A. 關於流感,你需要知道哪些
關於流感,你需要知道什麼是流感和如何預防及治療。
來自香港衛生署衛生防護中心的數據顯示,自今年 5 月 5 日至 8 月 6日,香港共監測到 456例成人嚴重流感病例,包括 324例死亡,絕大部分屬於甲型流感(H3)。其中65歲以上老人佔多數,大部分病人有慢性病患,較易出現並發症甚至導致死亡; 19 例兒童(年齡小於 18 歲)流感相關的嚴重並發症病例中大部分為H3,其中3人死亡。大部分病人沒有接種本季季節性流感疫苗。

疫苗接種(圖片來自網路)
疫苗依然是預防流感最有效的方法。打過流感疫苗後不能保證百分百不得流感,但流感疫苗對機體的保護作用還是非常可觀的。同時,越多人接種疫苗,形成群體性免疫(herd immunity),讓自己不會成為傳染源,這樣也保護了其他人。
世界衛生組織建議每年為以下人接種疫苗:任何妊娠階段的孕婦;年齡為6個月至5歲的兒童;65歲及以上的老年人;慢性病患者;衛生保健工作者。
對於人的身體來說,感冒病毒與其它微生物一起構築了人類的免疫系統乃至健康的機體。生物醫學領域的科學家們,不斷地拓寬我們對流感及流感病毒的認知。在疾病面前,提高你我對自身健康的關注,以及對公共衛生技術與政策的認識,方是最終極的防護。
B. 甲型H1N1流感病毒實驗室檢測技術方案的本方案旨
在為全國流感監測網路實驗室提供甲型H1N1流感病毒實驗室檢測技術方案,不用作商業活動或贏利目的。
一、標本的採集種類和要求
1、推薦採集的呼吸道標本種類
疾病發病後應盡快採集如下標本:鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔沖洗液。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置於無菌病毒采樣液,並立即用冰塊或冰排保存或置於4 ℃ (冰箱),並馬上送至實驗室。(臨床樣品採集人員及實驗室檢測人員的感染控制指導請見相關文件。) 采樣同時填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單。(附表1)
2、拭子的選擇
標本應使用頭部為合成纖維的拭子(例如,聚酯纖維),用鋁或塑料做柄。不推薦棉拭子和木柄。標本採集管應包含3毫升病毒采樣液(含有蛋白質穩定劑,阻止細菌和真菌生長的抗生素,緩沖液)
3、臨床標本儲存要求
保存在4℃(不能超過4天)或者-70℃或-70℃以下。有條件的實驗室均應保存在-70℃或-70℃以下。不應保存在-20℃。
4、標本的分裝處理
標本送至實驗室後,立即進行處理,避免反復凍融。將原始標本分為三份,一份用於核酸檢測,一份用於病毒分離,一份保存待復核。
5、標本的運輸
疑似人感染甲型H1N1感染病例列為 A類,用UN2814包裝運輸。填寫疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單(附表2)。
二、核酸檢測
基於PCR原理的核酸檢測方法是一種快速有效的診斷方法,在突發傳染病應急工作中發揮了巨大作用。
1、基於real-time RT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒(引物和探針序列為美國CDC設計):
4月29日WHO網站上公布了美國CDC設計的針對此次甲型H1N1流感病毒的real-time RT-PCR引物和探針,此實驗用於檢測疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道樣本, 因此,用此real-time RT-PCR的方法,建議首先篩選甲型流感病毒並排除季節性流感病毒和H5N1禽流感病毒。real-time RT-PCR方法參見附件3(中文翻譯版),附件4(英文原版)。
2、基於RT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒(引物序列為國家流感中心設計):
