，如ConA，過氧化物酶等，當pH較低時保持穩定，提高pH則顯得不穩定，接近等電點或略高時又變得穩定了。標記後的膠體金溶液可用0.2～0.5mg/ml PEG20000 作為穩定劑。在4～10℃貯存數月有效，不宜冰凍。貯存中可能會發生程度不同的凝聚，可離心除去。 當今國內有很多膠體金試紙條生產廠商，江浙這一帶尤為突出，推薦廠家：蘇州快捷康生物技術有限公司。
Ⅳ 膠體金檢測儀有什麼優勢
膠體金檢測儀的優勢有很多，首先膠體金檢測儀的檢測方式和以往儀器不同，膠體金檢測儀利用膠體金卡檢測，檢測過程更加方便快捷，結果更加准確。
YT-JBY利用膠體金對特定波長的光的吸收獲取層析試紙T線和C線上光吸收峰信號，據此計算出兩個峰面積/峰高之比，然後根據標准濃度和峰面積/峰高的比值製作標准曲線。在實際的測試過程中，通過多功能定量分析儀獲取兩個峰面積/峰高之比，就可以根據繪制的標准曲線求得待檢項目的定量結果。
膠體金模塊檢測方式：軌道式自動傳輸掃描，檢測完成後自動退出試紙。CT線自動識別，無需手動調整。
Ⅵ 膠體金為什麼不能定量檢測
膠體金要做定量檢測需要配合高靈敏度，穩定性好的儀器才可以，目前性能最好的是日本濱松公司，但是價格也是很貴的。http://www.bio-equip.com/show1equip.asp?equipid=554395&division=699
可以參考一下。
Ⅶ 伊鴻健康掌中測是干什麼用的儀器能檢測哪些
掌中測是一款智能診斷設備，我們診所使用掌中測膠體金試紙分析儀快一年了，可以檢測CRP、SAA、肺炎支原體/衣原體、幽門螺旋桿菌、糖化血紅蛋白、手足口病、甲乙型流感等，一般半小時內就能檢測出准確的細菌感染、病毒感染等單位，輔助我們醫生精準用葯，病人也非常認可，而且診所醫生也可獲得更多的服務收入很好。