目前國家流感中心設計了RT-PCR方法檢測新的甲型H1N1流感病毒。RT-PCR的方法參見附件5。
三、病毒分離鑒定
可採用雞胚和/或MDCK細胞進行流感病毒分離。具備相應條件的網路實驗室在收到標本後24h內進行病毒接種。具體方法參見附件6和7。
四、適用於實驗室工作人員的甲型H1N1流感病毒生物安全
(一)實驗室級別及個人防護
1、對採集自屬於感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的診斷性實驗工作,在BSL-2實驗室內進行。所有樣本操作均應在生物安全櫃(BSC)內進行。遵循生物安全三級個人防護。
2、對採集自屬於感染甲型H1N1流感病毒疑似病例的患者的臨床標本進行的病毒分離培養工作,應在BSL-3實驗室內進行,並遵循生物安全三級個人防護。
(二)健康監測
1、所有人員均應自測發熱及其他症狀。
2、感染甲型H1N1流感病毒的症狀包括咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛。如有不適,應立即向上級報告。
3、如有人員在無防護情況下暴露於甲型H1N1流感確診病例的臨床標本或活病毒,應考慮在暴露後的7天時間里使用奧司他韋或扎那米韋進行抗病毒葯物預防。
五、附表和附件
附表1 疑似人感染甲型H1N1感染病例標本采樣單
附表2 疑似人感染甲型H1N1感染病例標本送檢單
附件3: real-time RT-PCR方法檢測甲型H1N1流感操作規程(2009版)(中文)
附件4: real-time RT-PCR方法檢測甲型H1N1流感操作規程(2009版)(英文)
附件5: RT-PCR方法檢測甲型流感病毒
附件6:甲型H1N1流感病毒雞胚分離方法
附件7:甲型H1N1流感病毒MDCK細胞分離方法
附表1
疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本采樣單 姓名 性別 年齡 職業※ 現住址 發病日期 標本#
種類 標本量
(g或ml) 採集
日期 備注 ※選項:參照傳染病報告卡。
#選項:A鼻咽拭子、 B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他(如為其他,請在表格中註明)
採集人員: 採集單位(蓋章):
附表2
疑似人感染甲型H1N1流感病毒病例標本送檢單 姓名 性別 年齡 職業※ 現住址 發病日期 標本#
種類 標本量*
(g或ml) 採集
日期 備注 ※選項:參照傳染病報告卡
#選項:A鼻咽拭子、 B鼻咽吸取物、C鼻腔沖洗液、D鼻腔吸取物、E氣管吸取物、F其他(如為其他,請在表格中註明)
*標本量:如果同一份標本有多個包裝請註明。
填表人員: 送樣時間: 單位(蓋章):
附件3
real-time RT-PCR方法檢測甲型H1N1流感操作規程
中文翻譯版(請同時參考英文原版)
請注意:體系建立請參照所使用試劑盒供應商所提供的使用說明。本規程中的體系僅供參考。
美國CDC實時RTPCR(rRTPCR)檢測豬流感操作規程(2009版)
本規程所有權歸屬疾病控制中心,緊急狀態時授權各公共衛生實驗室使用。本規程不用作商業活動或贏利目的。
一、概 述
(一)前提
本規程基於對rRT-PCR方法的基本掌握。
(二)實驗原理
實時熒光定量RTPCR(rRTPCR)法檢測豬流感的方案是用一組寡核苷酸引物和雙重標記的TaqMan®探針,對呼吸道樣本或體外培養的豬流感病毒進行定性檢測鑒定。InfA引物和探針為檢測出甲型流感病毒而設計,swInfA引物和探針可特異性地檢測出所有的豬甲型流感病毒,swH1引物和探針可特異性檢測豬流感病毒H1亞型。本實驗用於檢測甲型流感陽性的疑似豬甲型流感感染病例的呼吸道樣本。
(三)使用條件
一步法定量RT-PCR 96孔板熱循環系統。
(四)生物安全要求
樣本處理應在相應的生物安全實驗室完成。
(五)樣本要求
1、呼吸道樣本
支氣管肺泡灌洗液,氣管抽吸物,痰,鼻咽或口咽洗液或拭子。拭子樣本所用的拭子頂端應為人造材質(如聚脂或滌綸)、柄為鋁制或塑料。不推薦使用棉頭木柄的拭子。藻酸鈣拭子采樣不可取。
2、排除標准
1)未在2-4°C (≤4 天)或-70°C及以下保存的樣本
2)以上未列的其它不當樣本
(六)核酸提取
RT-PCR擴增效能依賴於樣本模板RNA的質與量。RNA提取操作需經過檢驗核酸的純度合格之後,再用於樣本實驗。商業化的操作程序中包括QIAamp® 病毒RNA提取試劑盒,RNeasy®小試劑盒 (QIAGEN公司),羅氏MagNA Pure Compact RNA分離試劑盒, MagNA Pure LC RNA分離試劑盒II, 和羅氏MagNA總核酸純化試劑盒,在推薦的操作程序下,可提取高純度的RNA。
(七)免責聲明:提到的廠家名僅用作舉例,並不表示疾控中心認可。
二、實驗材料
(一)試劑
1、一步法熒光定量RT-PCR探針試劑盒;
2、分子級無菌蒸餾水 (無RNA酶和DNA酶);
3、正反向引物 (40μM);
4、雙重標記探針(10μM);
5、陽性對照。
(二)供給
1、實驗室標記筆;
2、微量離心管格柵,96孔0.2ml PCR反應管;
3、20μl 和 200μl 可調節移液器及濾芯槍頭;
4、0.2ml PCR 反應管盤;
5、光學反應蓋板;
6、無菌,無核酸酶的1.5 ml微量離心管;
7、一次性無粉手套。
(三)儀器設備
1. 微量離心機;
2. 漩渦振盪器;
3. 實時熒光定量PCR檢測系統,含96孔的熱循環反應板。
三、操作程序
(一)准備工作
1. 避免樣品污染
由於fluorogenic 5』核酸酶測定的敏感性,應特別注意假陽性產生。推薦以下預防污染的方法:
1)實驗准備與核酸提取使用獨立區域;
2)實驗准備與核酸提取使用專用設備(如移液器,微量離心機)和耗材(如微量離心管,吸頭);
3)實驗開始後穿清潔工作服,並使用新的一次性無粉手套;
4)不同樣本操作之間,以及懷疑可能污染的情況下均更換手套;
5)試劑和反應管的蓋子應盡量關閉。
2、儀器准備
工作台、移液管、離心機必須清潔,用去污劑凈化,例如5%的漂白劑、「DNAzap」或者「RNase AWAY®」來減小核酸交叉污染的風險。
3、試劑准備
注意:在試驗過程中,保持所有的試劑在冰架上保持低溫。
1)引物和探針
(1)分裝好的冰凍的引物和探針進行融化(已融的探針避光2-8℃可保存多達3個月,不要對探針反復凍融);
(2)渦旋振盪引物和探針;
(3)瞬時離心引物和探針,之後置於冰架上。
2)Real time RT-PCR的試劑
(1)將Master Mix和酶置於冰架上;
(2)融化2×的Reaction Mix;
(3)顛倒混合2×的Reaction Mix;
(4)瞬時離心2×的Reaction Mix和酶,置於冰架上。
4、對RT-PCR的每一步過程均進行檢測
1)每個樣品的RNA提取物通過分別的引物和探針進行檢測:InfA, swFluA, Swine H1 (swH1) 和RNaseP (RP)。RNaseP引物和探針是以人的RNaseP基因為靶基因的,因此對於人的核酸可以作為內部陽性對照。
2)對於每一個過程中包括的所有引物和探針,均設立無模板對照(NTC)和陽性模板對照(PTC)。
3)人類樣本對照(HSC)提供了次級陰性對照,以便確認核酸提取過程和試劑的完整性。
5、建立反應
反應檢測混合物充分混合後加入到96孔板中。然後在適當的實驗反應和對照中,加入水和提取的核酸或者陽性模板對照(PTC)。
1)為每一個引物和探針標記一個1.5ml的微量離心管;
2)對每一個建立的反應確定反應數(N)。考慮到NTC、PTC、HSC反應和吸量誤差,制備過量的反應混合物是必要的。具體如下:
(1)如果包括對照,樣品的數量(n)為1到14,那麼N=n+1;
(2)如果包括對照,樣品的數量(n)大於15,那麼N=n+2。
3)Master Mix:計算加到每個引物/探針反應混合物中的各個試劑的量。計算如下:
* 體系建立請參照所使用試劑盒供應商所提供的使用說明。
4)加入水之後,通過上下吹打混勻反應混合物,不要渦旋振盪。
5)離心5s使混合物聚集管底,然後將管子置於冰架上;
6)准備板狀的反應管子或者96孔板,置於冰架上;
7)每一個master mix吸取20μl到每一孔中,每排按順序進行,如下圖:
實驗建立舉例:
實驗樣本舉例:
注意:在任何樣本被加入之前,應該首先加入陰性模板對照(NTC)(第1列),用來檢驗master mix中的污染。HSC應該在待測樣本之後加入(第11列),用來檢驗在樣本准備或者加入過程中的交叉污染。陽性模板對照(PTC)應該在所有樣品和陰性模板對照(NTC)之後被加入。
8)在將培養板移到核酸處理區域之前,在試驗設定區域,在反應板的第一列將NTC反應進行。如上所述。
9)吸取5μl的nuclease free water到NTC孔,將NTC孔蓋上。
10)將反應板蓋上,移到核酸處理區域。
11)將含有樣品的管子渦旋振盪5s,瞬時離心5s;
12)將提取的核酸樣本置於冰架上;
13)如上所述,樣品應該按列加入,吸取5μl的第一種樣本到所有標記這種樣品的孔中(例如,樣本「S1」如上表格所示)。不同樣本之間需更換槍頭操作。
14)加完樣本的孔要蓋住,這將會幫助防止樣品的交叉污染,並且能夠使操作人員記錄其加樣的具體進程;
15)為了避免交叉污染,必要時更換手套;
16)對剩下的樣本,重復步驟13-15;
17)加入5μl的HSC樣品加到HSC孔中(第11列)。將HSC孔蓋蓋。
18)最後,加5μl陽性模板對照RNA到所有PTC孔中,將PTC孔蓋上。
19)如果使用8個管子的條狀板子,每一條都要做標簽標記,來指明每一個樣品的位置(不要在反應管子的頂部標記!)。瞬時離心條狀管子10-15s,然後置於冰架上。如果使用培養板,4℃,500g離心30s,置於冰架上。
6、RT-PCR擴增條件
反應體系為25ul,反應條件如下:
註:在55度這一步驟中要收集熒光信號(FAM)。
* 具體擴增條件請參照所使用試劑盒供應商所提供的使用說明。
7、解釋說明/檢驗
1)探針/引物的陰性對照反應中得到的熒光增長曲線不應該超過閾值線。如果一個或者多個引物和探針的陰性反應出現了假陽性,則樣品可能已經被污染。那麼整個實驗過程是無效的,嚴格的按照步驟規則重新實驗。
2)在37個循環處或者37個循環之前,所有的臨床樣本的RP反應曲線都應該超過閾值線,這表明從人類RNase P基因擴增到足夠量的RNA,也表明了樣本質量合格。然而,可能有些樣本會由於初始臨床樣本中的細胞數量較少而無法出現陽性結果。同時,從動物/禽類體內或者經細胞培養得到的樣本,經常會RP反應沒有結果或者結果很弱。如果在所有臨床樣本中檢測RNase P都陰性,則說明:
(1)從臨床材料中對核酸的不適當的提取導致RNA的損失或者來自臨床標本的RT-PCR抑制劑的殘留污染;
(2)沒有足夠的人類細胞以備檢測;
(3)方法建立和實施不當;
(4)試劑和儀器原因。
3)在40個循環之內,HSC組中InfA,swFluA,swH1探針的熒光增長曲線不應該超過閾值線。如果任何其中任何一個流感特異性探針的增長曲線超過了閾值線,那麼有以下解釋:
(1)可能由於RNA提取試劑污染。在實驗前確保RNA提取試劑無誤。
(2)RNA提取過程或建立反應加樣過程發生交叉污染。嚴格遵照操作程序的要求進行重復實驗。
(3)在40個循環之前,PTC反應的InfA, swInfA, swH1和RP反應應出現陽性結果。如果沒產生預期的陽性結果則視為無效,應嚴格遵照操作程序進行重復實驗。確定PTC反應失敗原因,訂正並記錄錯誤原因及更改方案。不再使用沒產生預期結果的PTC試劑。
(4)當所有對照都滿足要求後,如果InfA反應增長曲線與閥值線在40個循環內有交叉時,則樣本被視為A型流感病毒陽性。如果A型流感病毒反應呈陽性,那麼Univ SW 和/或 SW H1也可能呈陽性。如果樣本InfA和特異亞型反應(swInfA和swH1)的反正增長曲線與閾值線在40個循環內有交叉,則視該樣本為豬流感病毒A/H1陽性。如果樣本只有InfA和一個亞型的反應陽性或只有InfA陽性,請聯系CDC做進一步指導。
(5)在所有對照都滿足要求的前提下,如果在40個循環內,待測樣本的所有InfA反應陰性則視該樣本為陰性。
8、限制規定
1)實驗員在實際操作之前應進行操作程序和試驗結果分析的培訓,熟練掌握後方可進行試驗。
2)當樣本量不足可能會產生假陰性結果,造成的原因可能是不當的收集,運輸或處理。
3)如果反應中存在過量的DNA / RNA模板時也可能出現假陰性。如果某樣本的RP反應被抑制,則可以將提取的RNA進行2倍或更大倍數的稀釋(例如1:10或1:100)來重復試驗。
9、備注
引物和探針參見英文版P7。
附件4
real-time RT-PCR方法檢測鑒定甲型H1N1流感操作規程
(英文版)
附件5
基於RT-PCR的方法檢測新的甲型H1N1流感病毒
一、目的
對採集的可疑病例標本進行檢測,篩選甲型H1N1流感病毒並排除季節性H1N1流感病毒。
二、引物 NIC引物 引物名稱 鹼基組成 目的片段大小 備注 FluA FluA-M-F30 TTCTAACCGAGGTCGAAACG 235bp 甲型流感病毒M基因通用檢測引物 FluA-M-R264 ACAAAGCGTCTACGCTGCAG H1HA H1 F1147 AAGAGCACACATAATGCCAT 527bp H1N1亞型檢測通用引物 H1 R1673 CCATTRGARCACATCCAG HuH1HA H1HA F768 ACTACTGGACTCTGCTGGAAC 327bp 人季節性流感病毒H1N1亞型檢測引物 H1HA R1094 CAATGAAACCGGCAATGGCTCC SWH1HA-1 SW-H1 F786 AATAACATTAGAAGCAACTGG 153bp 此次甲型H1N1亞型流感病毒引物 SW-H1 R920 AGGCTGGTGTTTATRGCACC RnaseP RnaseP F AGA TTT GGA CCT GCG AGC G 約80bp 與real-time PCR中RnaseP引物一致 RnaseP R GAG CGG CTG TCT CCA CAA GT 三、材料及儀器
1、 RNA 提取試劑盒QIAGen RNeasy Mini Kit (catalog #74104)
2、β-巰基乙醇(SIGMA β-Mercaptoethanol Lot 062K0115)
3、70%乙醇
4、RT-PCR Kit:QIAGEN One step RT-PCR Kit(catalog #210212)
5、RNasin Ribonuclease Inhibitor (Promega catalog #N2111)
6、檢測引物
7、Axygen 1.5mL離心管,貨號:MCT-150-C
8、Axygen 0.2mL PCR管,貨號:PCR-02-C
9、Axygen 10μL,100μL,200μL,1000μL帶濾芯槍頭
10、10μL,100μL,200μL,1000μL加樣器
11、可調轉速14K離心機:
12、旋渦混合器:
13、生物安全櫃:二級生物安全櫃
14、PCR儀:
15、瓊脂糖:Biowest Agarose Distributed by Gene Tech(Shanghai)Company Limited Lot No. 101685
16、核酸染料:
17、電泳液:5×TBE電泳緩沖液 cat No. 9009032718.電泳槽、電泳儀
四、實驗步驟
(一)RNA提取
1、根據標本數量分裝RLT液:從Kit中取出RLT液,用1.5mL離心管分裝,每管500μL(在體系配製區操作)。
2、在生物安全櫃內將采樣液(鼻拭子、咽拭子、胸水等)或病毒培養物(雞胚尿囊液或細胞培養液)取100μL加入RLT液管中,充分混勻。
3、每管分別加入5μL β-巰基乙醇,混勻後依次加入600μL 70%的乙醇,充分混勻。
4、從Kit中取出帶濾柱的2mL收集管,打開包裝將其做好標記。取步驟(3)中的混合液600μL加入濾柱中,12000rpm,離心15s,棄收集管中的離心液。
5、濾柱仍放回收集管上,將步驟(3)剩餘的混合液全部吸入濾柱中,12000rpm,離心15s,棄離心液。
6、於濾柱中加入700μL Wash Buffer RW1液,12000rpm,離心15s。
7、從QIAGEN RNeasy Mini Kit中取一支幹凈的2mL收集管,將離心後的濾柱移到新的收集管上,於濾柱中加入500μL Wash Buffer RPE液,12000rpm,離心15s。
8、棄收集管中的離心液,再於濾柱中加入500μL Wash Buffer RPE液,13000~14000rpm,離心2min。
9、將濾柱移到一個干凈的1.5mL eppendorf管上,向濾柱中加入30~50μL的Rnase-free Water,室溫靜置1~3min。
10、12000rpm,離心1min,收集離心液即為提取的病毒RNA,立即做實驗或-20℃以下保存。
注意:Buffer RPE使用之間加44mL無水乙醇。
(二)反應體系配製
1、實驗設計:
檢測標本RNA
質控參數:
陰性對照:無菌水(標本RNA提取時,跟標本同時提取無菌水。)
陽性對照:已知病毒RNA
2、PCR反應體系配製(在體系配製區配反應液)
1)按下表加入試劑:
PCR反應體系 組 分 體 積(μL) RNase Free Water
5×RT-PCR Buffer 11.9×n
5×n 10mM dNTP Mixture 1×n Enzyme Mix 1×n RNase Inhibitor 0.1×n 上游引物 0.5×n 下游引物 0.5×n Total 20×n 對每一個建立的反應確定反應數(n=擬進行的PCR管數,包括陰性,陽性對)。考慮到陰性無模板對照,陽性對照,誤差,制備過量的反應混合物是必要的。具體如下:
(1)如果包括對照,樣品的數量(n)為1到14,那麼N=n+1;
(2)如果包括對照,樣品的數量(n)大於15,那麼N=n+2。
2)將上述反應液混勻,分裝到0.2mL PCR小管中,每管20μL,分別做好標記。
3)加RNA模板(在核酸提取區)
將上述分裝好的PCR小管分別加入模板。首先加入陰性對照管(5μL無菌水),然後分別加標本RNA(每管5μL),最後加入陽性對照RNA(每管5μL)。
3、RT-PCR反應
將上述加好模板的反應管混勻,短暫離心後放入PCR儀進行RT-PCR
擴增,反應程序如下: 溫度 (C) 時間 循環數 60℃ 1min 1 42℃ 10min 50℃ 30min 95℃ 15min 94℃ 30s 35 52℃ 30s 72℃ 1min 72℃ 7min 1 4℃ 保存 4、RT-PCR產物檢測
1)2.0%瓊脂糖凝膠制備:稱取2.0g Agarose,倒入耐熱玻璃瓶內,再加入電泳液(1×TBE)100mL,輕輕混勻後加熱,使Agarose完全熔化。待Agarose膠溫度降至50~60℃左右,加入核酸染料,輕輕混勻(不要產生氣泡)。待膠溫度降至50℃左右時,將其倒入制膠板,插好電泳梳子。待膠完全凝固(約30~60min)之後,將梳子拔出。
2)將制備好的電泳膠放入電泳槽(帶梳子孔的一端在陰極),倒入電泳液(1×TBE)浸過膠面即可。
3)PCR產物各取10μL,加入2μL上樣緩沖液(6×Loading Buffer),混勻後加入電泳膠孔內(先加Marker(DL-2000)5μL,然後依次加標本PCR產物,再加陰性對照,最後加陽性對照產物)。
4)電泳電壓100V,約30~40min後看結果。
5)將電泳膠放入凝膠成像系統觀察結果並照相。
5、結果判斷
在系統成立,即陰陽性參考均正常的條件下,各引物所代表意義如下: PCR引物 待檢樣品1 待檢樣品2 待檢樣品3 待檢樣品4 待檢樣品5 待檢樣品6 FluA _ + + + + +/- H1HA _ _ + + + +/- HuH1HA _ _ + _ _ +/- SWH1HA-1 _ _ _ + _ +/- RnaseP + + + + + _ 結果判斷 非甲型流感病毒 甲型流感病毒
非H1N1亞型 人季節性H1N1亞型流感病毒 豬H1N1亞型流感病毒
送國家流感中心復核 送國家流感中心檢測 標本不是人源標本/標本中細胞量少/實驗或儀器問題

C. 流感疫情爆發時……紅外線測溫儀的工作原理
任何物體溫度都高於絕對零度,都會有紅外輻射發出,其全幅射強度與其溫度的4次方成正比,通過測量物體紅外輻射強度,可以得出物體的溫度,也就是說紅外線測溫儀通過測量物體紅外輻射強度來換算出物體溫度
D. 什麼是流感
簡介
流行性感冒簡稱流感,是由甲(A),乙(B),丙(C)三型流感病毒分別引起的急性呼吸道傳染病。甲型流感病毒常以流行形式 出現,能引起世界性流感大流行,它在動物中廣泛分布,並也能在動物中引起流感流行和造成大量動物死亡。乙型流感病毒常常引起局部爆發,不引起世界性流感大流行,至今尚未找到它存在於人之外其它動物中的確鑿證據。丙型流感病毒主要以散在形式出現,主要侵襲嬰幼兒,一般不引起流行,豬也是它天然宿主之一。
流感在流行病學上最顯著特點為:突然爆發,迅速蔓延,波及面廣,具有一定的季節性(我國北方流行 一般均發生在冬季,而南方多發生在夏季和冬季)。一般流行3—4周後會自然停止(世界性大流行常有2—3個流行波),發病率高但死亡率低。感染率最高的為青少年,高危人群為年邁體弱或帶有慢性疾病患者。每次流感流行後在人群中總要造成不同程度的超額死亡。
分類
一,典型流感
開始可表現為畏寒、發熱,體溫可高達39-40℃,同時患者感頭痛、全身酸痛、軟弱無力,且常感眼乾、咽干、輕度咽痛。部分病人可有噴嚏、流涕、鼻塞。有時可見胃腸道症狀,加惡心、嘔吐、腹瀉等。
發熱與上述此狀一般於1-2天達高峰,3-4日內熱退,症狀隨之消失。乏力與咳嗽可持續l-2周。
二,輕型流感
起病急、發病輕、全身症狀與呼吸道症狀均很輕。
三,肺炎型流感
即流感病毒性肺炎,24小時內病情迅速加重,表現為高熱、乏力、煩躁、劇咳、呼吸困難、發紺,咳有血痰,雙肺密布濕性羅音和喘鳴,脈快細弱,病死率較高。此類病人較少見,主要發生於原有心臟病、慢性肺病患者或妊娠婦女。
四,腦炎型流感
患者起病驟急,一開始就非常嚴重,常表現為高熱、神志不清,頸項強直、抽搐等腦炎的症狀。
20世紀人類面臨的主要流感類型
1918
「西班牙流感 」(與豬流感病毒類似的H1N1病毒),可能來源於帶有突變H1N1病毒的豬或禽類寄主
大流行,造成全球2000萬人死亡
1957
「亞洲流感」(H2N2), 起源於亞洲的一隻動物同時感染了人H1N1病毒與禽H2N2病毒株
重大流行,H1N1病毒消失
1968
「香港流感」(H2N2), 很可能起源於亞洲的一隻動物交叉感染了人H2N2病毒株與禽H3Nx 病毒株
重大流行,H2N2病毒消失
1977
「俄羅斯流感」(H2N2)
起源不明,但是病毒與1950流行的病毒特徵完全相同,幾乎在中國和俄羅斯同時再現
惡性流傳,主要影響的是50年代以後出生的人群。從1977年H1N1病毒與H3N2病毒一直共存
1976
「豬病毒」(H1N1), 美國新澤西。這種地方性病毒至少從1930年開始在美國豬群中出現
在軍事營地局部暴發,有一例死亡病例發生於局部地區,傳染給人類的病例少
1986
H1N1, 荷蘭。豬病毒源於禽類。
1988
「豬病毒」(H1N1), 美國威斯康興。豬病毒
一孕婦在接觸到病豬後死亡
1993
H3N2, 荷蘭。由豬將「古老」的人H3N2(類似於1973到75流行的病毒)與禽H1N1重新組合
有2個兒童輕度染病。懷疑其父親與豬有接觸造成傳染
1995
H7N7, 英國。鴨病毒
一成人患結膜炎
1997
「禽流感」(H5N1), 香港。禽類
確認有18例感染,6例死亡
1999
H9N2, 中國大陸和香港。鵪鶉類流感病毒
2例輕微感染
對流感,我們其實很無知
李虎軍
流感並不是什麼新鮮玩意兒,每年冬季它都會給全球製造一些麻煩,這次流感也不過是一次例行造訪。但是,讓科學家們坐立不安的是,一場規模和危害將遠遠超過今冬的流感風暴可能正在逼近人類。
如果你不幸被流感這個「冬季幽靈」侵襲,你多半會覺得也沒什麼大不了的。當然,你可能會去求醫問葯,然後在家裡度過至少7天痛苦而漫長的「假期」。可是假如你了解了以下情況,就不會那麼小瞧它了。
就拿美國來說,據《科學》雜志報道,在流感高發季節,由於勞動力減少和醫療費用增加,給美國帶來的經濟損失超過120億美元。另外,每年都有2萬以上的美國人因為流感而喪生。
如果與1918年席捲全球的流感風暴相比,這些損失簡直是小巫見大巫了:共有2000萬—4000萬人死亡,超過第一次世界大戰中死亡人數的總和。而最近一次橫掃全球的流感發生在1968年,奪走了全世界近50萬人的生命,其中絕大多數是老年人,但是,也有許多曾經健康的年輕人。
為什麼流感有時只是讓你一周不得安寧,有時卻可能將你永遠打垮呢?科學家們最近發現,流感爆發是因為出現了致命的病毒變種。而英國《自然》雜志1月9日的在線新聞稱,這樣的致命病毒變種平均每30年至40年出現一次。「上次流感爆發至距今已有34年,這就是為什麼我們每個人都坐立不安的原因。」英國獸醫實驗室中心的布朗說。
這種危險在1997年已經露出苗頭。那一年,香港有18人被一種禽流感病毒感染,最終6人喪生。2001年5月,香港又發現了禽流感病毒,盡管這一次的病毒被認為不會感染人類,香港政府仍然不惜損失2·45億港幣,處死了大約1300萬只家禽。盡管有香港研究人員批評香港政府「完全是過敏」,但也有研究人員相信這種行動可能防止了流感的爆發。
許多科學家預測,流感的下一次爆發會像上一次一樣從東南亞開始。東南亞有許多家禽或牲畜市場,而家禽或牲畜是流感病毒致命變種的溫床。世界衛生組織(WHO)流感合作中心的韋布斯特說:「活禽市場是這些病毒的滋生地。」有科學家認為,1918年的流感病毒,就是由豬的流感病毒基因與人的流感病毒基因融合而成,從而形成了席捲全球之勢。
要避免流感再一次爆發,最重要的是,及時察覺病毒致命變種和准備相應疫苗。WHO自1948年啟動了全球流感監測網路。每年,WHO都要匯總各國流感病毒毒株的流行情況,然後分析下一年可能流行的病毒類型並提前6個月公布結論,廠家則以此為依據生產疫苗。盡管許多人認為這個網路行之有效,但它目前的工作效率和研究水平並不能保證病毒致命變種一旦出現時作出准確而迅速的反應。
即使是在與流感的常規較量中,人類也還處於下風。例如,目前沒有能夠徹底治療的特效葯,也沒有能夠徹底預防的疫苗。盡管科學家們在不斷努力,但正如法國流感中心的阿馬德所說:「流感是如此平常,我們卻知道得如此之少。」
E. 水流感傳器的工作原理
水流感測器主要由銅閥體、水流轉子組件、穩流組件和霍爾元件組成。它裝在熱水器的進水端用於測量進水流量。當水流過轉子組件時,磁性轉子轉動,並且轉速隨著流量成線性變化。霍爾元件輸出相應的脈沖信號反饋給控制器,由控制器判斷水流量的大小,調節控制比例閥的電流,從而通過比例閥控制燃氣氣量,避免燃氣熱水器在使用過程中出現夏暖冬涼的現象。水流量感測器從根本上解決了壓差式水氣聯動閥啟動水壓高以及翻板式水閥易誤動作出現干燒等缺點。它具有反映靈敏、壽命長、動作迅速、安全可靠、連接方便利啟動流量超低(1.5L/min)等優點,深受廣大用戶喜愛。
F. 閱讀下面的短文全球抗擊甲型H1N1型流感病毒2009年6月11日,世界衛生組織總幹事陳馮富珍宣布把甲型H1N1流
(1)紅外線測溫儀是利用紅外線熱作用很強工作的,物體溫度越高,輻射紅外線的本領越強.
(2)凸透鏡對光線有會聚作用,紅外線測溫儀利用凸透鏡把物體輻射出的紅外能量會聚起來,聚焦在光電探測器上.
(3)紅外測溫有著響應時間快、精確、非接觸、使用安全、方便及使用壽命長等優點.
(4)室內負壓說明室內壓強小於外界壓強,使病毒分子不容易擴散到室外,防止疾病傳播.
故答案為:(1)紅外線熱作用強;溫度;(2)凸透鏡;(3)非接觸(答案不唯一);(4)隔離室內的氣壓小與外界大氣壓,使病毒分子不易擴散到外界.
G. 日本機場用紅外熱像儀檢測大面積人群防控豬流感疫情
隨著溫度的升高,病菌會慢慢的死去。你的儀器可能賣不掉了。